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自噬调节剂对莱菔硫烷诱导Caco-2细胞自噬效应及UGT1A1表达的影响
目的 观察以人结肠腺癌细胞Caco-2为模型,探讨3-甲基腺嘌呤(3-MA)及雷帕霉素(Rapa)对莱菔硫烷(SFN)诱导细胞自噬及葡萄糖醛酸转移酶1A1 (UGT1A1)的影响.方法 采用Western印迹法测定微管相关蛋白1轻链3(LC3)和UGT1A1,采用免疫荧光法观察LC3的胞内分布及核因子E2 P45相关因子2(Nrf2)的核内转位,实时荧光定量PCR法测定UGT1A1、人孕烷X受体(hPXR)的mRNA表达.结果 SFN对LC3-Ⅱ蛋白的诱导呈浓度和时间依赖性,3-MA及Rapa可分别减弱或增强LC3-Ⅱ蛋白的表达；与对照组相比,Rapa、SFN及SFN+Rapa可诱导UGT1A1 mRNA的表达增强(分别为对照组的2.4倍、4.12倍、2.41倍,均P＜0.01),且诱导UGT1A1蛋白的表达增强；对照组未见明显的Nrf2核内荧光标记,而含有SFN的处理组中可见强烈的Nrf2核内荧光标记,且SFN+Rapa更为明显；与对照组相比,Rapa及SFN+Rapa的hPXR mRNA表达增强(分别为对照组的1.82倍、1.4倍,均P＜0.01).结论 3-MA和Rapa可分别减弱或增强SFN对Caco-2细胞自噬效应的诱导；Rapa可进一步增强SFN对UGT1A1的诱导；Rapa联合SFN可能通过同时激活Nrf2和hPXR增强了对UGT1A1的诱导.
关键词： 莱菔硫烷 3-甲基腺嘌呤 雷帕霉素 细胞自噬 葡萄糖醛酸转移酶1A1 -
葡萄糖醛酸转移酶1 A1 G71R突变和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷对新生儿胆红素浓度的影响
目的探讨葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)基因G71R突变、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺陷对新生儿生后前3d胆红素浓度的影响.方法测定81例新生儿脐血的G6PD活性及G71R基因型,分组比较生后前3d光疗前胆红素值的组间差异.用等位基因特异性寡核苷酸探针点杂交法(ASO)确定G71R基因型.结果在G71R野生型新生儿中,G6PD缺乏组与G6PD正常组相比,生后前3d胆红素值间无统计学差异.G6PD正常新生儿中,G71R突变纯合子或杂合子的新生儿生后前3d胆红素浓度与G71R正常野生型新生儿相比无统计学差异.G6PD缺陷新生儿中,同时合并有G71R突变纯合子或杂合子的新生儿组生后第2天、第3天胆红素浓度高于G71R正常野生型新生儿组.结论G6PD缺乏与G71R基因突变并存加重新生儿黄疸程度.
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放射测定胎鼠肝脏尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1活性
目的 探讨大鼠肝脏发育不成熟期葡萄糖醛酸转移酶1A1活性的发育规律,为研究新生儿期葡萄糖醛酸结合反应提供实验依据.方法 用Heridrun Matern方法放射测定不同孕龄(孕17～19 d各5只)及出生后不同日龄(生后1～5 d各10只,生后2周的5只)大鼠的肝脏葡萄糖醛酸转移酶1A1活性.结果 大鼠肝脏在孕17～19 d UGT1A1活性较低,而且增长幅度小,孕19 d酶的活性占成熟鼠活性的6.7%.生后1～2 d时增长幅度很大,生后5 d基本达成熟鼠水平,占成熟鼠活性的88.1%.将孕17 d、孕19 d、生后1 d、成熟鼠这4组UGT1A1活性进行统计学检验,具有统计学意义.结论 不成熟大鼠肝脏葡萄糖醛酸转移酶1A1活性很低,导致此期的胆红素葡萄糖醛酸结合反应水平低下.
关键词： 葡萄糖醛酸转移酶1A1 肝脏 放射测定
