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五倍子水提取物对小鼠低氧/复氧损伤的保护作用研究
目的 探讨五倍子水提取物对小鼠低氧/复氧损伤的保护作用.方法 将30只昆明种小鼠,随机分为3组:对照组,模型组和治疗组.对照组和模型组动物用生理盐水灌胃处理4周,治疗组用五倍子水提取物灌胃处理4周后,造成模型组和治疗组动物低氧/复氧损伤.观察血中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量和过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性变化.结果 模型组与对照组比较,血中MD A和R OS含量增多,SO D、G S H-P x和C AT活性降低.治疗组与模型组动物比较,血中MDA和ROS含量降低,SOD、GSH-Px和CAT活性增强.结论 五倍子水提取物对小鼠低氧/复氧损伤有明显的保护作用.
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五倍子水提取物对人牙周膜细胞保护作用的实验研究
目的:观察五倍子水提取物对内毒素(LPS)所致人牙周膜细胞(PDLC)活性降低、超微结构损伤、在牙骨质片表面附着减少、以及碱性磷酸酶(ALP)活性降低的影响,探讨五倍子水提取物对PDLC的保护作用.方法:采用细胞培养技术、3H-TdR掺入法、细胞计数法、透射与扫描电子显微镜技术、酶联免疫技术观察五倍子水提取物对PDLC的保护作用.结果:培养液中加入100μg/mL LPS时,PDLC活性和ALP活性受到明显抑制,超微结构损伤,细胞在牙骨质片表面附着减少.加入五倍子水提取物溶液后,对LPS抑制PDLC活性和ALP活性,以及超微结构损伤、牙骨质片表面附着减少有拮抗作用,该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加,到10μg/mL时,达到峰值.结论:五倍子水提取物对PDLC具有保护作用,有望成为防治牙周病的药物.
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五倍子水提取物对胶原酶活性的影响
目的:观察五倍子水提取物对牙周炎组织中胶原酶活性的影响,并探讨其抗炎作用机制.方法:应用羟脯氨酸检测法,观察6.25 ug/ml、12.5 ug/ml、25 ug/ml、50 ug/ml、100 ug/ml 5种浓度五倍子水提取物对胶原酶活性的影响.结果:与胶原酶组比较,各浓度组五倍子水提取物均能明显降低胶原酶活性,其作用呈浓度依赖性.但浓度在100 ug/ml以内时,其抑制效果比5 ug/ml的强力霉素低.结论:五倍子水提取物能够阻断胶原酶对结缔组织的破坏作用,抑制或减缓牙周炎的进展.
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五倍子水提取物对金黄色葡萄球菌生物膜的影响
目的 研究五倍子水提取物对金黄色葡萄球菌生物膜的影响.方法 采用试管二倍稀释法测定受试药物的低抑茵浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),用平板改良法体外模拟金黄色葡萄球菌生物膜模型,并检测五倍子水提取物不同的MIC浓度对金黄色葡萄球菌生物膜的影响作用,扫描电镜确认.结果 五倍子水提取物对金黄色葡萄球菌的MIC值为64 mg/mL,当增加药物浓度至1.5倍MIC(96 mg/mL)和2倍MIC(128 mg/mL)分别于4、8和24 h作用金黄色葡萄球菌生物膜时,活菌数明显减少,与生理盐水对照组比较,差异有显著性(P＜0.05),但24h内金黄色葡萄球菌BF中的细菌不能被完全清除.各时间段之间活菌数差异没有显著性(P＞0.05).结论 五倍子水提取物对金黄色葡萄球菌生物膜有清除影响,具备开发应用的潜力,但还需进行药物配方和临床用药研究.
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五倍子水提取物对Pg LPS诱导单核细胞分泌IL-6的抑制作用
目的:研究五倍子水提取物对牙龈卟啉菌(Pg)内毒素(LPS)介导的人单核细胞分泌IL-6水平的影响.方法:采用健康人外周血分离培养的单核细胞以25 μg/ml牙龈卟啉菌内毒素作为刺激因子,用放射免疫分析法(RIA)测定细胞培养上清中IL-6的水平,观察5 种浓度五倍子水提取物对单核细胞分泌炎性细胞因子的影响,结果:五倍子水提取物可显著抑制牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞分泌IL-6的水平,其作用在一定范围内呈浓度依赖性.结论:五倍子水提取物能够显著抑制牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞分泌IL-6的水平,提示五倍子具有一定的抗炎作用, 有助于对牙周病的防治.
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五倍子水提取物对菌斑生物膜形成过程中表面形态的影响
目的:研究五倍子水提取物在菌斑生物膜动态形成过程中对菌斑生物膜表面形态的影响.方法:采用液体二倍稀释法测得五倍子水提取物对变形链球菌、血链球菌、黏性放线菌标准株的MIC值分别为8、8、4 mg/mL.在人工口腔环境下,用以上3种标准菌株在羟基磷灰石(HA)表面形成混合菌斑生物膜.在生物膜形成过程中,实验组以2 mg/mL(低于3种菌株MIC值)的五倍子水提取物处理,对照组以生理盐水处理;在第6、24、48、72小时和第7天,通过扫描电镜(SEM)观察菌斑生物膜的表面形态.结果:各时期菌斑生物膜形态,实验组与对照组相比有明显差异.随着时间的变化,实验组HA表面细菌由散在分布逐渐聚集,形成简单的团块状或片状结构,而对照组细菌由疏松逐渐密集并增厚,形成较为典型的生物膜立体结构.结论:五倍子水提取物可以改变菌斑生物膜形成过程中的菌斑形态.
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五倍子水提取物对LPS抑制PDLC的ALP活性的影响
目的:观察五倍子水提取物对LPS抑制牙周膜细胞(Periodontal ligament cell,PDLC)的ALP活性的影响.方法:本实验采用细胞培养技术和酶联免疫技术,对LPS抑制PDLC的ALP活性的影响进行观察.结果:100 μg/mL LPS可显著抑制ALP活性.加入五倍子水提取物后,对LPS抑制ALP活性有拮抗作用,该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加,到10 μg/mL时,达到峰值.另外,培养液中先加入不同浓度的五倍子水提取物溶液,培养24 h后再加入LPS时(A组),与LPS和五倍子水提取物溶液同时加入组(B组)相比,除对LPS抑制ALP活性有同样拮抗趋势外, A、B两组间比较,B组效果更佳.结论:五倍子水提取物对LPS抑制ALP活性具有保护作用.
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五倍子水提取物抑制LPS对牙周膜细胞附着牙骨质片表面的影响
目的:观察五倍子水提取物对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着的影响.方法:采用细胞培养技术,细胞计数法及扫描电镜进行观察.结果:加入五倍子水提取物溶液后,对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面的附着有明显拮抗作用,该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加,到10μg/mL时,达到峰值.另外,培养液中先加入不同浓度的五倍子水提取物溶液,培养24 h后再加入LPS时(A组),与LPS和五倍子水提取物溶液同时加入组(B组)相比,除对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着有同样拮抗趋势外,当五倍子水提取物浓度为10μg/mL、20μg/mL时,A组的细胞附着数明显高于B组.扫描电镜显示,A组与B组牙骨质片表面细胞数量较多,细胞形态丰满,细胞胞突伸展明显,并相互交织成栅栏状、网状结构,部分细胞呈叠层生长,其中A组效果更明显.结论:五倍子水提取物对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着有拮抗和保护作用.
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五倍子水提取物对牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞CD14表达改变的影响
目的:研究五倍子水提取物对牙龈卟啉菌内毒素(Pg LPS)诱导人单核细胞CD14表达改变的影响.方法:采用人外周血分离培养的单核细胞,以25 μg/mL内毒素作为刺激因子,观察五倍子水提取物对单核细胞CD14表达改变的影响,用流式细胞仪(FCM)测定细胞膜表面CD14的表达.结果:五倍子水提取物作用后,牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞膜表面CD14的表达的阳性细胞率从69.9%±2.3%下降至45.9%±3.7%.结论:五倍子水提取物能够减少牙龈卟啉菌内毒素诱导人单核细胞膜表面CD14的表达,提示五倍子具有一定的抗炎作用,有助于对牙周病的防治.
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五倍子水提取物抑制内毒素诱导人牙龈成纤维细胞分泌IL-6
目的:研究不同浓度五倍子水提取物对内毒素(LPS)介导的人牙龈成纤维细胞(HGF)分泌IL-6水平的影响.方法:采用MTT比色法和放射免疫分析法(RIA),测定五倍子水提取物对HGF增殖的影响;及对以25 μg/mL 内毒素作为刺激因子,HGF培养上清中IL-6水平的影响.结果:五倍子水提取物可显著抑制内毒素诱导HGF分泌IL-6水平,其作用在一定范围内呈浓度依赖性,同时当其浓度>50 μg/mL时,可抑制HGF增殖.结论:五倍子水提取物能够抑制内毒素诱导人牙龈成纤维细胞分泌IL-6的水平,浓度过高时对HGF增殖有影响,提示一定浓度(<50 μg/mL)的五倍子水提取物具有抗炎作用, 有助于对牙周病的防治.
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五倍子水提取物对LPS抑制人牙龈成纤维细胞DNA合成和对细胞周期改变的影响
目的:研究五倍子水提取物对内毒素(LPS)引起人牙龈成纤维细胞(HGF)DNA合成和细胞周期改变的影响.方法:采用健康人正常牙龈组织原代培养的牙龈成纤维细胞,以25 μg/mL LPS作为刺激因子,用流式细胞仪技术观察20 μg/mL五倍子水提取物对LPS引起HGF细胞周期改变的影响.结果:LPS作用后,DNA合成前期细胞比例(G1 期)明显上升,而DNA合成期细胞比例(S期)及细胞增殖指数下降,五倍子可改善此现象.结论:五倍子水提取物可显著改善LPS抑制HGF增殖,提示五倍子对牙龈组织具有保护作用,有助于牙周病的防治.
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五倍子水提取物对人牙髓细胞碱性磷酸酶及矿化的影响
目的：观察不同浓度的五倍子水提取物对人牙髓细胞碱性磷酸酶（ ALP）活性及矿化能力的影响。方法：组织块酶消化法体外培养人牙髓细胞，并分别与不同浓度的五倍子水提取物（2．5、5、10、20、40μg／mL）共同培养；于培养48 h后，采用酶组织化学法检测各组细胞的ALP活性。并根据ALP实验结果筛选出（10、20μg／mL）五倍子水提取物浓度组，与牙髓细胞共同培养30 d后，用Von Kossa染色法观察各组细胞的生长及矿化结节形成情况。结果：与对照组相比，2．5、5μg／mL的五倍子水提取物对人牙髓细胞的ALP活性无显著性影响（ P＞0．05），而浓度为10、20、40μg／mL的五倍子水提取物均可明显抑制牙髓细胞的ALP活性（P＜0．05）；Von Kossa染色结果显示，五倍子水提取物与人牙髓细胞共同培养30 d后，可促进其矿化结节的形成。结论：五倍子水提取物可在一定程度上改变人牙髓细胞的碱性磷酸酶活性及矿化程度。
关键词： 五倍子水提取物 体外培养 人牙髓细胞(HDPCs) 碱性磷酸酶(ALP) 矿化 -
五倍子水提取物对人牙髓细胞Ⅰ型胶原合成的影响
目的：观察五倍子水提取物对人牙髓细胞Ⅰ型胶原合成的影响。方法：取第6代体外培养的人牙髓细胞分别与终末浓度为5、10μg/mL的五倍子水提取物共同培养3 d后，采用免疫组化染色法观察人牙髓细胞中Ⅰ型胶原的表达情况，并用HPIAS－1000图像分析系统进行定量分析。结果：对照组和不同浓度五倍子水提取物作用的实验组人牙髓细胞中均有Ⅰ型胶原的表达，其免疫反应物质多定位于胞浆。人牙髓细胞经5、10μg/mL浓度的五倍子水提取物作用后，其Ⅰ型胶原的表达水平均明显增高，其中以10μg/mL组的增高程度大，各组间两两相比差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论：5、10μg/mL五倍子水提取物均能明显促进人牙髓细胞中Ⅰ型胶原的表达；提示其具有促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化的作用。
