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基于CRITIC-AHP权重分析法结合Box-Behnken设计-响应面法优选陈皮饮片炮制工艺
目的 优选陈皮饮片炮制工艺.方法 采用HPLC法同时测定芸香柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',4’-七甲氧基黄酮、桔皮素,以层次分析法(CRITIC-AHP)计算权重系数,多指标综合评分结合Box-Behnken设计-响应面法考察加水量、闷润时间、闷润温度对陈皮饮片质量的影响,优选陈皮炮制工艺.结果 佳炮制工艺为每千克陈皮加水量33％,闷润64 min,闷润温度45℃.结论 优选的炮制工艺简单可行,为规范陈皮饮片的炮制工艺提供参考,建立的同时测定陈皮中5种黄酮类成分的方法快速可靠,可用于陈皮饮片的质量控制.
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HPLC法测定胡柚皮中多甲氧基黄酮类成分的含量
目的:建立测定胡柚皮中多甲氧基黄酮(桔皮素和甜橙素)含量的高效液相色谱方法.方法:Kromasil C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2％冰醋酸水溶液(40:60),流速为1.0mL/min,检测波长为330nm.结果:桔皮素和甜橙素分别在0.098 4～0.295 2μg和0.091 2～0.2736μg范围内线性关系良好,相关系数r均为0.999 9.桔皮素平均回收率为99.74％,RSD为0.19％;甜橙素平均回收率为100.3％,RSD为0.28％.结论:方法操作简便,分离效果好,灵敏度高,重复性好,可用于控制胡柚皮药材的质量.
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HPLC同时测定衢枳壳中7种指标成分的含量
目的 建立HPLC同时测定衢枳壳中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、木犀草素、川陈皮素和桔皮素含量.方法 采用Agilent Extend C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,检测波长:330 nm,以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速:1mL·min-1,柱温:30℃.结果 芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、木犀草素、川陈皮素、桔皮素分别在23.30～1 164.80 ng,170.84～8 541.91 ng,17.22～861.20 ng,156.17～7 808.64 ng,3.13～156.48 ng,0.90～45.23 ng,0.85～42.27 ng内线性关系良好(r≥0.999 5,n＝6),平均回收率分别为98.8％,101.3％,98.3％,96.8％,101.8％,101.7％,108.9％.结论 首次建立了衢枳壳中7个成分HPLC含量测定方法,该方法简便,结果准确,可为综合评价衢枳壳质量提供依据.
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高效液相色谱法同时测定枳实中6种成分的含量
目的:建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定枳实药材中柚皮素、橙皮素、马尔敏、6',7'-二羟基香柠檬素、川陈皮素和桔皮素6种成分含量的方法.方法:采用Symmetry C18 (250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml· min-1,检测波长324 nm,柱温30℃.结果:柚皮素、橙皮素、马尔敏、6',7'-二羟基香柠檬素、川陈皮素和桔皮素分别在0.105～10.518,0.0865～8.647,0.106～10.620,0.106～10.575,0.131～13.103,0.137～13.743 μg·ml-1范围内呈良好的线性关系(r≥0.999 7);平均加样回收率分别为96.53％,101.15％,98.94％,97.87％,99.43％,102.87％,RSD均小于3.0％(n=6).结论:该法简便、快速、重现性好,为枳实药材及饮片的质量控制提供参考.
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桔皮素对人肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭的影响及机制研究
目的：考察桔皮素对人肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭的影响，并探讨其作用机制。方法：以0（空白对照组）、10、20、40、60、80μmol/L桔皮素分别作用于细胞24、48 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖率，并计算其半数抑制浓度（IC50）。以0、20、30μmol/L桔皮素作用细胞48 h后，采用Transwell侵袭实验考察其对细胞侵袭的影响；并分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应法和Western blot法考察其对细胞中E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、Notch-1、免疫细胞表面抗原44（CD44）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA及其蛋白表达的影响；采用Western blot法考察蛋白激酶B（Akt）、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）的磷酸化水平。结果：10～80μmol/L桔皮素对人肝癌HepG2细胞的体外增殖均具有明显的抑制作用，且呈时间和剂量依赖性，增殖率较空白对照组显著降低（P＜0.05），作用24、48 h后的IC50分别为55.7、23.4μmol/L。20、30μmol/L桔皮素作用48 h后，细胞侵袭能力明显受到抑制；细胞中N-cadherin、Vimentin、Notch-1、CD44和MMP-9 mRNA及其蛋白水平表达明显降低，E-cadherin mRNA及其蛋白表达水平明显升高，且Akt、GSK-3β磷酸化水平升高，较空白对照组差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：桔皮素可抑制人肝癌HepG2细胞的体外增殖和侵袭；其机制可能与下调细胞中Notch-1表达、抑制细胞的上皮-间质转化而抑制CD44和MMP-9的表达，以及抑制其上游Akt-GSK-3β信号途径有关。
关键词： 桔皮素 人肝癌HepG2细胞 增殖 侵袭 上皮-间质转化
