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胰岛素样生长因子-1对rhBMP-2诱导下成纤维细胞增殖及成骨转化的影响
目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在重组人骨形态蛋白2(rhBMP-2)诱导成纤维细胞(Fb)转化为成骨细胞过程中是否具有促进作用.方法 从成年新西兰大白兔背部皮肤中分离、纯化提取成纤维细胞,然后培养.将细胞分为空白对照组、rhBMP-2干预组和IGF-1+rhBMP-2干预组.空白对照组:常规培养液培养,不加入任何诱导剂及干预因子;rhBMP-2干预组:常规培养液中加入100μg/L的rhBMP-2;IGF-1+rhBMP-2干预组:常规培养液中加入100μg/L的rhBMP-2与终浓度为50μg/L的IGF-1.定期在倒置显微镜下观察Fb生长状况,并采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,同时行碱性磷酸酶(ALP)活性检测、茜素红染色及钙钴染色评价其成骨分化的能力.结果 与其他2组相比,IGF-1+rhBMP-2组细胞增殖速度快,周期短,MTT法检测示细胞生长旺盛,而空白对照组与rhBMP-2干预组之间无显著性差异.rhBMP-2干预组ALP表达高于空白对照组;而IGF-1+rhBMP-2组ALP表达明显高于其他2组.茜素红染色空白对照组未见明显钙化结节,rhBMP-2干预组细胞可见红色钙化结节,而IGF-1+rhBMP-2组钙化结节数目明显较rhBMP-2干预组多,面积增大.钙钴染色:rhBMP-2干预组和IGF-1+rhBMP-2干预组细胞胞浆中均可见浅棕色至棕黑色的细胞颗粒,但以IGF-1+rhBMP-2干预组棕黑色颗粒较多.空白对照组未见明显阳性细胞.结论 Fb在体外一定条件下经过诱导剂诱导后,可向成骨细胞方向转化.IGF-1可以促进Fb在rhBMP-2诱导下的增殖及成骨表型表达.
关键词： 成纤维细胞 胰岛素生长因子-1 重组人骨形态蛋白-2 成骨转化 细胞增殖 -
携载rhBMP-2微球的新型可注射自凝固复合人工骨的制备及特性研究
[目的]制备一种具有良好降解性和成骨活性、可注射的自凝固新型骨修复材料.[方法]制备携载rhBMP-2的聚乳酸与聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,并将其与 rhBMP-2/磷酸钙骨水泥(CPC)复合,制备出rhBMP-2/PLGA微球/CPC复合人工骨.探讨了材料的特性,包括形貌、固化时间、抗压强度及反映材料体外降解速度的指标-体外降解液Ca、P浓度变化,测定复合材料rhBMP-2的释药速度及体外诱导MSCs细胞成骨分化的能力.[结果]与单纯CPC-rhBMP-2相比,复合材料的固化时间少量增加,抗压强度下降明显.体外降解速度及体外释药明显提高,释放的rhBMP-2具有骨诱导活性.[结论]rhBMP-2/PLGA微球/磷酸钙骨水泥新型复合人工骨是具有良好应用前景的骨修复材料.
关键词： 聚乳酸与聚乙醇酸共聚物 微球 磷酸钙骨水泥 重组人骨形态蛋白-2 骨替代物 -
携载rhBMP-2微球的新型复合人工骨的释药及成骨活性研究
目的制备一种具有良好降解性和成骨活性,可注射的自凝固新型骨修复材料.方法制备携载rhBMP-2的聚乳酸与聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,并将其与rhBMP-2/磷酸钙骨水泥(CPC)复合,制备出rhBMP-2/PLGA微球/CPC复合人工骨.测定了复合材料释药速度,将复合材料及rhBMP-2-CPC分别植入兔双侧股骨髁骨缺损区域,通过X线、组织学观察比较不同时期材料的降解及成骨情况.结果复合材料各时间点的体外释药量均大于单纯rhBMP-2/CPC组,与单纯rhBMP-2/CPC材料相比较,复合材料植入体内后不同时间点材料的降解和新骨生成均高于单纯rhBMP-2/CPC植入组.结论rhBMP-2/PLGA微球的掺入可明显加快rhBMP-2的释放,提高材料的降解速度和成骨活性.
关键词： 聚乳酸与聚乙醇酸共聚物 微球 磷酸钙骨水泥 重组人骨形态蛋白-2 骨替代物 释药 成骨活性 -
新型生物活性椎间融合器的实验研究
目的:研究纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(n-HA/PA66)椎间融合器复合重组人骨形态蛋白-2(rhBMP-2)对山羊颈椎的融合效果和可行性.方法:取30只成年雌性山羊,随机分为三组:n-HA/PA66椎间融合器组、复合rhBMP-2的n-HA/PA66椎间融合器组和自体髂骨组.所有山羊均行颈3～4椎间盘及部分椎体切除术,分别植入n-HA/PA66椎间融合器、复合rhBMF-2的n-HA/PA66椎间融合器和自体髂骨块,术后4周、12周行X线检查;术后12周行组织学和生物力学评估.结果:12周时复合rhBMP-2的n-HA/PA66椎间融合器与自体髂骨在山羊颈3、4椎间均可形成骨性融合,组织学、影像学及生物力学等各项测试指标比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:n-HA/PA66椎间融合器具有良好的生物相容性、骨传导性、和生物力学特性,复合rhBMP-2后使其具有骨诱导性,加快了的椎间融合速度,是一种理想的椎间融合材料.
