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慢性粒细胞白血病患者粒细胞中碱性磷酸酶同工酶基因表达的研究
目的 探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)和视黄醇对正常人和慢性期慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)患者碱性磷酸酶同工酶(alkaline phosphatase,ALP)基因表达的诱导作用,并寻找何种同工酶的基因表达占主导地位.方法 应用半定量逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),并以肌动蛋白(β-actin)作内对照,检测了20例正常对照者和49例CML初治患者ALP基因的表达,以及G-CSF和视黄醇对其表达的诱导.结果 诱导前,骨型ALP(BALP)基因表达在正常对照组占主导地位;诱导后,CML组以BALP基因表达为主;正常对照组在诱导前后均无变化.结论 人类粒细胞主要以BALP基因表达为主;G-CSF和视黄醇在慢性期CML粒细胞中的ALP基因表达具有诱导作用.
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琼脂糖电泳法分离血清碱性肝型和骨型同工酶方法的改进
目的:介绍一种琼脂糖电泳法分离血清碱性磷酸酶肝型和骨型同工酶的改进方法.方法:将血清用神经氨酸苷酶处理,在此基础上选用四种缓冲液配制成0.7%的凝胶,加入1%的TritonX-100电泳,并进行荧光扫描.结果:四种缓冲液中巴比妥/HCL/EDTA缓冲液的分离效果好.加入神经氨酸苷酶改变了肝型和骨型的迁移率,使电泳分离距增宽.加入TritonX-100使各区带结合更紧密,同工酶更易分辨.结论:采用合适的缓冲液体系,使用神经氨酸苷酶和TritonX-100作为辅助手段并用荧光扫描,使定量测定肝及骨型同工酶成为可能,且灵敏度和精密度令人满意.
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不同组织学类型肺癌血清Amy和ALP同工酶的变化
肺唾液型淀粉酶同工酶(sAmy)在肺癌组织中表达已得到免疫组织化学定位证实.我们通过对41例不同组织学类型肺癌患者血清淀粉酶(Amy)和碱性磷酸酶(ALP)同工酶的实验分析,期望能进一步明确这些同工酶在不同组织学类型肺癌中的变化规律及其临床意义.
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粒细胞集落刺激因子诱导血液病人粒细胞中碱性磷酸酶同工酶基因表达的研究
目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和视黄醇对正常组、真性红细胞增多症(PV) 、慢性粒细胞白血病(CML)中碱性磷酸酶同工酶(ALP)基因表达的诱导作用,并寻找何种同工酶的基因表达占主导地位.方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-P CR),并以β-actin 作内对照,检测了20例正常对照者、11例PV初治患者和23例CML初治患者ALP基因的表达,以及G-CSF和视黄醇对其表达的诱导.结果诱导前,骨型ALP(BALP)基因表达在正常对照组和 PV组占主导地位,PV组的ALP基因表达显著高于正常对照组,未检测到CML组ALP基因表达;G -CSF诱导后,CML组出现ALP基因表达,仍以BALP为主,显著高于正常对照组,用G-CSF和视黄醇共同诱导后,CML组BALP基因表达明显增强,显著高于单独用G-CSF诱导;正常对照组和 PV组在诱导前后均无变化.结论人类粒细胞主要以BALP基因表达为主;G -CSF和视黄醇对CML粒细胞中的ALP基因表达具有诱导作用.
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琼脂糖等电聚焦法分离碱性磷酸酶同工酶在肿瘤诊断中的应用
目的:探讨碱性磷酸酶(ALP)同工酶在肿瘤诊断中的应用.方法:采用神经氨酸苷酶对正常人及患者血清中ALP同工酶进行处理后进行琼脂糖等电聚焦.结果:121例肿瘤患者中的92例有一等电点为6.2的区带,其阳性率为76%.结论:琼脂糖等电聚焦法分离ALP同工酶在肿瘤诊断中具有一定价值.
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琼脂糖等电聚焦法分离碱性磷酸酶同工酶在骨质疏松诊断中的应用
目的 探讨碱性磷酸酶(ALP)同工酶在骨质疏松诊断中的应用.方法 采用神经氨酸苷酶处理标本,用琼脂糖等电聚焦法(IEF)分离测定50例健康体检者和55例骨质疏松患者血清中的ALP同工酶.结果 经神经氨酸苷酶处理后,用琼脂糖IEF能分离肝和骨ALP.发现骨质疏松患者中31例有一等电点(pI)为6.8的区带,阳性率为56.4%.结论 改良的琼脂糖IEF法能分离ALP同工酶,pI 6.8的区带对骨质疏松的诊断具有一定的价值.
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血液病患者粒细胞中碱性磷酸酶同工酶基因表达的研究
目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对正常组、真性红细胞增多症(PV)、慢性粒细胞白血病(CML)中碱性磷酸酶同工酶(ALP)基因表达的诱导作用,并寻找何种同工酶的基因表达占主导地位.方法:应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),并以β-actin作内对照,检测了20例正常对照者、11例PV初治患者和23例CML初治患者ALP基因的表达,以及G-CSF对其表达的诱导.结果:诱导前,骨型ALP(BALP)基因表达在正常对照组和PV组占主导地位,PV组的ALP基因表达显著高于正常对照组,未检测到CML组ALP基因表达;G-CSF诱导后,CML组出现ALP基因表达,仍以BALP为主,显著高于正常对照组,正常对照组和PV组在诱导前后均无变化.结论:人类粒细胞主要以BALP基因表达为主;G-CSF在CML粒细胞中的ALP基因表达具有诱导作用.
