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快速诊断溶酶体缺陷引起的非免疫性胎儿水肿的方法
本文发表在2012年12月的《Prenatal Diagnosis》上.非免疫性胎儿水肿(NIHF)指除因ABO及RH溶血以外的其他原因引起的胎儿水肿,病因复杂.NIHF可经孕期超声诊断,表现为胎儿多浆膜腔积液,皮肤水肿或胎盘肿大.溶酶体缺陷可引起NIHF,如Ⅰ型粘多糖病(缺乏Aβ-艾杜糖醛酸酶)、Ⅶ型粘多糖病(缺乏β-葡萄糖醛酸酶)、Ⅱ型粘脂贮积病(缺乏n-乙酰氨基葡糖-1-转磷酸酶)、神经节苷脂贮积病(缺乏β-半乳糖苷酶)、半乳糖唾液酸贮积症(缺乏β-半乳糖苷酶和神经氨酸苷酶保护蛋白)、戈谢病(缺乏β-葡糖脑苷脂酶)和多种硫酸酯酶缺乏症(缺乏多种硫酸酯酶)等.
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琼脂糖电泳法分离血清碱性肝型和骨型同工酶方法的改进
目的:介绍一种琼脂糖电泳法分离血清碱性磷酸酶肝型和骨型同工酶的改进方法.方法:将血清用神经氨酸苷酶处理,在此基础上选用四种缓冲液配制成0.7%的凝胶,加入1%的TritonX-100电泳,并进行荧光扫描.结果:四种缓冲液中巴比妥/HCL/EDTA缓冲液的分离效果好.加入神经氨酸苷酶改变了肝型和骨型的迁移率,使电泳分离距增宽.加入TritonX-100使各区带结合更紧密,同工酶更易分辨.结论:采用合适的缓冲液体系,使用神经氨酸苷酶和TritonX-100作为辅助手段并用荧光扫描,使定量测定肝及骨型同工酶成为可能,且灵敏度和精密度令人满意.
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耐药性流感病毒
目前在日本能够使用的抗流感药物根据作用机制的不同分为两类:一类为金刚烷胺(symmetrel),另一类为神经氨酸苷酶(NA)抑制剂奥司他韦(oseltamivir)及扎那米韦(zanamivir).本文针对应用这两类药物出现的耐药性流感病毒加以概述.
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血清中唾液酸水平与恶性肿瘤相关性的探讨
唾液酸(Sialic acid,SA)是9碳糖神经氨酸的一族复合物的总称,为细胞膜的重要组成部分并参与许多重要的生理过程.其含量与癌细胞的增殖、转移浸润、接触抑制的丧失及逃避宿主细胞的免疫监视等密切相关.近年来,采用测定血清唾液酸(SA)应用于恶性肿瘤的研究已有报道[1,2],本文采用神经氨酸苷酶偶连法,对104例不同种类恶性肿瘤患者、100例非恶性肿瘤患者及100例健康体检者进行了血清中的唾液酸含量的测定,对血清中唾液酸的含量与恶性肿瘤的相关性进一步探讨.
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改良琼脂糖电泳法测定BALP在前列腺癌骨转移诊断中的应用
目的 探讨改良琼脂糖电泳法检测骨碱性磷酸酶同工酶(BALP)在前列腺癌(PCa)骨转移诊断中的应用.方法 神经氨酸苷酶处理血清,采用改良的琼脂糖电泳法分离测定50例健康体检者和163例PCa患者血清中的ALP同工酶.结果 (1)普通的琼脂糖电泳法对肝和BALP的分辨率较低,改良琼脂糖电泳法提高了分辨率.(2)PCa组的总ALP和BALP均高于对照组,PCa骨转移组的总ALP和BALP活性均显著高于对照组和无骨转移组(P<0.05),PCa无骨转移组的总ALP和BALP活性和对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论 BALP与PCa骨转移存在一定的相关性,经神经氨酸苷酶处理血清后,采用改良琼脂糖电泳法分离ALP同工酶有助于临床辅助诊断PCa有无骨转移.
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碱性磷酸酶同工酶在老年女性骨质疏松诊断中的应用
目的 探讨碱性磷酸酶(ALP)同工酶在老年女性骨质疏松诊断中的应用.方法 采用神经氨酸苷酶,用琼脂糖电泳法对体检正常者50例(对照组)和老年女性骨质疏松患者55例(骨质疏松组)血清中的ALP同工酶进行分离分析.结果 经神经氨酸苷酶处理后,琼脂糖电泳法可以分离肝和骨ALP;两组肝型ALP比较,差异无显著性意义(P > 0.05);骨型ALP比较,差异有显著性意义(P < 0.05);热失活法和电泳法检测骨ALP具有显著的相关关系(r = 0.92,P < 0.05).结论 骨型ALP可为临床诊断老年女性骨质疏松提供可靠的依据.
关键词: 肝型碱性磷酸酶同工酶 骨型碱性磷酸酶同工酶 神经氨酸苷酶 琼脂糖电泳法 老年女性 骨质疏松 -
琼脂糖等电聚焦法分离碱性磷酸酶同工酶在肿瘤诊断中的应用
目的:探讨碱性磷酸酶(ALP)同工酶在肿瘤诊断中的应用.方法:采用神经氨酸苷酶对正常人及患者血清中ALP同工酶进行处理后进行琼脂糖等电聚焦.结果:121例肿瘤患者中的92例有一等电点为6.2的区带,其阳性率为76%.结论:琼脂糖等电聚焦法分离ALP同工酶在肿瘤诊断中具有一定价值.
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碱性磷酸酶同工酶在原发性肺癌骨转移诊断中的应用
目的:探讨骨碱性磷酸酶同工酶(bone alkaline phosphatase,BALP)与原发性肺癌骨转移的相关性.方法:采用神经氨酸苷酶处理血清,琼脂糖电泳法分析测定50名健康体检者和131例原发性肺癌患者血清中的血清碱性磷酸酶(ALP)同工酶.结果:原发性肺癌组的总ALP和同工酶均高于正常对照组,原发性肺癌骨转移组的总ALP和BALP活性均显著高于对照组和无骨转移组,原发性肺癌无骨转移组的总ALP和BALP活性和对照组无显著性差异.结论:骨型ALP与原发性肺癌骨转移有一定的相关性,经神经氨酸苷酶处理血清后,采用琼脂糖电泳法分离ALP同工酶有助于临床辅助诊断原发性肺癌有无骨转移.
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流感病毒 H7 N9病毒样颗粒疫苗的研发
近,中国出现了由禽源性流感病毒A( H7N9)引起的严重性传染病,为此全球付出努力,来实现候选疫苗的快速研发。目前,非流感病毒A ( H7 N9) H7亚型流感候选疫苗在面对新近出现的流感病毒A( H7N9)时,其免疫原性低,保护效果差。一种流感病毒A ( H7 N9)重组候选疫苗,是将A/Anhui/1/2013株的血凝素( HA )、神经氨酸苷酶( NA )和 A/Indonesia/05/2005(H5N1)株的基质蛋白1(M1)克隆进杆状病毒载体,然后用该杆状病毒感染草地贪夜蛾( Sf9)昆虫细胞,再从该细胞分泌出由HA、 NA和M1组成的病毒样颗粒( VLP ),其与成熟的流感病毒颗粒相似。该疫苗从获得H7 N9基因序列进行基因构建到流感病毒A( H7N9) VLP的分泌,共用了26 d。将该疫苗分别在0 d和14 d接种Balb/c小鼠,用致死野生株进行攻击,以期评价其免疫原性和效力,对照组为非同源性的H7疫苗( A/chicken/Ja-lisco/CPA1/2012( H7N3)-VLP )、A/Indonesia/05/2005( H5 N1)-VLP 或安慰剂。所有的疫苗添加或不添加 ISCOMATRIX 佐剂。流感病毒 A ( H7 N9) VLP疫苗诱导针对同源性流感病毒A ( H7 N9)的血凝抑制( HAI )抗体,滴度≥1∶64。该疫苗对异源的流感病毒A( H7N3)能产生交叉反应,抑制血红细胞凝集,同时与相应的ISCOMATRIX 佐剂亚组相比,其血凝反应高出3~4倍。类似的,该疫苗的所有剂量诱导的抗NA抗体,与ISCOMATRIX 佐剂亚组相比,其反应高出3~4倍。非同源性的H7疫苗能诱导H7N3和H7N9的HAI ,但不能产生抗N9 NA的抗体。用致死的野生株A/Anhui/1/2013( H7 N9)攻击小鼠,接种A(H7N9)和A(H7N3)疫苗的小鼠存活率为100%,而接种A ( H5 N1)疫苗和安慰剂的小鼠,存活率为0%。总之,数据表明,重组 H7 N9疫苗研发迅速,免疫原性和效果良好,能够作为大规模流行性感冒H7 N9的候选疫苗用于人体试验。