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海尔福对去卵巢和铅中毒大鼠骨组织及血液影响的实验研究
目的:观察海尔福对去卵巢和铅中毒大鼠骨组织及血液影响,了解海尔福对去卵巢和铅中毒大鼠骨骨质疏松治疗作用,为雌激素缺乏和铅中毒所引致骨质疏松症的防治提供实验依据.方法:选取5月龄健康雌性大鼠100只,分成5组.对照组、去卵巢模型组(OVX)、铅中毒模型组(LPB)、海尔福+去卵巢模型组(H +OVX)和海尔福+铅中毒模型组(H+LPD).16周后,麻醉大鼠取左心血,处死后取双侧股骨.股骨切片光镜观察骨组织形态结构,并对血液中的钙、磷、铅、碱性磷酸酶和雌二醇进行测定,数据进行统计学分析.结果:H+LPD组骨组织结构、血钙、血磷和血红蛋白及碱性磷酸酶和雌二醇正常；0VX组、LP即D组和H+OVX组的血钙及血磷均明显降低(P＜0.01),血碱性磷酸酶活力升高(P＜0.01),骨组织形态呈现骨质疏松的病理改变；0VX组和H+OVX组的雌二醇降低(P＜0.01)；LPD组的血铅明显高于对照组(P＜0.01).结论:去卵巢和铅中毒均可引起大鼠骨质疏松,铅中毒影响血红蛋白合成,海尔福对铅中毒所致的大鼠骨质疏松有治疗作用,而对雌激素缺乏大鼠骨质疏松治疗无效.
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补肾经验方对去卵巢所致大鼠骨质疏松的防治作用
目的 探讨补肾经验方对去卵巢所致大鼠骨质疏松的防治作用.方法 雌性SD大鼠40只,去卵巢复制骨质疏松病理模型,随机分为空白对照组、模型组、雌激素组和补肾经验方组.空白组与模型组均灌胃生理盐水,2 mL/d;雌激素组灌胃给予戊酸雌二醇0.1 mg/(kg·d);补肾经验方组灌胃给予中药复方15 g/(kg·d),给药时间持续2个月.观测补肾经验方对去卵巢所致大鼠骨强度、长骨骨骼形态学分析和血清雌二醇(E2)、骨钙素(OPG)的影响.结果 雌激素和补肾经验方组大鼠骨强度、长骨骨小梁密度和血清雌二醇(E2)、骨钙素(OPG)均有不同程度的改善,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 补肾经验方能够改善去卵巢所致大鼠骨质疏松,其抗骨质疏松可能与增加骨钙素OPG水平有关.
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乌骨通胶囊对去卵巢大鼠血清肿瘤坏死因子－α和胰岛素样生长因子－1的影响
目的：观察金乌骨通胶囊含药血清对去卵巢大鼠血清肿瘤坏死因子（ TNF）－α、胰岛素样生长因子（ IGF）－1表达的影响。方法选用6月龄SD雌性大鼠60只，随机分成6组。即假手术组、模型组、金乌骨通胶囊高、中、低剂量组以及尼尔雌醇阳性对照组。按组别灌胃给药，24 w后处死，分别测定动物血清TNF－α和IGF－1含量。结果模型组与假手术组比较，血清TNF－α明显升高（ P＜0．05），IGF－1明显降低（ P＜0．01）。金乌骨通胶囊高、中剂量组与模型组比较，TNF－α明显降低，IGF－1明显增加（ P＜0．05）。结论金乌骨通胶囊对大鼠骨质疏松的治疗作用可能是通过影响TNF－α和IGF－1来实现的。
关键词： 金乌骨通胶囊 去卵巢 肿瘤坏死因子-α 胰岛素样生长因子-1 -
虾青素联合人羊膜间充质干细胞移植治疗去卵巢大鼠骨质疏松
目的 探讨虾青素联合人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对去卵巢大鼠骨质疏松的影响.方法 体外培养hAMSCs,选择雌性未孕的Wistar大鼠60只,完全随机分为假手术组、模型组、hAMSCs移植组及联合组(虾青素+hAMSCs移植),每组各15只.模型组、hAMSCs移植组及联合组行双侧卵巢切除,假手术组不切除卵巢.造模后1 w于hAMSCs移植组尾静脉注射浓度为2×106 L-1的hAMSCs细胞悬液20μl,联合组尾静脉注射等量hAMSCs细胞悬液+虾青素20 mg/kg灌胃给药,假手术组、模型组尾静脉注射等量的0.9％氯化钠注射液,连续干预12 w.分别于造模后的1、3、6、12 w检测各组大鼠的体质量变化;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨代谢指标:血清Ⅰ型前胶原氨基末端肽(PINP)、血清骨碱性磷酸酶(BAP)、尿脱氧吡啶啉(DPD)的含量变化;干预12 w后采用RT-PCR及Western印迹技术检测骨组织中骨形成蛋白(BMP)-4及护骨素(OPG)mRNA和蛋白表达.结果假手术组大鼠体重增长符合动物自然生长规律,而模型组于造模后3 w开始增长,且体重明显高于假手术组,hAMSCs移植组及联合组体重渐增,其中联合组增长幅度接近假手术组.模型组DPD明显高于假手术组,hAMSCs移植组和联合组较模型组明显降低,联合组又明显低于hAMSCs移植组(均P<0.05),联合组与假手术组比较差异无统计学意义,表明大鼠去卵巢作用被扭转.hAMSCs移植组及联合组BAP明显高于模型组(P<0.05),提示成骨活动增强,与假手术组比较,模型组PINP明显降低,hAMSCs移植组和联合明显升高(P<0.05),提示成骨活动加强.与假手术组比较,模型组骨组织BMP-4及OPG mRNA和蛋白表达水平明显下降,与模型组比较,hAMSCs移植组和联合组明显升高,联合组升高幅度较hAMSCs移植组更明显(均P<0.05).结论 hAMSCs移植对去卵巢骨质疏松大鼠具有治疗作用,与虾青素联合可更好发挥作用.
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脉络宁对老年性痴呆模型大鼠脑组织SIRT1基因表达的影响
目的 观察中药复方脉络宁和谢海洲方,西药维生素(C+E)和阿托伐他汀药物干预对老年痴呆(AD)模型大鼠脑组织SIRT1基因表达的影响.方法 用去卵巢同时腹腔注射D-半乳糖大鼠模拟早期AD模型,予以中药复方脉络宁和谢海洲方,西药维生素(C+E)和阿托伐他汀干预,采用Morris水迷宫检测大鼠用药前后学习记忆能力的变化,采用RT-PCR,Western印迹技术检测大鼠颞叶右侧皮层SIRT1基因表达的变化.结果 与假手术组相比,去卵巢并注射D-半乳糖组逃避潜伏期明显延长；给药后,与病理组相比,四个给药组总逃避潜伏期明显缩短.与假手术组相比,病理组的SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量明显降低,而与病理组相比,四个给药组的SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量均有不同程度的升高.结论 本模型大鼠颞叶皮层SIRT1 mRNA和蛋白质表达水平均降低；而脉络宁,谢海洲方,维生素(C+E),阿托伐他汀均可以不同程度的升高SIRT1 mRNA和蛋白质的表达水平,提示SIRT1表达的增加可能是这些药物对AD大鼠模型的神经保护作用分子机制之一.
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去卵巢大鼠海马及额叶皮层海马胆碱能神经刺激肽含量的变化
目的 观察雌激素缺乏对大鼠海马CA1/CA2区及额叶皮层海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)含量的影响.方法 选取清洁级4月龄雌性SD大鼠30只,随机分为3组:假手术组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)和去卵巢加雌二醇(E2)组(OVX+E2组),每组10只.除Sham组做假性手术外,其余2组均行双侧卵巢切除术;OVX+E2组去卵巢手术10 d后给予E2皮下注射,100 μg/kg,隔日1次.去卵巢手术后常规喂养4个月,获取组织标本,用于组织蛋白和组织总RNA的提取.用Western印迹法测定大鼠海马和皮层C-HCNPpp、N-HCNPpp的相对含量.用RT-PCR技术检测HCNPpp mRNA水平.结果 OVX组大鼠海马和皮层中C-HCNPpp的相对含量较Sham组和OVX+E2组明显升高(P＜0.05),而Sham组和OVX+E2组之间无显著差别(P＞0.05),三组大鼠之间的海马和皮层中N-HCNPpp的相对含量差异不显著(P＜0.05);OVX组和OVX+E2组大鼠HCNPpp mRNA表达与Sham组无显著差异(P＞0.05),OVX+E2组大鼠HCNPpp mRNA表达与OVX组相比增高(P＜0.05);三组大鼠皮层HCNPpp mRNA表达无显著差异(P＞0.05).结论 雌激素缺乏可导致大鼠海马CA1/CA2区及额叶皮层HCNP的增多.
关键词： 去卵巢 雌激素 海马 额叶皮层 海马胆碱能神经刺激肽(HCNP) -
石榴籽油对去卵巢大鼠骨质代谢的影响
目的：探讨石榴籽油对去卵巢大鼠骨质代谢的影响。方法50只3月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、己烯雌酚组、低石榴籽油组和高石榴籽油组，每组10只。假手术组保留卵巢，其余组则将双侧卵巢去除，已烯雌酚组每天用100μg／kg己烯雌酚灌胃，低石榴籽油组和高石榴籽油组每天分别给予石榴籽油0．95 g／kg和1．27 g／kg剂量灌胃。对大鼠血清钙（ Ca）、磷（ P）含量以及碱性磷酸酶活性（ ALP）、超氧化物歧化酶（ SOD）和丙二醛（ MDA）水平进行检测，并对下颌骨、股骨中段和远心端骨密度进行检测。结果与去卵巢组相比，己烯雌酚组、低石榴籽油组和高石榴籽油组大鼠血清Ca、P含量及 ALP活性均降低，低石榴籽油组和高石榴籽油组大鼠血清 SOD 水平升高，而 MDA 水平降低（ P＜0．05）；与己烯雌酚组相比，低石榴籽油组大鼠血清Ca、P和SOD含量升高，而 MDA含量降低，高石榴籽油组大鼠血清 SOD含量升高，而 MDA降低（ P＜0．05）；与去卵巢组相比，己烯雌酚组、低石榴籽油组和高石榴籽油组大鼠下颌骨、股骨中点和股骨远端骨密度均升高（ P＜0．05）。结论补充石榴籽油可有效降低去卵巢大鼠骨质转化活性，抑制骨密度降低，而这种作用可能与石榴籽油雌激素作用及抗氧化作用有关。
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长期有氧运动对去卵巢大鼠骨组织中内源性硫化氢生成的影响
目的 探讨长期有氧运动对去卵巢大鼠骨组织中内源性硫化氢生成的影响.方法 实验分为三组:假手术组,骨质疏松模型组(去卵巢组),去卵巢+运动组(运动组).运动为跑台运动,持续12 w.结果 经过长期有氧运动之后,去卵巢组大鼠股骨骨密度(BMD)和骨矿物质含量明显增加;股骨极限负荷和刚度明显增加,血浆硫化氢水平明显增加;股骨中胱硫醚β合酶和胱硫醚γ分解酶表达水平明显上调;血浆丙二醛(MDA)含量明显降低(均P<0.05);3-疏基丙酮酸硫基转移酶变化差异无统计学意义(P>0.05).结论 长期有氧运动增加去卵巢大鼠骨组织中内源性硫化氢的生成,从而减轻氧化应激,终有助于减轻去卵巢大鼠的骨质丢失.
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去卵巢对大鼠Wnt／β-catenin信号通路的影响
目的：探索去卵巢对大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将20只3月龄SD雌性大鼠随机分为去势组和正常对照组，每组10只。去势组大鼠行双侧卵巢切除术，正常对照组大鼠不作任何处理。去除卵巢12 w后，取血检测血清雌二醇、骨源性碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶水平；取左股骨进行骨密度检测；取右股骨骨髓检测低密度脂蛋白受体相关蛋白5（ LRP5）和β-catenin mRNA和蛋白表达。结果去势组大鼠血清雌二醇水平较正常对照组显著下降（P＜0.01），骨源性碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶水平较正常对照组显著增高（P＜0.01）；去势组大鼠骨密度比正常对照组显著降低（P＜0.01）；去势组的β-cantenin mRNA和蛋白表达比正常对照组显著增高（P＜0.05），尽管去势组的LRP5 mRNA和蛋白表达比正常对照组增高，但差异没有统计学意义。结论大鼠去卵巢12 w后Wnt/β-catenin信号通路被激活。
关键词： 骨质疏松 去卵巢 Wnt/β-catenin信号通路 -
运动和尼尔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨矿盐含量的影响
目的 观察运动和尼尔雌醇(CCE<,3>)联合应用对去卵巢大鼠骨矿盐含量的影响.方法 将健康4月龄雌性SD大鼠40只随机分成5组:正常对照组;假去卵巢组;去卵巢组;去卵巢+CCE<,3>组;去卵巢+CCE<,3>+运动组,每组8只.去卵巢+CCE<,3>组和去卵巢+CCE<,3>+运动组大鼠于去卵巢手术后第2天开始给予CCE<,3>灌胃,0.5 mg/kg,1次/w,持续11w.去卵巢+CCE3+运动组大鼠于去卵巢术后第7天开始运动训练,每周5 d,每日连续匀速跑45 min,16 m/min,跑道倾角0°,持续10 w.结果 去卵巢组大鼠骨干重、骨干重/体重、骨灰重、骨灰重/体重、骨灰重/骨干重(%)均低于假去卵巢组(P<0.01);去卵巢+CCE<,3>组大鼠骨干重、骨干重/体重、骨灰重、骨灰重/体重、骨灰重/骨干重(%)等指标虽然较去卵巢组增加,但仍低于假去卵巢组(P<0.01);CCE<,3>与运动联合应用后,上述各指标均回升(P<0.01),并且基本恢复到对照组水平.结论 运动可加强CCE<,3>抗去卵巢大鼠骨矿盐丢失的作用.
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结缔组织生长因子在去卵巢大鼠骨丢失中的作用
目的 通过检测绝经后骨质疏松(PMOP)模型大鼠骨组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达水平,探讨CTGF在去卵巢(OVX)大鼠骨丢失中可能的作用.方法 3月龄成年雌性Sprague/Dawley(SD)大鼠30只,随机分为3组,每组10只:①Sham组;②OVX组;③OVX+E组.用药12 w后,检测大鼠股骨及腰椎骨密度(BMD)后处死大鼠,应用免疫组化法观察骨组织中CTGF的表达水平.结果 与Sham组相比,OVX组大鼠BMD下降,骨小梁周边CTGF阳性细胞表达增多且增强;OVX+E组BMD与Sham组比较无明显差异,骨小梁周边CTGF阳性细胞呈微量表达.相关分析显示,OVX组大鼠骨组织中,CTGF与BMD呈负相关;Sham组与OVX+E组大鼠骨组织中,CTGF与BMD无明显相关性.结论 在OVX大鼠骨组织中BMD下降,CTGF表达增强,推测CTGF在PMOP的发病机制中可能发挥重要作用,且雌激素能阻止CTGF的过度表达.
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中药治疗对去卵巢大鼠骨质疏松动物模型血钙、血磷、碱性磷酸酶与骨密度的影响
笔者对去卵巢大鼠骨质疏松模型予以新研制的未上市的中药进行治疗,测量各组实验大鼠血清中血钙、血磷、碱性磷酸酶(ALP)和大鼠骨密度并进行分析,现将结果报道如下.
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绝经后骨质疏松症模型观测方法和指标比较
骨质疏松症是危害中老年人健康的常见病,为此国内外许多学者陆续建立了多种大鼠绝经后骨质疏松症模型[1～3],对绝经后骨质疏松症进行研究,其中以去卵巢成年雌性大鼠骨质疏松症模型为常见.骨质疏松症模型中常用的观测指标有骨密度和骨组织形态计量学参数(骨小梁面积百分率,骨小梁厚度和骨小梁数目).这两种方法优缺点比较以及不同指标在绝经后骨质疏松症模型观测中的敏感性,在文献中报道较少.本实验通过观测去卵巢雌性SD大鼠术后28 d及56 d不同部位的骨密度和骨组织形态计量学参数变化,探讨两种方法的优缺点及不同骨组织形态计量学指标敏感性和稳定性的差异.
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苯甲酸雌二醇对去卵巢大鼠慢性前脑缺血脑保护作用的研究
目的 观察苯甲酸雌二醇对去卵巢大鼠慢性前脑缺血脑组织病理形态、学习记忆以及死亡率的影响,探讨雌激素对慢性缺血性脑损害的保护作用.方法 50只健康雌性Wistar大鼠,随机分为4组.A组:正常对照组,n=5;B组:假去卵巢缺血组,n=15;C组:去卵巢缺血组n=15;D组:去卵巢缺血苯甲酸雌二醇治疗组.各组按要求制备模型,应用Morris水迷宫筛选并检测记忆功能,坚劳蓝+焦油紫染色、CD31免疫组化染色观察额叶皮质和海马CA1区神经元毛细血管变化. 结果 A组大鼠额叶皮质和海马CA1区神经元、毛细血管形态正常,学习记忆功能良好,B、C、D组与A组相比上述指标改变明显,差异具有显著性(P＜0.05),而且C组改变明显重于B、D组(P＜0.05);C组额叶皮质神经元、毛细血管和海马CA1区神经元数量减少,与A、B、D组相比差异具有显著性(P＜0.05),B、D组相比上述改变无差异(P＞0.05);缺血后各组大鼠急性期死亡率比较,差异无显著性(P＞0.05).结论 雌激素对去卵巢慢性前脑缺血大鼠额叶皮质及海马CA1区病理变化以及学习记忆功能均产生了有益的影响,但未能降低急性期大鼠的死亡率.
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去卵巢大鼠胆碱能神经系统改变及雌激素保护作用机制的研究
目的观察去卵巢大鼠胆碱能神经系统的改变及雌激素对其影响.方法利用免疫组织化学染色结合图像分析方法观察去卵巢大鼠海马CA1区胆碱乙酰转移酶(ChAT)的变化;利用RT-PCR方法检测去卵巢大鼠基底前脑神经生长因子(NGF)mRNA表达的变化.结果去卵巢大鼠海马CA1区ChAT的积分光密度(OD)值降低,基底前脑NGF mRNA平均表达水平明显降低,补充雌激素后以上各项指标均明显提高.结论(1)去卵巢大鼠海马CA1区胆碱能神经元ChAT活性下降,基底前脑胆碱能神经元NGF mRNA表达水平降低.(2)雌激素能够上调去卵巢大鼠NGF mRNA表达,而NGF能够增强ChAT的活性,促进乙酰胆碱(Ach)的合成和释放,改善学习记忆能力.
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蛋氨酸负荷对去卵巢大鼠血脂及一氧化氮的影响
目的:探讨蛋氨酸负荷对去卵巢大鼠血脂及一氧化氮水平(NO)的影响.方法:将4个月月龄雌性SD大鼠24只随机分为三组:假手术组(SHAM组)、去卵巢组(OVX组)、蛋氨酸组(去卵巢加蛋氨酸,MET组).去卵巢术后1周,给予蛋氨酸灌胃,测定血清同型半胱氨酸(Hcy)、血脂和NO水平.结果:MET组血清Hcy、总胆固醇及低密度脂蛋白水平较SHAM组、OVX组明显升高,NO水平较SHAM组、OVX组明显降低.结论:蛋氨酸负荷加重去卵巢大鼠的高同型半胱氨酸血症,诱发脂代谢紊乱,引起NO水平降低,继而促发了去卵巢大鼠动脉粥样硬化的发生.
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右归饮对去卵巢血管钙化大鼠谷氨酸NMDA受体mRNA表达的影响
目的:观察右归饮对去卵巢血管钙化谷氨酸NMDA受体mRNA表达的影响.方法:40只SD雌性大鼠随机分为假手术组,模型组,低剂量组,高剂量组以及辛伐他汀组,采用华法令加注射维生素D3制备血管钙化模型,并于造模后中药低剂量组、高剂量组分别给予右归饮浓缩液5.35 g/(kg·d)、16.05 g/(kg·d)灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬水溶液5.25 mg/(kg·d)灌胃.假手术组和模型组给予等量生理盐水,共12周.于实验结束时采集血浆标本测定雌二醇和血脂的情况并应用FQ-PCR法检测谷氨酸离子受体mRNA表达.结果:模型组大鼠雌二醇、甘油三酯含量及NR1、NR2a、NR2bmRNA相对表达量明显降低,低密度脂蛋白含量明显升高,与假手术组比较,有统计学意义(P＜0.05);中药高剂量组和低剂量组可提高雌二醇、甘油三酯以及NR1、NR2a、NR2b mRNA的表达,与模型组比较,有统计学意义(P＜0.01),低剂量组、高剂量组和辛伐他汀组的LDL含量下降,与模型组比较,有显著性差异(P＜0.05).结论:右归饮可抑制去卵巢血管钙化的形成,可能与提高雌二醇水平以及上调NR1以及NR2a、NR2b mRNA表达有关.
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氯化镓对去卵巢大鼠NO、IL-6、 TNFα影响的实验研究
目的研究氯化镓对去卵巢大鼠一氧化氮、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子α的影响,探讨氯化镓影响去卵巢大鼠骨代谢的作用机理.方法通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松模型,经氯化镓治疗12周后,用生化、放免法检测血清一氧化氮、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子α及其它相关指标;单光子法测量骨密度;测定骨病理形态学指标.结果氯化镓治疗组与骨质疏松对照组相比,血清一氧化氮升高,肿瘤坏死因子α降低,骨质疏松状况得到改善.结论氯化镓抗骨质疏松作用可能与其对一氧化氮、肿瘤坏死因子α等因子的调节有关.
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淫羊藿定对骨质疏松大鼠的治疗作用及机制研究
目的 观察淫羊藿定对去双侧卵巢导致骨质疏松症大鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制.方法 雌性SD大鼠48只,手术切除双侧卵巢,术后恢复4周,复制骨质疏松大鼠模型.随机分为4组,即淫羊藿定高剂量组(800 mg/kg)、低剂量组(200 mg/kg),骨化三醇组(1μg/kg)和模型组(等量蒸馏水).另取12只大鼠,开腹腔剥离卵巢但不切除作为假手术组(等量蒸馏水).各组大鼠连续给药12周后处死,取大鼠股骨,骨密度仪测定干骺端骨密度;切片观察骨组织形态改变;荧光定量PCR检测骨组织中OPG、RANK、RANKL mRNA表达.结果 淫羊藿定显著提高了骨质疏松大鼠股骨上干骺端骨密度,使骨小梁密集,排列较整齐,且提高了成骨细胞数量.同时,还明显提高了骨组织中OPG mRNA表达,降低了RANK mRNA的表达.结论 淫羊藿定对骨质疏松大鼠具有明显的治疗作用,其作用机制与提高骨组织中OPG mRNA表达,降低RANK mRNA的表达有关.
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葛根对去卵巢大鼠骨质疏松作用的研究
目的:研究葛根对去卵巢大鼠骨质疏松的作用.方法:将去卵巢大鼠随机分为5组:骨质疏松模型组、葛根高剂量组、葛根中剂量组、葛根低剂量组、雌激素组,并以体重、鼠龄相匹配的假手术大鼠作为对照组.手术一个月后开始给药,连续给药3个月后检测骨骨钙含量、骨密度、股骨病理变化.结果:与对照组大鼠比较.去卵巢大鼠葛根应用剂量越大,其各项指标越接近对照组,而雌二醇组的治疗效果相比差异无显著性.结论:葛根有明显抗去卵巢大鼠骨质疏松的作用.
