VEGF及其受体在动脉粥样硬化中的作用

近十年来的研究已证实VEGF在生理性和病理性血管形成(Angiogenesis)中起着关键作用.VEGF主要通过2个酪氨酸激酶受体发挥作用:VEGF receptor-1(Flt-1)和VEGF receptor-2(KDR/Flk-1).VEGFR-2介导VEGF促进血管内皮细胞增殖、迁移、促进内皮细胞存活、增加血管通透性等作用.VEGFR-1可能主要作为一个配体结合分子,对VEGF/VEGFR-2信号通路起负调控作用.近研究表明VEGF家族成员PLGF可结合VEGFR-1,促进缺血组织的新生血管形成、侧枝循环生长,与肿瘤、动脉粥样硬化和关节炎等疾病相关.尽管人们对VEGF的研究重点一直集中在对缺血性心肌病和外周肢体缺血的治疗,然而,近越来越多的研究表明VEGF可通过炎症浸润和新生血管的形成等机制促进动脉粥样硬化损伤的进展,与斑块的不稳定性有密切关系.

缺血性心脏病的代谢治疗

冠心病的介入治疗和外科手术治疗在过去的25年里取得了突飞猛进的进步,但是仍有相当多发展到晚期缺血性心肌病的患者不适合血运重建治疗.这些患者常常为多支血管病变,远端血管弥漫性狭窄,由于冠脉血流及储备广泛减少导致左心室舒缩功能下降.另外,许多老年人因合并其它疾病也不能接受血运重建治疗.因此药物治疗成为这类冠心病终末期患者目前的唯一治疗措施.

B族Ⅰ型清道夫受体及与动脉粥样硬化关系研究进展

清道夫受体SR-B Ⅰ是第一个在分子水平上得到证实的HDL受体,近期的研究表明它在胆固醇逆向转运的两个方面都发挥着重要作用.除此以外,它还促进内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)的产生,对脉管系统有保护作用.本文主要对SR-B Ⅰ在胆固醇选择性摄取和动脉粥样硬化保护方面新进展进行阐述,对SR-B Ⅰ作为经典的清道夫受体其他方面作用的新进展也有涉及.

内皮源性一氧化氮合酶的活性调节

内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)代谢精氨酸产生的一氧化氮(NO)在调节血管的稳态中发挥着重要作用,内皮功能失调所致疾病多与NO的释放和活性受损有关.近年来关于eNOS活性调节的研究很多,机制主要包括乙酰化修饰所决定的亚细胞定位,蛋白-蛋白相互作用以及磷酸化修饰.许多体液因子和机械刺激可通过不同的方式调节eNOS活性.为了更好地认识eNOS的活性调节,本文就该领域新的研究进展进行归纳总结.

心脏特异转录因子及其对心脏发育和心脏基因的调控

器官的形成需要器官特异细胞的定向分化及形态发育,这些都在特异基因的调控下完成.特异基因的表达由转录因子调控.心脏特异转录因子主要在心肌细胞表达,调节心脏特异基因表达,决定组织特异性,在心脏发育过程中起到了关键的作用.这些基因的突变会导致先天性心脏缺陷.我们感兴趣的是,这些转录因子以及它们所调控的心脏基因,在心脏发育中扮演了什么样的角色,这些基因的突变会有什么样的后果.本文主要综述了目前已经发现的一些转录因子在脊椎动物,尤其是小鼠和人类心脏发育的作用以及它们调控心脏基因表达的方式.

冠心病患者外周血单核细胞镁浓度对心室重塑的影响

目的观察冠心病患者外周血单核细胞镁浓度、血清基质金属蛋白酶-9水平变化及其与心室重塑、心功能的关系.方法选择78例冠心病患者,根据左室射血分数(LVEF)分为3组,1组LVEF＞0.50、2组LVEF＞0.35、3组LVEF＜0.35.测定患者外周血单核细胞内镁(Mg)及血清白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平,超声测定左室收缩末期容量指数(LVESVI)、舒张末期容量指数(LVEDVI).结果随着LVEF降低,患者血单核细胞Mg降低、血清IL-6及MMP-9显著增高(P＜0.05);LVEDVI、LVESVI与Mg均呈负相关(相关系数分别是r=-0.49,r=-0.43;P＜0.01),LVEDVI与IL-6、MMP-9呈正相关(相关系数分别是r=0.41,r=0.47;P＜0.01);Mg与IL-6及MMP-9均呈负相关(相关系数分别是r=-0.47,r=-0.58;P＜0.01).结论冠心病患者的心肌重塑及收缩功能障碍,可能与细胞内缺镁有关.

对血浆Lp(a)致动脉硬化作用的再评价-9540正常人群及4055病例对照结果分析

目的观察中国正常人群血浆Lp(a)的分布情况及特点,分析血浆Lp(a)水平的变化与心脑血管疾病危险性的关系,进一步证实血浆Lp(a)致动脉硬化的作用.方法采用ELISA的方法检测了9540正常人群的血浆Lp(a),分析了年龄、性别与L(a)水平之间的关系.检测了530例心肌梗死患者(冠脉造影证实)及229例对照(冠脉造影阴性)和1386例脑梗死患者(头颅CT或核磁共振检查证实)及1910例对照的血浆Lp(a),分析了血浆Lp(a)变化与疾病危险性的关系.结果(1)正常人群血浆Lp(a)呈偏态分布(P＜0.01),中位数为19.6 mg/dl,全距为209.7 mg/dl.不同年龄、性别血浆Lp(a)水平分布情况,除大于50岁的女性以外,其余各组之间比较均无显著性差异.正常人的Lp(a)水平主要分布在11～20 mg/dl的范围;(2)疾病组血浆Lp(a)水平明显高于对照组(P＜0.001),Lp(a)＞30 mg/dl者,心肌梗死组占43.4%,脑梗死组占68.5%,与对照组比较有显著性差异(P＜0.001),且随着Lp(a)浓度升高,心脑血管疾病的危险性有上升的趋势;(3)Logistic回归分析结果显示:Lp(a)＞30%者发生心肌梗死的危险性增加(OR值为2.2,95%CI:1.498～3.167,P＜0.001)和脑梗死的危险性增加(OR值为2.1,95%CI:1.767～2.489,P＜0.001).结论Lp(a)与动脉硬化密切相关,随着浓度升高,心脑血管疾病的危险性增加,它是一个独立的危险因子.

高血压大鼠心脏钙调蛋白磷酸酶与核因子κBp65的表达

目的探讨钙调蛋白磷酸酶(calcineurin)、核因子κBp65(NFκBp65)在高血压心血管重构信号转导通路的作用.方法建立腹主动脉缩窄高血压大鼠模型,以尾动脉测压法观察大鼠血压变化,用免疫组织化学和形态计量学方法,观察calcineurin、NFκBp65在心脏原位蛋白表达和心脏重量及其系数的变化.结果与假手术组比较,高血压大鼠血压明显升高[(144.70±4.85)vs(110.00±4.00)mm Hg,P＜0.01;(151.40±14.86)vs(114.36±5.5)mmHg,P＜0.01]、心脏重量及其系数显著增加[(1.87±0.07)vs(1.51±0.13)g,P＜0.01,(0.43±0.02)vs(0.33±0.01)g/100 g,P＜0.01]、心脏重构,钙调蛋白磷酸酶与NFκBp65在心脏过表达,而且阳性表达面积和阳性表达面积百分比增大[(107380.36±9268.64)vs.(14537.64±12169.42)μm2,P＜0.01;(54797.00±17483.46)vs(3501.43±2919.18)μm2,P＜0.01].结论calcineurin与NFκBp65过表达参与了腹主动脉缩窄性高血压心血管重构的发生.

慢病毒载体表达人B型利钠肽的方法学探索

目的探索构建能表达人B型利钠肽(hBNP)的pLenti6/V5-D-TOPO-hBNP载体的方法,以实现人B型利钠肽基因在骨骼肌成肌细胞中长久、稳定的表达.方法将目的基因人B型利钠肽(hBNP)亚克隆到真核细胞表达载体pLenti6/V5-D-TOPO载体上,构建重组质粒pLenti6/V5-D-TOPO-hBNP.将pLenti6/V5-D-TOPO-hBNP及阳性对照质粒pLenti6/V5-D-TOPO-GFP分别用lipo-fectamin 2000介导转染293FT细胞,获得病毒颗粒;用病毒颗粒转染体外培养的SD乳鼠骨骼肌成肌细胞.荧光显微镜下计数确定阳性对照质粒的瞬时转染数,从而估计该基因的瞬时转染效率.加入筛选试剂以获得稳定表达异源B型利钠肽(BNP)的成肌细胞.收集瞬时转染及筛选后的细胞培养基,用酶连结免疫吸附分析(ELISA)检测试剂盒检测人B型利钠肽(hBNP)的表达水平.结果聚合酶链式反应法及DNA测序显示人B型利钠肽基因成功地插入到pLenti6/V5-D-TOPO载体中;阳性对照质粒转染细胞12 h后,在荧光显微镜下观察,其转染效率达60%以上.检测收集的上清,结果与阴性对照有显著差别(P＜0.01),观察至第4周,人B型利钠肽(hBNP)仍持续稳定表达.结论本实验成功构建了能在真核细胞内表达人B型钠尿肽的重组质粒pLenti6/V5-D-TOPO-hBNP,并且取得了较高的转染效率,因此慢病毒载体介导的基因治疗在心血管疾病中有乐观的应用前景.

使用无创正压呼吸机辅助治疗慢性阻塞性肺疾病合并的呼吸衰竭

目的探讨(鼻)面罩多功能双水平无创正压通气,辅助治疗慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭的作用.方法43例慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并呼衰患者,分为常规治疗组及应用双水平无创正压呼吸机辅助通气治疗组,记录通气各组治疗前后血气及心率(HR)变化.结果经双水平无创正压呼吸机辅助通气治疗组的临床症状改善和血气分析指标恢复正常,与常规治疗的对照组比较差异有非常显著意义(P＜0.01).同时治疗组间差异均有显著性(P＜0.05).结论应用多功能双水平无创呼吸机辅助通气治疗慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭效果肯定,可明显提高患者血气的PH值及PaO2,同时可降低PaCO2,使患者通气功能和缺氧体征得到明显的改善.

不同肺癌细胞RARγ受体转录水平对9-顺维甲酸诱导的反应

目的检测用9-cis-RA处理前后肺腺癌细胞株PG和A549维甲酸受体RARγ不同时相的表达变化.方法将两细胞株分别分为9-cis-RA组和对照组,应用细胞计数方法统计每组各时相细胞数,相对定量RT-PCR方法检测加药前后RARγ在不同时相的表达变化.结果加入9-cis-RA前,PG和A549细胞RARγ mRNA转录水平检测结果显示RARγ在PG细胞株中有一定水平的基础转录,而在A549细胞中无基础转录.应用1uM 9-cis-RA后,PG细胞的RARγ mRNA的转录水平受到抑制,而A549细胞的RARγ的转录水平在各时相有较弱的诱导表达.结论RARγ受体对9-cis-RA的诱导在不同细胞株中的反应不同,表明9-cis-RA对不同肿瘤细胞株的作用存在特异性.

IC53基因在血管及动脉粥样硬化斑块中的表达谱分析

目的IC53基因是我室1998年从成人主动脉文库克隆到的新基因,前期研究发现该基因与心衰发展相关.为进一步分析IC53基因与血管性疾病的关系,我们分析了IC53基因在人血管及动脉粥样硬化斑块中的表达.方法利用本实验室自备的IC53单克隆抗体,通过免疫组化分析IC53基因的表达情况.结果IC53基因主要在血管内皮表达,在平滑肌中未检测到信号,在外膜低表达.在动脉粥样硬化斑块中,IC53基因在巨噬细胞中表达.结论IC53基因可能通过内皮细胞及巨噬细胞在心血管疾病中发挥作用.

超极化活化环核苷酸门孔通道与心脏生物起搏器

Hyperpolarization-activated cyclic-nucleotide-gated (HCN) channels in the heart modulate cardiac automaticity via the hyperpolarization-activated cation current (named If, Ih, or Iq ). Recent studies have unveiled the molecular identity of HCN (HCN1-4) channels. HCN isoforms are unevenly expressed in the heart, even in the sinoatrial node. Features of HCN currents have been characterized in cardiac and other types of cells or in cell lines transfected with the HCN isoforms. The factors modulating Ih and the physiological significance of HCN channels in the heart have been extensively investigated in recent years. The hypothesis for transplanting and/or creating biological pacemakers to replace diseased sinoatrial and/or atrioventricular nodes has been postulated and tested in animal models. Local overexpression of HCN2 channels in the left atrium or in the left conductive bundle branch of the left ventricle via gene delivery induced significant Ih and escape rhythms during vagal stimulation in canines. In addition, implantation of human mesenchymal stem cells with overexpression of HCN2 channels to the canine left ventricular wall was associated with formation of spontaneous escape rhythms of left-sided origin during vagal-stimulation-induced sinus arrest. This preliminary data suggest that the use of HCN channels may hold great promise in the development of biological pacemakers.

连锁不平衡