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雷公藤红素对肾透明细胞癌786-0细胞的作用及其机制研究

张小路;杜梅红;张全;陈红跃;赵林;郭伟胜

摘要: 背景 肾透明细胞癌发病率高,治愈率低.雷公藤红素可调节肿瘤细胞中细胞因子,从而抑制肿瘤细胞增殖.而有关雷公藤红素对肾透明细胞癌786-0细胞的作用研究较少.目的 探讨雷公藤红素对肾透明细胞癌786-0细胞的作用及其机制,以期为探索治疗肾透明细胞癌的药物提供借鉴.方法 2015年2月-2016年5月,培养肾透明细胞癌786-0细胞和正常肾小管上皮细胞HK2细胞(简称肾细胞HK2细胞).检测不同浓度(0、0.5、1.0、1.5、2.0 μmol/L)雷公藤红素作用不同时间(12、24、48 h)肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞存活率;检测不同浓度(0、0.5、1.0、1.5、2.0 μmol/L)雷公藤红素、1.5 μmol/L 5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用下肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞毒性;检测不同浓度(0、1.5、2.0 μmol/L)雷公藤红素、1.5 μmol/L 5-Fu作用下肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞周期、凋亡率;检测不同浓度(0、0.5、1.0、1.5 μmol/L)雷公藤红素作用下肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞线粒体膜电位;检测不同浓度(0、0.5、1.0、1.5 μmol/L)雷公藤红素作用下肾透明细胞癌786-0细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3、caspase-9活性,Bax、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞色素c、磷酸多核糖基核糖醇(PRRP)水平.结果 0、0.5、1.0、1.5、2.0 μmol/L雷公藤红素作用12、24、48 h时肾透明细胞癌786-0细胞存活率随浓度增加依次减小(P<0.05).1.0 μmol/L雷公藤红素作用24、48 h时肾透明细胞癌786-0细胞存活率小于12 h时(P<0.05);1.5、2.0 μmol/L雷公藤红素作用12、24、48 h时肾透明细胞癌786-0细胞存活率随时间增加依次减小(P<0.05).0.5 μmol/L雷公藤红素、1.0 μmol/L雷公藤红素、1.5 μmol/L雷公藤红素、2.0 μmol/L雷公藤红素、1.5 μmol/L 5-Fu作用下肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞毒性大于0 μmol/L雷公藤红素(P<0.05);2.0 μmol/L雷公藤红素作用下肾透明细胞癌786-0细胞毒性大于0.5、1.0、1.5 μmol/L雷公藤红素,肾细胞HK2细胞毒性大于1.0 μmol/L雷公藤红素(P<0.05);1.5 μmol/L 5-Fu作用下肾透明细胞癌786-0、肾细胞HK2细胞毒性大于0.5、1.0、1.5、2.0 μmol/L雷公藤红素(P<0.05).0、1.5 μmol/L雷公藤红素作用下G2/M期肾透明细胞癌786-0细胞、肾细胞HK2细胞少于S、G0/G1期(P<0.05);2.0 μmol/L雷公藤红素、1.5 μmol/L 5-Fu作用下G0/G1期肾透明细胞癌786-0细胞、肾细胞HK2细胞多于S期,G2/M期肾透明细胞癌786-0细胞、肾细胞HK2细胞少于S、G0/G1期(P<0.05).1.5 μmol/L雷公藤红素、2.0 μmol/L雷公藤红素、1.5 μmol/L 5-Fu作用下肾透明细胞癌786-0细胞凋亡率大于0 μmol/L雷公藤红素(P<0.05);2.0 μmol/L雷公藤红素、1.5 μmol/L 5-Fu作用下肾透明细胞癌786-0细胞凋亡率大于1.5 μmol/L雷公藤红素(P<0.05);1.5 μmol/L 5-Fu作用下肾细胞HK2细胞凋亡率大于0 μmol/L雷公藤红素、2.0 μmol/L雷公藤红素(P<0.05).0、0.5、1.0、1.5 μmol/L雷公藤红素作用下肾透明细胞癌786-0细胞线粒体膜电位依次增大(P<0.05).0、0.5、1.0、1.5 μmol/L雷公藤红素作用下肾透明细胞癌786-0细胞中caspase-3、caspase-9活性依次增大(P<0.05).0、0.5、1.0、1.5 μmol/L雷公藤红素作用下肾透明细胞癌786-0细胞中Bax、细胞色素c、PRRP水平依次升高,Bcl-2水平依次降低(P<0.05).结论 雷公藤红素可能通过激活caspase-3、caspase-9活性,上调Bax、细胞色素c、PRRP水平,下调Bcl-2水平来抑制肾透明细胞癌786-0细胞的增殖并诱导其凋亡.

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