建立金黄色葡萄球菌肠毒素B悬浮芯片定量检测方法
摘要： 目的 建立金黄色葡萄球菌肠毒素B悬浮芯片定量检测方法.方法 利用双抗体夹心法免疫学原理,以金黄色葡萄球菌肠毒素B的特异性抗体包覆微球为载体,利用悬浮芯片(Bio-Plex)系统建立检测模型;检测不同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B,测定方法的灵敏性;通过该方法对大肠杆菌、普通变型杆菌、蓖麻毒素和禽流感病毒HA、NH蛋白和金黄色葡萄球菌热休克毒素的检测,判断方法的特异性;将不同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B添加到奶粉中验证方法的实用性和稳定性.结果 悬浮芯片方法对金黄色葡萄球菌肠毒素B的检测线性范围为0.2～1 653.4 ng/ml,低检测值为203 pg/ml,均优于酶联免疫吸附实验;除与2.3μg/ml金黄色葡萄球菌热休克毒素有交叉反应外,和其他几种细菌、毒素、蛋白均无交叉反应;对添加相同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B奶粉的检测的相对标准偏差在1.30%～16.93%.结论 悬浮芯片定量检测方法对于模拟添加的金黄色葡萄球菌肠毒素B具有良好的检测效果.
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冷饮菌落总数超标原因的研究分析
目的 探讨冷冻饮品菌落总数超标的原因.方法 模拟贮运过程中温度的波动以及生产车间的温度条件,以市售冷饮(香草雪糕、绿豆雪糕、菠萝棒冰)和自制冷饮(香草雪糕、绿豆雪糕)为样品,研究不同条件下冷饮菌落总数变化情况,并运用Gompertz方程对微生物生长情况进行描述.结果 在初始菌落数较低的情况下,在短期内温度在-18～4℃范围内反复波动不会引起冷饮微生物明显增长.运用Gompertz方程可以较好地描述30℃时微生物生长的动态变化情况,当雪糕浆料在30℃暴露超过7 h时,其菌落总数已超标或增长至一个较高的水平.结论 贮运过程中温度波动不是引起冷饮微生物超标的主要原因,主要原因在于生产加工环节卫生控制不当.
关键词： 冷冻饮品 菌落总数 温度 Gompertz数学模型 -
丙基硫脲嘧啶对去卵巢大鼠甲状腺干扰作用的时效关系研究
目的 研究丙基硫脲嘧啶(PTU)对甲状腺干扰作用的敏感指标及其时间效应模式.方法 去卵巢大鼠随机分为3个给药组,分别给予5 mg/kg BW的PTU连续灌胃4、8和12d,同时设手术对照组和假手术对照组,灌胃给予玉米油.测定指标包括血清T3、T4和TSH,肝脏Ⅰ型5’-脱碘酶和苹果酸酶活性,甲状腺组织病理学改变以及表皮胶质比.结果 与手术对照组相比,给药各组血清T3均降低(P＜0.05),TSH均升高(P＜0.05).与手术对照组相比,4d组血清T4差异无统计学意义(P＞0.05),而8和12d组T4降低(P＜0.05).血清T3和T4随给药时间增加而下降,血清TSH则随时间增加而升高.同手术对照组相比,给药各组Ⅰ型5’-脱碘酶活性均降低(P＜0.05),苹果酸酶活性差异无统计学意义(P＞0.05).给药各组甲状腺滤泡间可见毛细血管充血,滤泡上皮不同程度增生,胶质减少,表皮胶质比均升高(P＜0.05).结论 血清甲状腺激素T3、T4和TSH,Ⅰ型5’-脱碘酶活性,甲状腺表皮胶质比及病理学改变可作为评价甲状腺干扰作用的敏感指标;PTU干扰去卵巢大鼠的甲状腺功能存在明显的时效关系,给药8d是敏感观察期.
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葡萄籽提取物原花青素调节血脂作用及机理研究
为研究葡萄籽提取物原花青素调节血脂的效果,选用雄性健康成年SD大鼠,观察原花青素对高脂血症大鼠血清脂质的影响.实验根据大鼠体重、血脂水平进行随机分组,设正常对照组、高脂饲料对照组、原花青素低、中、高剂量组(分别为25、100、150 mg/kg BW).受试物每天经口灌胃给予.6周末测定血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LACT)活性,同时测定肝脏TC、TG,粪总胆汁酸(TAB)的排出量.结果显示:原花青素各组与高脂饲料对照组比较,大鼠血清TC、TG水平降低,差异有显著性(P<0.05),原花青素使高脂大鼠血清TC水平降低了18.1%(高剂量);使血清TG水平降低了34.4%以上.原花青素对高脂大鼠肝脏胆固醇、甘油三酯有显著的降低作用(P<0.01).原花青素对高脂大鼠血清LCAT活性有升高的作用(P<0.05).实验各组粪胆汁酸每日排出量高于高脂饲料对照组,差异有显著性(P<0.05).提示原花青素有降低高脂大鼠血脂水平的作用.
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广东省部分城市餐饮业推行食品卫生量化分级制度影响因素分析
通过对广东省部分城市在餐饮业推行食品卫生监督量化分级管理制度的综合成效影响因素研究,探讨有针对性的推行策略,并对推行过程影响因素模型进行检验.利用推行过程成效影响因素模型对广东省部分城市在推行过程中的实际情况进行回顾性调查,通过皮尔逊卡方值χ2检验等统计分析,筛选出主要影响因素.所调查的城市中均有监督员掌握标准程度、监管机制、预期目标实现、宣传培训、监督频率落实和推行方案的可操作性等20余项指标存在不足,影响了推行的总体成效;城市之间影响因素实施情况与成效评价结果及现实情况相一致.本次研究建立的推行过程影响因素指标体系能较准确地反映真实情况,在推行量化分级管理策略方面具有一定的参考价值,同时也提出了进一步推行的策略.
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包装食品中胆固醇的实验室分析及其误差的研究
目的 研究我国实验室对包装食品中胆固醇检测的实验误差.方法 根据2000年全国包装食品消费的调查.选择2类(肉类、奶制品类)4种包装食品.在全国的7家实验室进行3次胆固醇的平行样检测,胆固醇检测方法为国家标准方法.结果 所有胆固醇检测结果筛查均合格.胆固醇检测精密度为:实验室内相对标准差5.93%-9.10%.实验室间16.79%～34.72%,室内和室间总和为17.91%～35.27%,平均25.78%.胆固醇检测的相对扩展不确定度为35.64%～63.62%,平均47.73%.结论 我国实验室对胆固醇的检测误差在35%以内,95%不确定度在65%以内.
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椰毒假单胞菌酵米面亚种荧光标记扩增片段长度多态性分型方法的建立
目的 建立椰毒假单胞菌酵米面亚种荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)分型方法,并对4株模式菌株和19株分离菌株进行分型.方法 选用4种低频限制性内切酶(ApaⅠ、EcoR Ⅰ、HindⅢ和PstⅠ)和2种高频限制性内切酶(Mse Ⅰ和Taq Ⅰ)进行组合,对FAFLP预扩增和选择性扩增体系进行优化,用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析,并与VITEK 2 GN生化结果和16S rDNA序列分析进行比较.结果 Apa Ⅰ-G/Taq Ⅰ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为7个群,菌株间低相似度为80.85％,高相似度为98.77％.PstⅠ-T/Taq Ⅰ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为10个群,菌株间低相似度为48.68％,高相似度为99.67％.两种FAFLP组合均能将菌株进行完全区分,而VITEK 2 GN和16S rDNA序列分析无法将菌株进行完全区分.结论 ApaⅠ-G/Taq Ⅰ-G组合与PstⅠ-T/Taq Ⅰ-G组合FAFLP对椰毒假单胞菌酵米面亚种具有足够的分辨率,本研究建立的FAFLP分型方法可应用于椰毒假单胞菌酵米面亚种的分子分型和溯源.
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染料木黄酮对β淀粉样肽介导的脑血管内皮细胞损伤的保护作用研究
目的 研究染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的脑血管内皮细胞损伤的调节作用.方法 脑血管内皮细胞(bEnd.3细胞系)传代48 h后,分为4组(对照组、Aβ组、Gen组、Gen+ Aβ组).Gen预处理2h后,Aβ25-35染毒建立细胞损伤模型;24 h后收集细胞进行指标检测.采用ELISA法检测脑血管内皮细胞8-OHdG水平;酶法试剂盒检测GSH-Px水平;RT-PCR和Western blot法检测Bcl-2、Bax基因和蛋白表达的改变.结果 与对照组比较,Aβ组8-OHdG水平明显升高,GSH-Px活性明显下降,且差异均有统计学意义(P＜0.05);与Aβ组比较,Gen组和Gen+ Aβ组8-OHdG水平明显下降,GSH-Px活性明显升高,且差异均有统计学意义(P＜0.05);同时,Aβ组Bcl-2基因和蛋白表达水平较对照组明显下调,Bax基因和蛋白表达水平明显上调,且差异均有统计学意义(P＜0.05);与Aβ组比较,Gen+ Aβ组和Gen组Bcl-2基因和蛋白表达水平明显上调,Bax基因和蛋白表达水平明显下调,且差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Gen可能通过拮抗Aβ25-35介导的脑血管内皮细胞氧化损伤,进而发挥对脑血管的保护作用.
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江苏省农村家庭对自办家宴食品卫生需求分析
目的 了解江苏省农村自办家宴的规模、对食品卫生的认知和需求.方法 对自办家宴情况抽样调查,并统计分析.结果 农村家庭普遍操办过家宴,苏南与苏中、苏北因经济发展差异对家宴形式需求有所不同.96.2%的家庭认为,需要对民间厨师进行管理、对自办家宴食品卫生给予指导和帮助.结论 建议出台相应管理措施,规范化管理民间厨师及农村家宴卫生,提高农村食品卫生水平.
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生命早期高脂饲料对子代小鼠生长发育和血清胆固醇水平的影响及植物甾醇的干预作用
目的 观察孕期和哺乳期母体高脂饲料对子代生长发育和血清胆固醇水平的影响及植物甾醇的干预作用.方法 将确定受孕的30只C57BL6J小鼠按体重随机分为3组,分别给予基础饲料、高脂饲料、高脂饲料+植物甾醇干预.所产子代断乳后,每组按体重随机选取10只雄性子鼠,继续以基础饲料喂养至3月龄,摘眼球取血,取脏器称重.采用试剂盒(酶法)测定血脂水平.以RT-PCR法测定肝脏中胆固醇合成关键蛋白 HMGCoA 还原酶mRNA的表达水平.结果 与基础饲料组相比,高脂饲料组子代小鼠睾丸重量显著降低(P<0.05),血清TC和LDL-C水平显著升高(P<0.05),HMGCoAR基因表达显著升高(P<0.05);与高脂饲料组相比,母体植物甾醇干预对子代生长发育、血清胆固醇水平和HMGCoAR基因表达无显著影响.结论 研究结果初步表明生命早期高脂饲料可影响子代雄性小鼠的睾丸发育,改变子代胆固醇的代谢,增加子代患心血管疾病的危险性.
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2003年～2004年中国食品添加剂监测结果与分析
为了掌握我国食品添加剂使用的实际情况,对食品添加剂进行危险性评估, 2003年～2004年在全国13个省市采集食品样品进行了山梨酸、苯甲酸、糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、柠檬黄、胭脂红、苋菜红、日落黄、亮蓝10种添加剂在碳酸饮料、果汁饮料、酱油、醋、酱菜、陈皮/话梅、果冻、果脯、熟肉类中使用情况的监测,获得数据12436个.统计结果显示:我国食品添加剂超过国家标准限量值和超过适用范围使用的现象比较严重,甜味剂中的甜蜜素和糖精钠过量添加,特别是陈皮/话梅类,甜蜜素含量的全国平均值为11.56 g/kg,超标率43.84%,大值49 g/kg,超过国家标准6倍;安赛蜜含量较低,超标率也较低;防腐剂中的苯甲酸过量添加严重,在酱菜类食品中,全国平均值为0.911 g/kg,超标率44.59%,大值13.30 g/kg;合成色素在食品中的使用情况较好,但在碳酸饮料、果汁饮料、果冻等食品中存在违规添加色素问题.我国食品添加剂的使用存在问题较多,需加强监管.
