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循证神经病学方法学概述

屈会起;邱明才

摘要: 我们生活在信息时代,医学知识呈指数增加,每10年增加一倍.然而面对知识爆炸的冲击,临床医生却无法从容应付,主要的问题在于:(1)医生日常工作中信息量不足,许多关于疾病诊断、治疗、预防和预后的临床资料显著缺乏;(2)传统信息源的弊病暴露得日益明显,如教科书常较医学科学的发展落后数年,专家意见难免有错误,说教式的继续医学教育缺乏效率,医学研究文献资料数量庞大、可靠性不一,等等;(3)医生的临床工作能力在临床实践过程中不断增强,但是医生的知识更新速度却日趋缓慢;(4)医生临床工作繁忙,无暇顾及新的医学研究进展.

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    目的 采用反映血管新生状态的指标经模糊C均值聚类对星形细胞肿瘤病理学分级进行探讨.方法 采用含有正常成人脑组织、弥漫性星形细胞瘤(WHO Ⅱ级)、间变性星形细胞瘤(WHO Ⅲ级)、胶质母细胞瘤(WHO Ⅳ级)及阳性对照组织的168点矩阵的组织芯片,通过免疫组织化学SABC双标法标记内皮细胞和血管内皮生长因子,以Image-Pro Plus 5.1中文版图像分析软件对染色结果及血管内皮生长因子阳性单位、微血管密度及微血管平均周长等指标进行测定.采用单因素分析方法筛选与星形细胞肿瘤病理级别相关的参数,以矩阵实验室数学软件提供的模糊C均值聚类函数参数作为聚类对象,将不同的组织切片参数值进行模糊C均值聚类,所得聚类值分别赋值为星形细胞肿瘤病理分级值.结果 (1)在不同病理分级组之间,星形细胞肿瘤血管内皮生长因子阳性单位差异具有统计学意义(P=0.000),各病理分级组间两两比较差异亦有统计学意义(均P<0.05).(2)在不同病理分级组之间,星形细胞肿瘤微血管密度值差异有统计学意义(P=0.000),两两比较差异亦有统计学意义(均P=0.000).(3)星形细胞肿瘤微血管平均周长,Ⅱ级组与Ⅲ级组、Ⅱ级组与Ⅳ级组比较差异有统计学意义(均P=0.000),而Ⅲ级组与Ⅳ级组之间差异无统计学意义(P=1.000).(4)与WHO病理分级相比,模糊C均值聚类产生的星形细胞肿瘤病理分级值对Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级等级别的诊断符合率分别为85.71%、48.39%和78.95%,总体正确率达68.46%.结论 星形细胞肿瘤血管内皮生长因子阳性单位、微血管密度和微血管平均周长等项指标的模糊C均值聚类值与星形细胞肿瘤病理分级值比较符合,可应用模糊C均值聚类法对星形细胞肿瘤的病理分级进行辅助推测.

  • 牛磺酸对液压冲击伤后神经细胞内钙超载的保护作用

    作者:武俏丽;黄慧玲;李庆国;王辰;张文治;苏心

    1),以伤后1h牛磺酸治疗48h组效果佳,细胞内游离钙表达水平接近正常值水平(P>0.05).结论 牛磺酸对液压冲击伤模型神经细胞内钙超载具有较好的保护作用,尤以伤后1h予以牛磺酸并维持治疗48h对神经细胞保护作用佳.

  • 颈内动脉颅内段创伤性假性动脉瘤的诊断与治疗

    作者:姜金利;李宝民;许百男;周定标;段国升

    目的探讨颈内动脉颅内段创伤性假性动脉瘤的诊断与治疗.方法17例鼻腔大出血患者,男11例,女6例;平均年龄39岁.其中10例为颅脑创伤后6d~3个月突发鼻腔大出血;余7例均为经鼻-蝶窦入路手术后鼻腔大出血,6例发生于经鼻-蝶窦入路垂体瘤切除手术后1周左右,1例出现于脑脊液鼻漏修补手术后3d.17例均经股动脉穿刺置管行双侧选择性颈内和颈外动脉血管造影诊断为颈内动脉颅内段创伤性假性动脉瘤.其中14例经8F导引管置入Magic-BD导管,采用可脱式球囊闭塞颈内动脉破口及颈内动脉,或经5F造影导管送入金属弹簧圈闭塞同侧颈内动脉.1例脑脊液鼻漏患者,应用可脱性弹簧圈直接栓塞动脉瘤.余2例全脑血管造影检查显示健侧颈内动脉完全闭塞,大脑前动脉、大脑中动脉供血区由患侧颈内动脉供血代偿,而椎-基底动脉系供血不能代偿.全身麻醉经翼点入路于显微镜下行颈内动脉假性动脉瘤切除及颈内动脉破口修补手术.结果15例行血管内栓塞治疗者,均一次性闭塞颈内动脉破口及颈内动脉,全脑血管造影显示动脉瘤消失,双侧大脑半球供血代偿良好.2例经显微外科手术切除动脉瘤并修补颈内动脉者,手术后1周全脑血管造影可见颈内动脉假性动脉瘤消失,患侧颈内动脉通畅良好.6个月随访期间,均未再发生鼻腔大出血,无一例出现永久性并发症.结论全脑血管造影检查是诊断颈内动脉颅内段创伤性假性动脉瘤出血的首选方法.血管内治疗技术可直接栓塞动脉瘤或闭塞载瘤动脉,达到止血目的,是一种较为理想的治疗方法.对于对侧颈内动脉已经完全闭塞,椎-基底动脉代偿不完全者,应选择显微外科手术修补颈内动脉.

  • 喉罩对脑室镜手术患者呼吸道保护作用的观察

    作者:刘海根

    目的比较喉罩与气管内插管用于脑室镜手术患者呼吸道保护的安全性.方法选择2003年7-12月行脑室镜手术的患者40例(美国麻醉医师协会Ⅰ~Ⅱ级),随机分为喉罩组和气管内插管组,每组20例患者.手术前所有患者均肌内注射阿托品0.5mg,咪哒唑仑3mg.麻醉诱导静脉注射咪哒唑仑2mg,芬太尼0.2mg、丙泊酚2mg/kg,气管内插管组复合静脉注射罗库溴铵0.8mg/kg后建立人工呼吸道.麻醉维持静脉注射雷米芬太尼0.2μg/(kg·min),丙泊酚0.7mg/(kg·min),气管内插管组复合静脉注射罗库溴铵30μg/(kg·min).术中监测血压、心率、脉搏、氧饱和度和呼气末二氧化碳分压,记录呛咳、体动、呕吐和误吸等不良反应,以及人工呼吸道建立、手术和复苏时间.术后每日行纤维喉镜检查,记录上呼吸道麻醉并发症.结果气管内插管组于人工呼吸道建立即刻、1min和3min时平均动脉压及心率均明显高于喉罩组(P<0.05或P<0.01).手术中气管内插管组11例发生呛咳(6例)或吞咽(5例),而喉罩组无不良反应发生,组间差异具有显著性意义(P<0.05).两组人工呼吸道建立和麻醉复苏时间分别为:喉罩组(2.3±0.6)min、(7.3±1.6)min,气管内插管组(3.7±1.3)min、(10.9±3.1)min,前者显著低于后者(P<0.01).手术后,气管内插管组有7例声带轻度水肿,而喉罩组则无一例出现相关并发症,两组相比差异具有显著性意义(P<0.01).结论喉罩用于脑室镜手术麻醉诱导快、复苏快,上呼吸道黏膜损伤小,麻醉并发症少,其呼吸道保护作用优于气管内插管.

  • 脑源性多器官功能障碍综合征模型延髓内脏带c-fos蛋白表达变化研究

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    目的研究脑出血致多器官功能障碍综合征模型延髓内脏带孤束核、迷走神经背核c-fos蛋白表达的变化规律,探讨延髓内脏带在脑源性多器官功能障碍综合征的应激调节作用.方法(1)于大鼠尾状核内注射Ⅶ型胶原酶(0.8U)建立脑出血模型.54只Wistar大鼠被随机分为正常对照组,假手术组及脑出血组(根据出血时间的不同又分为4、8、12、24、36、48h和72h等7个亚组).(2)应用免疫组织化学ABC法观察脑出血后延髓内脏带内孤束核、迷走神经背核各时限c-fos蛋白的表达变化规律.结果正常对照组和假手术组大鼠延髓内脏带内孤束核、迷走神经背核的c-fos蛋白阳性表达极少;脑出血组大鼠孤束核、迷走神经背核c-fos蛋白阳性神经元呈密集表达,于脑出血后24~36h达高峰,其中孤束核在24h的表达密度为(49.58±12.61)μm2,36h为(64.32±15.14)μm2,与正常对照组及假手术组相比差异有显著性意义(均P<0.01);迷走神经背核在此两个时限的表达密度分别为(40.74±10.62)μm2,(50.62±12.31)μm2,差异亦有显著性意义(均P<0.01);至72h仍有阳性表达(P<0.05).结论孤束核、迷走神经背核c-fos蛋白的阳性表达提示,延髓内脏带是脑源性多器官功能障碍综合征的应激调节中枢之一.

  • 常压缺氧性脑损伤小鼠血清蛋白质表达谱的变化及意义

    作者:唐小薇;张永亮;李灵芝;曾文慧

    目的 观察常压缺氧小鼠脑组织损伤之特点及其血清差异蛋白质表达,探寻常压缺氧性脑损伤的生物标志蛋白.方法 60只雌性昆明小鼠,随机分为正常对照组和常压缺氧组,建立常压缺氧小鼠模型并按缺氧持续时间分为缺氧1周、2周和3周组,分别检测血清和脑组织中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量;应用弱阳离子交换芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术分析常压缺氧后不同时间血清蛋白质表达谱的变化.结果 常压缺氧后小鼠血清超氧化物歧化酶活性逐渐降低,其中缺氧3周组与正常对照组之间差异有统计学意义(P<0.01);常压缺氧2周组小鼠血清丙二醛含量明显升高,与正常对照组和缺氧1周组比较差异有统计学意义(均P<0.01).常压缺氧后各亚组小鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性与正常对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05);常压缺氧后脑组织中丙二醛含量呈升高趋势,缺氧2周组和3周组与正常对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01).弱阳离子交换芯片结合质谱分析共获得342个血清蛋白质峰,其中相对分子质量为3 500、3 578、3 706、3 516和4 130等5个蛋白质峰的相对强度在缺氧性脑损伤后升高,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);另有73个蛋白质峰分布于各缺氧组但在正常对照组中未检测到.这78个蛋白质峰中30个蛋白质峰于缺氧后≤2周表达,48个蛋白质峰于缺氧2周后表达.结论 常压缺氧可引起小鼠脑组织损伤,使血清及脑组织中与氧自由基相关的酶活性发生改变,血清超氧化物歧化酶活性降低,血清及脑组织中丙二醛含量升高;并可改变血清蛋白质的表达谱.提示血清中出现的部分蛋白质可能为常压缺氧性脑损伤诱导的血细胞基因表达产物,在血清中所检测到的差异蛋白质以及缺氧后新出现的蛋白质可能是脑损伤的生物标志蛋白.

  • 平山病的神经电生理学研究

    作者:徐迎胜;郑菊阳;张朔;张俊;康德宣;樊东升

    目的 探讨平山病的神经电生理学特点及其与肌萎缩侧索硬化、多灶性运动神经病的鉴别诊断.方法 分别对平山病(26例)、肌萎缩侧索硬化(30例)和多灶性运动神经病(16例)患者进行运动和感觉传导速度、肌电图及交感皮肤反应等神经电生理学检查.运动传导速度采用由远端至近端分段刺激,记录复合肌肉动作电位的波幅、时限、面积及波形的变化,并判断是否存在神经传导阻滞;肌电图检查记录脑区肌肉(双侧胸锁乳突肌),颈区肌肉(拇短展肌、小指展肌、第一骨问肌、肱二头肌),胸区肌肉(T10椎旁肌、腹直肌)和腰骶区肌肉(胫骨前肌)的肌电活动.比较3组患者神经电生理学特点的差异性.结果 平山病组患者均无神经传导阻滞,肌电图检查显示颈区肌肉呈神经源性损害;肌萎缩侧索硬化组患者亦无神经传导阻滞,肌电图检查显示脑区、颈区、胸区和腰骶区肌肉均呈神经源性损害;多灶性运动神经病组患者均存在神经传导阻滞,肌电图检查颈区和腰骶区肌肉呈神经源性损害.平山病组患者神经传导阻滞的发生率与多灶性运动神经病组比较,差异有统计学意义(x2=42.000,P=0.000);平山病组患者神经源性损害的发生率与肌萎缩侧索硬化组比较,差异亦有统计学意义(x2=56.000,P=0.000).结论 平山病组患者运动和感觉传导速度均无异常,无神经传导阻滞,但肌电图检查显示颈区肌肉呈神经源性损害.

  • 免疫荧光细胞化学染色联合激光扫描共聚焦显微技术对脑膜癌病的诊断价值

    作者:窦春阳;范学文;吴若芬;朱海清;陈桂生;孔繁元

    目的 探讨免疫荧光细胞化学染色与激光扫描共聚焦显微技术联合检测在脑膜癌病诊断中的价值.方法 采用免疫荧光细胞化学染色法,以小鼠抗人单克隆上皮膜抗原(EMA)标记脑膜癌细胞及对照组脑脊液细胞,激光扫描共聚焦显微技术获得脑膜癌细胞扫描图像并定量检测上皮膜抗原相对荧光强度.结果 上皮膜抗原主要表达于脑膜癌细胞的细胞质和细胞膜,着红色荧光,相对荧光强度为(44.84±13.05),与对照组(3.98±1.58)相比差异有统计学意义(t=43.954,P=0.001).免疫荧光细胞化学染色联合激光扫描共聚焦显微技术对上皮膜抗原的检测阳性率为90%(18/20),高于常规MGG染色法[60%(12/20)],组间差异具有统计学意义(x2=4.800,P=0.010).结论 免疫荧光细胞化学染色与激光扫描共聚焦显微技术联合检测脑脊液细胞上皮膜抗原表达变化,可为脑膜癌病的诊断、组织来源提供实验室依据.

  • rhEGF和rhbFGF诱导胎鼠脑组织神经干细胞向神经元样细胞分化的研究

    作者:阎晓玲;苏心;张文治;王新平;秦进喜

    目的 观察在重组人表皮生长因子和重组人碱性纤维母细胞生长因子诱导下胎鼠脑组织神经干细胞向神经元样细胞分化的超微结构及细胞标志物表型特征.方法 采用孕16 d大鼠胚胎脑组织进行神经下细胞体外分离、培养传代及鉴定,分别于倒置相差显微镜及电子显微镜下观察经体外诱导培养后神经干细胞的组织形态及超微结构变化;免疫细胞化学染色检测神经微丝、微管相关蛋白-2、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、γ-氨基丁酸以及多巴胺等蛋白质标志物的表达.结果 倒置相差显微镜观察显示,经体外培养的神经下细胞随着培养时间的延长逐渐形成神经干细胞球体,经体外诱导培养至第7天时即开始出现明显分化趋向,第14天时部分细胞分化发育完全;且蛋白质标志物神经微丝、微管相关蛋白-2、去甲肾上腺索、乙酰胆碱、γ-氨基丁酸及多巴胺均表达阳性.电子显微镜观察经体外诱导培养至第14天时,细胞出现明显的成熟分化趋向,细胞质中含有大量神经微丝和神经内分泌颗粒,呈典型的神经元分化特征.结论 神经千细胞在体外诱导培养条件下短期即可向神经元方向成熟分化.

  • 前屈-后伸位MRI对判断颅脊交界区畸形内固定指征的临床价值

    作者:陈赞;孙永华;吴浩;王兴文;菅凤增

    目的:分析前屈-后伸位MRI对诊断Arnold-Chiari畸形可能合并寰枢椎脱位的作用,以及指导治疗的临床意义.方法:回顾分析40例Arnold-Chiari畸形患者的前屈-后伸位MRI影像学资料,测量寰齿间距,通过前屈位和后伸位颈椎椎管狭窄程度分级,判断颅脊交界区稳定性.单纯Arnold-Chiari畸形患者采用枕大孔减压和枕大池扩大成形术,存在寰枢椎脱位者兼行枕颈内固定融合术.结果:经前屈-后伸位MRI检查,证实有12例患者存在颅颈失稳,于枕大孔减压的同时行枕颈内固定融合术.手术后第3天颈椎影像学检查,40例中10例脊髓空洞病灶明显缩小;12例兼行枕颈内固定融合术者颅颈复位满意,脊髓压迫解除;手术后3个月随访,脊髓空洞病灶明显缩小(17例),颅脊交界区骨痂形成、骨融合效果良好、颅颈复位无丢失(12例),日本矫形外科评分13.08±1.40,与手术前评分(11.08±1.61)比较,差异有统计学意义(t=5.928,P=0.000).结论:前屈-后伸位MRI对判断颅脊交界区稳定性、选择适宜的手术方式具有重要意义.

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