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骨髓间充质干细胞治疗增加心脏梗死区肌纤维母细胞聚集的观察

杜优优;姚瑞;蒲实;赵晓燕;刘光辉;赵洛沙;陈庆华;李凌

摘要: 目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对梗死心肌中肌纤维母细胞聚集的调节作用.方法 采用结扎大鼠冠状动脉前降支的方法复制心肌梗死(MI)模型,实验动物应用随机数字表进行完全随机化分组,分为假手术组(仅穿线不结扎冠状动脉,n=8)、心肌梗死+磷酸盐缓冲液(MI+PBS)组(结扎冠状动脉+心肌注射PBS溶液,n=8)和MI+ MSC组(结扎冠状动脉+心肌注射MSC,n=8).通过心脏超声检查、血液动力学检查和Masson三色染色等方法分别检测左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)、左心室收缩末压力(LVSP)、左心室舒张末压力(LVEDP)、左心室压大升降速率(±dp/dtmax)、MI面积、梗死区室壁厚度和心脏质量/体质量等指标,评价MSC对大鼠心脏功能及心室重构的影响.分别采用荧光免疫组化染色、实时定量逆转录PCR、Western blot等方法检测肌纤维母细胞向梗死区聚集、移植MSC存活和分化、转化生长因子β1(TGF-β1)-Smad2信号通路激活等情况.结果 (1)心室重构和心脏功能指标检测结果:术后28 d,与MI+ PBS组比较,MI+ MSC组的心脏质量/体质量[(3.04 ±0.16)mg/g比(3.34 ±0.14) mg/g,P<0.01]及心脏梗死面积[(38.72±2.38)%比(46.36±2.81)%,P<0.01]较低;梗死区室壁厚度较大[(0.93 ±0.17)mm比(0.65±0.16) mm,P=0.01];LVEF[(32.5±5.9)%比(26.5±4.5)%,P=0.03]及FS[(30.4±3.3)%比(24.8±4.2)%,P<0.01]较高;改善血液动力学参数,LVSP较高(P=0.01),LVEDP较低(P<0.01).(2)与MI+ PBS组比较,MI+ MSC组大鼠心脏梗死区肌纤维母细胞聚集数量较高[(196±20)/mm2比(89 ±25)/mm2,P<0.01],其中部分绿色荧光蛋白(GFP)+移植细胞同时表达α-SMA+.(3)与注射PBS比较,移植MSC可以明显增加梗死区TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平(P均<0.01),促进Smad2的磷酸化(P<0.01).结论 MSC可能通过直接分化和激活TGF-β1-Smad2信号通路促进成纤维母细胞向肌纤维母细胞转型增加大鼠心脏梗死区肌纤维母细胞的聚集,从而抑制心室重构,改善心脏功能.

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