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右归丸含药血清对骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化的影响

杨锋;李小群;杨利学;李彦民

摘要: 目的:通过观察右归丸含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨与成脂分化的影响,为阐明中医肾主骨理论的科学内涵奠定基础.方法:体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,传二代后分为对照组、成骨诱导组、右归丸1组;对照组、成脂诱导组和右归丸2组.显微镜下观察细胞形态变化,碱性磷酸酶(ALP)染色及油红0染色,RT-PCR法测定成骨各组及对照组Runx2、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达,成脂各组及对照组过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)、C/EBP α及脂肪酸结合蛋白(aP2)的表达.Western blot法测定成骨与成脂相关蛋白的表达.结果:成骨诱导组和右归丸1组在加入诱导培养液3-4d后ALP活性明显增强.14d后,与对照组比较,Runx2、BMP-2、Col Ⅰ mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.05),成脂诱导组和右归丸2组PPAR γ、C/EBP α及aP2 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.05),且右归丸组比单纯诱导组更明显.结论:右归丸含药血清可以诱导成骨并显著增强成骨诱导剂诱导BMSCs向成骨细胞分化,并促进成骨细胞成熟作用,同时可以抑制成脂分化.

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