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硫丹对小鼠子宫内膜细胞的增殖作用
目的研究硫丹对小鼠子宫内膜细胞的增殖作用.方法将成年雌性小鼠去势后,给予不同剂量的硫丹0.5、1.5、3.0 mg/(Kg@d)连续5 d,观察子宫内膜细胞有丝分裂指数和嗜银染色颗粒数.结果给硫丹低、中、高3个剂量组有丝分裂指数的中位数分别为3.0、3.5和4.75,均高于阴性对照组(2.0),差异有显著性(P＜0.01),且有明显的剂量-效应关系.同时各组之间的嗜银染色颗粒数差异有显著性(P＜0.01),阴性对照组、硫丹低、中、高剂量组和阳性对照组的均值分别为2.12、2.77、3.39、3.88、4.44,给硫丹的各剂量组都比阴性对照组高,并有明确的剂量-效应关系.结论硫丹能促进子宫内膜细胞DNA的转录和复制,加速细胞的分裂和增殖,因此,推断它在小鼠体内可能具有雌激素样作用.
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镉对未成年雌性小鼠子宫增重作用的量效关系
目的通过研究镉对未成年小鼠子宫增重作用的剂量-效应关系,为探讨镉的雌激素样活性提供实验据.
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镉的雌激素样作用及相关机制体内的实验
目的研究镉的雌激素样作用及其相关机制,为镉的雌性性腺生殖毒性机制的阐明提供科学依据.方法 (1)未成年雌性SD大鼠分别给予0、1、2和4mgCd2+/kg及30μg/kg β-雌二醇,皮下注射,1次/d,共3 d,第4 d时剖杀观察子宫湿重、子宫内膜厚度、子宫内膜腔上皮厚度、子宫内膜增殖细胞核抗原(PCNA)表达.
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白藜芦醇的雌激素样作用研究
为研究白藜芦醇在体内的雌激素样作用,给刚断乳小鼠分别皮下注射和灌胃不同剂量的白藜芦醇,观察该物质对子宫和阴道的影响.结果显示,2.0 mg/kg.BW的白藜芦醇可明显促进未成熟小鼠阴道开口(P<0.05)和阴道上皮角化,显著增加子宫重量及其系数(P<0.05, P<0.01),并可使子宫内膜柱状上皮增厚或腺体增生.结果表明白藜芦醇在体内具有雌激素样作用.而口服白藜芦醇的雌激素活性明显弱于皮下注射.
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污水处理传统工艺与新工艺出水中有机提取物的雌激素样作用比较
目的 评价污水处理厂传统处理工艺和新技术处理工艺出水中有机提取物的雌激素样活性,比较两种处理工艺对微量有机污染物的去除效果.方法 采用树脂吸附固相萃取富集水样中的微量有机污染物,利用重组基因酵母试验和小鼠子宫增重实验检测水样中有机提取物的雌激素样活性大小.结果 重组基因酵母检测中,在原水样中微量有机污染物浓缩1000倍条件下,新技术出水有机提取物处理的酵母表现出β-半乳糖苷酶活性,而三级出水、二级出水和进水都为500倍,相同条件下的β-半乳糖苷酶活性,新技术出水组＜三级出水组＜二级出水组＜进水组.小鼠子宫增重实验中,仅进水有机提取物油溶液原液组和阴性对照组之间具有显著性差异(P＜0.05),其他各水样组之间皆无显著性差异.结论 郑州市城市污水经处理后雌激素样活性显著下降,但仍对环境具有潜在危害;新技术对污水中微量有机污染物的去除效果明显好于传统技术.
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淫羊藿素和脱水淫羊藿素对人类乳腺癌细胞T47D增殖和细胞周期的影响
目的 探讨淫羊藿素和脱水淫羊藿索对人类乳腺癌细胞株T47D增殖和细胞周期的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法测定淫羊藿素和脱水淫羊藿素对雌激素依赖性乳腺癌细胞T47D的细胞增殖作用.并以雌激素受体拮抗剂ICI 182,780和雌激素受体ERB激动剂DPN为工具药来评价淫羊藿素和脱水淫羊藿素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系,流式细胞术对T47D细胞的增殖情况进行分析.结果 淫羊藿素和脱水淫羊藿素在10-8～10-6范围内能促进T47D细胞的增殖,并将T47D细胞周期由G1期向S期推进,促进DNA合成,提高细胞分裂增殖指数,且淫羊藿素和脱水淫羊藿素促进T47D细胞增殖作用被雌激素受体拮抗剂所拮抗.结论 淫羊藿素和脱水淫羊藿素具有雌激素活性,此作用可能是通过雌激素受体(ER)介导的.
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采用MCF7和T47D乳腺癌细胞模型对淫羊藿苷雌激素样作用的实验研究
目的 探讨淫羊藿苷是否具有雌激素样作用.方法 采用MCF7和T47D两种不同的乳腺癌细胞为筛选模型,通过淫羊藿苷及其含药血清对乳腺癌细胞的增殖实验,来评价其雌激素活性.结果 淫羊藿苷的含药血清均能明显刺激乳腺癌细胞的增殖,而淫羊藿苷不能促进两种受体阳性乳腺癌细胞的增殖.结论 淫羊霍苷可能是通过体内发生水解反应,将糖苷水解成苷元,从而表现出雌激素样作用的.
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二仙汤雌激素样作用的实验研究
目的 通过不同的实验方法来确定二仙汤及其拆方中是否在ICR小鼠体内有雌激素样作用.方法 采用子宫增重实验、EUSA实验法,通过对幼龄小鼠子宫湿重和血清中相关激素的影响,观测是否具有雌激素的作用.结果 子宫增重实验中,淫羊藿组和茅二组可使动物子宫系数明显升高.在血清雌激素与睾酮含量水平测定实验中可以看出,四温组明显能升高小鼠的血清雌激素水平(P＜0.01).巴茅组的雌激素水平反而降低(P＜0.05).与正常组相比,二仙汤组、四温组、茅二组、淫羊藿组血清睾酮水平明显低于正常组(P＜0.01).结论 初步验证了二仙汤及其部分拆方的雌激素样作用.二仙汤各拆方组中,含有淫羊藿剂量大的组对小鼠子宫增重的幅度和雌激素水平明显大于淫羊藿剂量小和不含淫羊藿组,所以二仙汤的雌激素作用很可能是淫羊藿所发挥的.
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左归丸对卵巢摘除小鼠类雌激素样作用的实验研究
目的 观察左归丸对去卵巢小鼠的雌激素样作用.方法 采用经典的双侧卵巢切除法使小鼠体内雌激素降低,术后3天,左归丸灌胃给药4周,取材,测血清中雌二醇水平、计算子宫系数.通过HE染色,观察阴道和子宫形态改变,并对比子宫和阴道内膜的厚度的前后变化.结果子宫系数:左归丸高剂量组与模型组比较,具有显著性差异(P<0.05);子宫内膜:左归丸高、中剂量组与模型组比较均具有极显著性差异(P<0.01);阴道内膜:左归丸高、中、低计量组与模型组比较均具有极显著性差异(P<0.01);可以明显缓解子宫和阴道内膜的萎缩;血清中雌激素水平:左归丸高剂量组与模型组相比,小鼠血清中的雌二醇含量并没有明显性变化(P>0.05),左归丸中剂量、低剂量组与模型组相比,小鼠血清中的雌二醇水平回升趋势具有显著性差异(P<0.05).结论 左归丸具有明显的类雌激素样作用,能够改善雌激素减少导致的子宫萎缩和阴道形态的变化,但左归丸提高去卵巢小鼠血清中的雌激素含量与其类雌激素样作用并没有明显相关性.
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补骨脂对去卵巢大鼠雌激素样作用研究
目的:观察补骨脂对去卵巢大鼠的雌激素样作用.方法:SD雌性大鼠行双侧卵巢摘除术(假手术组只切除卵巢附近脂肪),随机分为去卵巢模型组、补骨脂组(0.59 g·kg)、补佳乐组(0.8 g×10-4g·kg-1)和假手术组,ig 4周后分别观察大鼠肛温、子宫和肾上腺系数,ELISA法检测血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)水平.结果:模型组大鼠与假手术组比较肛温升高,子宫和肾上腺萎缩,血清中E2水平下降,LH,FSH水平升高.与模型组比较,补骨脂组、补佳乐组大鼠的肛温明显降低(P＜0.01),子宫和肾上腺系数明显提高(P＜0.05,P＜0.01),血中E2浓度明显升高,LH,FSH水平明显降低(P＜0.01).结论:补骨脂能降低去卵巢大鼠的肛温,增加子宫和肾上腺系数,升高血中E2水平并降低LH,FSH水平,表明补骨脂对去卵巢大鼠有雌激素样作用.
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二至丸对未成熟小鼠雌激素样作用分析
目的:观察二至丸对未成熟小鼠子宫系数、血清中雌二醇(estrodiol,E2),子宫阴道形态学变化及雌激素受体(estrogen receptor,ER)α和ERβ表达的影响,探讨其发挥雌激素样作用机制.方法:取健康,出生21 d的昆明种雌性小鼠40只,随机分成4组,分别为空白组,阳性药戊酸雌二醇(EV)组(0.154 mg·kg-1),二至丸1.365,2.73 g·kg-1组,每组10只,连续给药7d后观察小鼠子宫系数;分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中E2的水平;苏木素-伊红(HE)染色法观察未成熟小鼠子宫阴道形态改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测子宫、阴道ERα和ERβ的蛋白表达水平.结果:与空白组比较,二至丸1.365 g·kg-1组能使未成熟小鼠子宫系数显著增加(P＜0.05),血清中E2含量明显升高(P＜0.05),能明显促进靶器官子宫、阴道的生长发育,还能显著上调阴道ERα和ERβ表达(P＜0.05),与EV作用相似.结论:二至丸通过上调血中雌二醇含量和靶器官雌激素受体表达发挥雌激素样作用.
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基于细胞萃取及分子对接的淫羊藿中雌激素样作用成分分析
目的:利用T47D细胞/液质联用及分子对接筛选淫羊藿中具有雌激素样作用的成分.方法:采用溶有淫羊藿提取物的培养基培养T47D细胞,具有雌激素样作用的成分选择性地与T47D细胞结合,培养一定时间后,清洗并破碎细胞,释放出与其结合的成分,后利用液质联用技术进行分析鉴定.对于鉴定出的可与细胞结合的成分,采用分子对接的方法研究其与雌激素受体的相互作用.结果:初步检测出淫羊藿中可与T47D细胞结合的7个成分,分别为淫羊藿苷,朝藿定B,宝藿苷-Ⅱ,淫羊藿次苷-Ⅰ,宝藿苷-Ⅰ,朝藿苷甲,脱水淫羊藿素,其中宝藿苷-Ⅱ,脱水淫羊藿素可与雌激素受体发生相互作用.结论:宝藿苷-Ⅱ,脱水淫羊藿素可与T47D细胞结合,且均可与2种雌激素受体发生作用,提示两者可能具有雌激素样作用.
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具有雌激素样作用的补肾阳药对脂代谢的影响
中医认为绝经后卵巢功能失调、雌激素减少的根本原因是肾虚.肾虚分为肾阴虚证、肾阳虚证和肾阴阳俱虚证.针对雌激素减少出现的脂代谢紊乱及相关疾病属肾阳虚证者,常应用补肾阳药物进行治疗,一方面可以温补肾阳,改善卵巢功能,发挥雌激素样作用,另一方面可以温肾助阳、增强气化作用,达到化浊降脂的功效.查阅整理文献发现,许多具有雌激素样作用的补肾阳药同时也具有调脂作用,如淫羊藿、鹿茸、杜仲、补骨脂、菟丝子、蛇床子、肉苁蓉、沙苑子；有些补肾阳药具有调脂作用,如冬虫夏草、肉桂、金樱子；而有些补肾阳药则具有雌激素样作用,如紫河车、续断、蛤蚧.总结补肾阳中药的雌激素样作用和调脂作用,可以为深入探讨补肾阳中药的雌激素样作用和调脂作用的相关性提供依据.
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藜芦配伍白芍对未成熟小鼠雌激素样作用的影响
目的:观察藜芦配伍白芍对未成熟小鼠雌激素样作用的影响,为中药十八反藜芦反白芍配伍禁忌内涵提供实验依据.方法:取健康、出生21 d的昆明种雌性小鼠100只,随机分为正常组,白芍高,低剂量组(4,2 g·kg-1),阳性药雌二醇(E2)组(0.1g.kg-1),白芍高、低剂量+藜芦(0.045 g·kg-1)组,E2+藜芦组,白芍高、低剂量+雌激素受体拮抗剂ICI(0.005g· kg-1)组,E2+ICI组;给药6d后,分别计算子宫系数、检测血清中雌二醇(E2),黄体生成素(LH),促卵泡生成素(FSH)的水平,HE染色观察子宫和阴道的病理学变化.结果:与正常组比较,白芍给药组(4,2 g·kg-1)均能使未成熟小鼠的子宫系数显著增加(P＜0.01),血清中E2含量明显升高(P＜0.05),LH(P＜0.01)和FSH(P ＜0.01)的水平显著降低,还能明显促进靶器官子宫、阴道的生长发育,与E2作用相似略弱;白芍给药组(4,2 g·kg-1)配伍藜芦后,子宫系数明显降低(P＜0.01),血清中E2含量明显降低(P＜0.o1),LH(P＜0.01)和FSH(P ＜0.01)水平明显升高,子宫和阴道的促生长发育作用减弱,与配伍ICI的作用趋势一致.同时,E2配伍藜芦后,子宫系数显著降低(P＜0.01),血清中E2含量明显降低(P＜0.01),LH和FSH水平明显升高(P＜0.01),子宫和阴道的促生长发育作用减弱,其作用与配伍ICI组相似.结论:当藜芦与白芍配伍时,可以妨害白芍的雌激素样作用;藜芦对白芍的妨害作用可能跟藜芦的雌激素受体拮抗剂作用有关.
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藜芦配伍丹参对未成熟小鼠雌激素样作用的影响
目的:观察藜芦配伍丹参对未成熟小鼠雌激素样作用的影响,为中药十八反藜芦反丹参的配伍禁忌内涵提供实验依据.方法:取健康、出生21 d的昆明种雌性小鼠100只,随机分为10组,分别为正常组,丹参高、低剂量组(3.2,1.6g·kg-1),阳性药雌二醇(E2)组(0.1 g·kg-1)组,丹参高、低剂量+藜芦(0.045 g·kg“)组,E2+藜芦组,丹参高、低剂量+雌激素受体拮抗剂(ICI)组(0.005 g·kg-1),E2+ICI组,每组10只,给药7d后分别观察小鼠子宫系数、血清中E2,黄体生成素(LH),促卵泡生成素(FSH)的水平及子宫、阴道的病理学变化.结果:与正常组比较,丹参高、低剂量组均能使未成熟小鼠的子宫系数显著增加(P＜0.01,P＜0.05),血清中E2含量明显升高(P＜0.01),LH(P ＜0.05)和FSH(P ＜0.01,P＜0.05)的水平显著降低,还能明显促进靶器官子宫、阴道的生长发育,与E2作用相似略弱;丹参高、低剂量组配伍藜芦后,子宫系数明显降低(P＜0.05,P＜0.01),血清中E2含量明显降低(P＜0.01,P＜0.05),LH(P＜0.01)和FSH(P ＜0.05,P＜0.01)水平明显升高,子宫和阴道的促生长发育作用减弱,与配伍ICI的作用趋势一致.同时,E2配伍藜芦后,子宫系数显著降低(P＜0.01),血清中E2含量明显降低(P＜0.01),LH和FSH水平明显升高(P＜0.01),子宫和阴道的促生长发育作用减弱,其作用与配伍ICI组相似.结论:丹参具有雌激素样作用,藜芦具有雌激素受体拮抗剂样作用,藜芦配伍丹参后能够妨害丹参的雌激素样作用.
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尿畅舒胶囊对动物雌激素样作用的实验研究
目的观察尿畅舒胶囊对动物的雌激素样作用,即尿畅舒胶囊对幼年小鼠子宫重量的影响,尿畅舒胶囊对去势大鼠血清雌二醇浓度的影响.方法Sartorius天平测量幼年小鼠子宫重量,放射免疫法测定血清中雌二醇的浓度.结果尿畅舒胶囊能够显著增加幼年小鼠的子宫重量,对去势大鼠的血清雌二醇浓度具有明显升高作用.结论尿畅舒胶囊具有雌激素样作用.
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胶艾汤及参芪胶艾汤的雌激素样作用及可能机制
目的:观察胶艾汤及其加味方参芪胶艾汤的植物雌激素样作用,并利用雌激素受体(ER)(+)MCF7细胞探讨其发挥雌激素样作用的可能靶点和机制.方法:正常昆明种性未成熟雌性小鼠60只,体重9～12 g,按体重均衡和随机的原则分为6组:正常组给予等体积蒸馏水,阳性药己烯雌酚组按0.35 mg·kg~(-1)·d~(-1)给予己烯雌酚,胶艾汤和参芪胶艾汤低,高剂量组分别按2.5,5.0 g·kg~(-1)·d~(-1)给予中药方剂,给药持续4 d.第5天眼眶取血,分离血清,称取子宫并计算子宫系数.通过MTT细胞增殖实验观察2个方剂含药血清对MCF7细胞增殖的影响;运用实时荧光定量RT-PCR技术检测含药血清对雌激素效应基因pS_2及ERα，ERβ泶锏牡骺刈饔茫徊⒁源萍に厥芴遛卓辜罥CI182,780干预,探讨其发挥雌激素样作用的可能机制.结果:高剂量胶艾汤及参芪胶艾汤能够明显提高性未成熟小鼠的子宫系数(P<0.05);其含药血清能够显著促进MCF7细胞增殖(P<0.05或0.01),加入ER拮抗剂ICI182,780可抑制其促增殖作用(P<0.05或0.01).与已烯雌酚组一致,2个方剂含药血清也可提高靶细胞pS_2表达水平(P<0.01),加入ICI182,780可抑制ps_2表达水平的提高(P<0.01);2个方剂含药血清还可明显提高ERα(P<0.05)和ERβ(P<0.01)的表达水平.结论:胶艾汤及参芪胶艾汤均具有一定的通过ER介导的雌激素样作用,并可提高靶细胞ER亚型(特别是ERβ）mRNA的表达水平.
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黑大豆乙醇提取物的雌激素样作用及其机制研究
目的:评价黑大豆乙醇提取物(black soybean ethanol extract,BSE)的雌激素样作用及其作用机制.方法:采用富含雌激素受体的雌激素依赖性人乳腺癌细胞株MCF-7细胞,分别以E-SCREREEN法观察BSE对其增殖的影响、以RT-PCR法观察BSE对其雌激素效应基因mRNA表达的影响,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价BSE发挥雌激素样作用的机制.结果:与溶剂对照组相比较,BSE(10～200μg·mL-1)能显著促进MCF-7细胞的增殖,100μg·mL-1时作用达到大;BSE能明显诱导MCF-7细胞pS2,孕激素受体(PR)基因mRNA的表达,并与药物浓度有一定相关性;以上作用均能被雌激素受体拮抗剂所完全拮抗.结论:BSE能促进MCF-7细胞的增殖,诱导雌激素效应基因mRNA的表达,即BSE能通过雌激素受体发挥雌激素样作用.
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金雀异黄酮与芹菜素的雌激素样作用体外研究
目的:用雌激素受体( estrogen receptor,ER)表达阳性细胞株人乳腺癌细胞MCF-7,检测金雀异黄酮(genistein)与芹菜素(apigenin)的雌激素样活性大小.方法:用MTT法研究金雀异黄酮与芹菜素对体外培养MCF-7细胞增殖的影响；Realtime RT-PCR法检测其对ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA表达水平的影响.结果:金雀异黄酮与芹菜素促进MCF-7增殖；金雀异黄酮的1×10-10 mol·L-1组显著增加ERα mRNA的表达水平,是对照组的17.76倍,是阳性对照E2组的1.75倍.芹菜素显著促进了PR mRNA表达水平,是对照组4.57倍,并达到E2组1.11倍.两者在不同浓度对ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA中的一个或几个均有不同的促进作用.结论:金雀异黄酮与芹菜素均有明显的雌激素样作用,虽对于不同的雌激素应答基因( ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA)表现出不同的促进表达作用,但金雀异黄酮更加强烈.提示植物雌激素发挥雌激素样作用的信号途径与雌激素信号途径并不完全相同；黄酮类药物的B环位置是雌激素样活性的关键位点之一,异黄酮(B环处于3位时)的雌激素样活性大于黄酮(B环处于2号位).
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芒柄花素的植物雌激素作用研究
目的:探讨芒柄花素的雌激素样作用及其可能机制.方法:选取当归、黄芪、红三叶草中含有的黄酮类物质之一——柄花素,利用ER阳性T47D细胞,检测其对细胞增殖速率、分裂增殖指数以及ER亚型表达的影响,评价芒柄花素的植物雌激素活性.结果:MTT增殖试验结果显示,1 x10-71x10-6mol·L-1芒柄花素不能促进人乳腺癌细胞T47D的体外增殖;在101182,780抑制试验中,芒柄花素可能能够与101182,780协同作用抑制T47D细胞体外增殖;流式细胞术测定细胞周期结果显示,1 X10-71x10-6mol·L-1芒柄花素对T47D细胞的分裂增殖指数没有影响;芒柄花素有增强T47D细胞ERα表达的作用(P<0.05).结论:芒柄花素能够在体外条件下增强T47D细胞ERα表达,具有植物雌激素样作用,但该物质不能促进T47D细胞的体外增殖.
