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黄芪对糖尿病肾病大鼠肾间质Wnt/β-catenin及TGF-β1信号通路表达的影响
目的:观察黄芪(AM)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾间质中Wnt/β - catenin信号通路及转化生长因子-β1( TGF -β1)表达情况的影响,探讨其抗糖尿病肾病肾间质纤维化的作用机制.方法:采用单次空腹腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型.4周后测定24 h尿蛋白排泄量,以24 h尿蛋白定量≥30 mg确定DN大鼠模型成功(n=48).48只DN大鼠随机分为4组:DN模型组(DN组)、黄芪治疗组(DA组)、DN模型组+氯沙坦治疗组(DL组)、DN模型组+黄芪联合氯沙坦治疗组(AL组),每组12只.选取12只健康雄性wistar大鼠作为正常对照组(N组).连续给药12周后,记录大鼠体重,并检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)及24 h尿蛋白定量；处死大鼠,留取肾组织行HE及Masson染色观察肾间质病理改变,采用免疫组织化学技术及实时荧光定量PCR( FQ - PCR)检测肾间质中Wnt4、β - catenin及TGF -β1蛋白及mRNA的表达.结果:与N组比较,12周末DN组大鼠24 h尿蛋白定量、血清BUN、Scr水平明显增高,差异有统计学意义(P＞0.05).与N组比较,12周末DN组、DA组、DL组和AL组肾间质Wnt4、β- catenin及TGF -β1蛋白表达量明显增加(P＜0.05).DA组、DL组和AL组作两两比较,AL组24 h尿蛋白定量、血清BUN、Scr、Wnt4、β - catenin及TGF -β1下降更为明显,差异有统计学意义(P＜0.05).DA组与DL组相比各指标差异无统计学意义(P＞0.05).FQ - PCR结果显示wnt4、β - catenin和TGF -β1 mRNA在各组大鼠肾组织中的表达与Wnt4、β- catenin及TGF-β1蛋白表达趋势一致.结论:黄芪可以降低24 h尿蛋白定量,减轻肾间质病理损伤,下调wnt4、β- catenin及TGF-β1在肾间质中的表达,提示黄芪可能通过下调Wnt4、β- catenin及TGF-β1在肾间质中的表达,延缓DN大鼠肾间质纤维化的进程,而发挥肾脏保护作用.
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益肾固精汤对系膜增生性肾炎患者TGF-β1表达的影响
目的:观察益肾固精汤对系膜增生性肾炎患者TGF - β1的表达并探讨其在系膜增生性肾炎中的作用机理.方法:将60例患者随机分为肾炎对照组、苯那普利组和中药治疗组各20例,另选择20例健康志愿者为正常对照组.肾炎对照组采用肾炎常规基本用药,即利尿降压等对症治疗；苯那普利组采用常规基本用药加苯那普利片10mg/d；中药治疗组采用肾炎常规基本用药加益肾固精汤,用双抗体夹心ELISA法检测血清TGF -β1水平.结果:系膜增生性肾炎患者各组TGF - β1表达明显高于健康对照组(P＜0.01)；TGF - β1治疗前后比较,肾炎对照组治疗后TGF - β1表达无明显差异((P＞0.05),苯那普利组和中药治疗组TGF -β1表达较治疗前明显下降(P＜0.05),但两组比较无明显差异((P＞0.05).结论:益肾固精汤可能具有抑制肾脏纤维化,从而达到减轻肾脏病理损害,减少蛋白尿的作用.
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间质流膏对特发性间质性肺炎患者血清TGF -β1、TNF -α水平变化的影响
[目的]观察间质流膏对特发性间质性肺炎患者血清TGF -β1、TNF -α水平变化的影响.[方法]将90例入选的特发性间质性肺炎患者随机分为间质流膏组,间质流膏加激素组,激素组三组,观察血清TGF -β1、TNF -α水平的改变.[结果]三组患者血清TGF -β1、TNF -α水平均较前降低,以A和B两组更为显著.[结论]问质流膏能有效降低患者血清TGF -β1、TNF -α水平.
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TGF-β1原核表达载体的构建
目的:克隆人TGF - β1基因,为TGF -β1的研究提供平台.方法:应用RT - PCR技术扩增人TGF - β1基因序列,将TGF -β1基因插入载体PET - 28a,构建pET -28a - TGF -β1重组质粒.结果:经限制性内切酶鉴定及DNA序列测定,重组质粒PET -28a-TGF-β1序列及阅读框架正确.结论:获得了TGF - β1编码序列和表达载体,能满足进一步实验的需要.
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痔科外洗方对肛瘘创面修复TβR-β31、TGF-β1mRNA表达的影响
[目的]探讨痔科外洗方对肛瘘创面修复的作用机理.[方法]采用动物模型,运用实时荧光定量PCR方法动态观测大鼠肉芽组织的TGF-β1水平及TGF-β1mRNA表达水平的影响,并与高锰酸钾作比较.[结果]痔科外洗方可明显提高TGF-β1水平,对TGF-β1 mRNA表达有良好的调控作用,功效优于高锰酸钾.[结论]痔科外洗方对TGF-β1mRNA的良好调控作用是其对肛瘘创面的修复作用的重要机理.
关键词： 肛瘘 创伤修复 TGF -β1 TGF -β1 mRNA 痔科外洗方 -
养阴清肺汤对大鼠肺纤维化的干预作用及对TGF-β1表达的影响
目的:观察养阴清肺汤对博莱霉素( bleomycin,BLM)致大鼠肺纤维化模型的干预作用和转化生长因子-β1(transforming growth factorβ-1,TGF -β1)的影响,探讨养阴清肺汤参与肺纤维化的机制.方法:健康SD大鼠60只随机分3组:正常对照组(生理盐水),模型组(博莱霉素),治疗组(博莱霉素+养阴清肺汤).分别在第7,14,21,28天,每组5大鼠,HE染色观察支气管肺组织病理改变,免疫组化观察肺组织中TGF-β1表达.结果:(1)治疗组大鼠肺泡炎和肺纤维化发生率明显降低,且程度轻,无严重肺纤维化发生.(2)治疗组肺间质中TGF- β1表达比模型组明显减少(P＜0.05).结论:养阴清肺汤能减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能是通过下调TGF -β1的表达而起作用.
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载基因 PGenesil-TGF-β1壳聚糖纳米粒的制备和性能研究
制备负载重组质粒 PGenesil-TGF-β1的壳聚糖纳米粒，并研究其结构特征和性能特点。采用复凝聚法制备壳聚糖-PGenesil-TGF-β1（报告基因）纳米微粒体，通过投射电镜测定其形态、粒径；采用全光谱分光光度计测定该复合物的包封率；凝胶电泳阻滞实验分析纳米粒载体与质粒的结合能力；DNase I 消化实验观察壳聚糖纳米粒保护质粒抵抗核酸酶的能力。制备的壳聚糖-PGenesil -TGF -β1纳米粒均呈球形，微粒直径在100～200 nm 之间，平均约（127．37±19．75）nm；其包封率为（94．38±0．45）％；凝胶电泳阻滞实验结果表明壳聚糖纳米粒能通过静电作用有效结合质粒，将其包裹在内；DNase I 消化实验显示壳聚糖纳米粒能有效地保护质粒免受核酸酶的降解。用复凝聚法成功制得壳聚糖-PGenesil -TGF -β1纳米粒，为后续研究基因药物奠定了实验基础。
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中西医结合治疗对大鼠哮喘模型气道重组影响的实验研究
目的 观察速效平喘合剂与激素单独及联合应用对气道重组的病理形态学改变以及对TGF -β1表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积的影响.方法 观察中药与激素单独及联合应用对气道壁TGF -β1与EOS以及对胶原Ⅰ、Ⅲ的影响,并采用图像分析光密度进行半定量评定.结果 ①速效平喘合剂与耱皮质激素联合应用能显著降低哮喘模型大鼠肺泡灌洗液(BALF)中EOS的含量,明显减轻由EOS浸润引起的慢性变态性炎症反应.②速效平喘合剂与糖皮质激素联合应用能显著降低TGF -β1及胶原Ⅰ、Ⅲ的表达,干预哮喘气道重组,发挥治疗作用.结论 ①EOS的浸润、TGF -β1表达及胶原Ⅰ、Ⅲ的沉积在气道重组中发挥着重要的作用；中药速效平喘合剂与激素的联合运用能够减少EOS的浸润以及TGF -β1的表达和胶原Ⅰ、Ⅲ的沉积.②在气道重组形成早期糖皮质激素或中药速效平喘合剂预防性给药,可明显预防或延缓气道重组的发生.
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麝香乌龙丸对佐剂关节炎大鼠滑膜衬里层病理形态及bFGF、TGF - β1表达的影响
目的 观察麝香乌龙丸对佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜衬里层病理形态及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β1( TGF -β1)表达水平的影响,探讨麝香乌龙丸治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是否与调节bFGF、TGF -β1水平有关.方法 将健康Wistar大鼠30只,随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、麝香乌龙丸组(C组),采用弗氏完全佐剂法建立模型,麝香乌龙丸灌胃1周后,HE染色、光镜下观察各组滑膜衬里层病理变化、衬里层滑膜细胞层数,免疫组织化学法检测各组滑膜衬里层bFGF、TGF-β1表达.结果 C组光镜下衬里层病理改变,滑膜细胞增生较模型组减轻,C组衬里层细胞增生与B组比较明显下降(P＜0.05)；B组bFGF、TGF -β1表达明显高于A组(P＜0.05),C组bFGF、TGF-β1表达较B组降低(P＜0.05).结论 麝香乌龙丸治疗类风湿关节炎的机理可能与调节bFGF、TGF-β1的表达水平有关.
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健胃愈疡颗粒剂对大鼠胃粘膜的保护及其作用机制探讨
目的探讨健胃愈疡颗粒(JWYY)对胃溃疡大鼠粘膜的保护作用及其可能的机制,方法用Okabe改良法复制SD大鼠胃溃疡模型,用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子 -β1(TGF-β1)和白细胞介素 -8(IL - 8)mRNA的表达,结果 (1)TGF - β1在正常组有少量表达,在JWYY组较正常组、模型组及假手术组显著升高,与法莫替丁(FMTD)预防组比较差异有显著性,(2) IL - 8在正常组几乎没有表达;模型组表达较正常组、假手术组、JWYY组和FMTD组显著增高; JWYY组和FMTD组比较,差别有显著性,结论JWYY能增加大鼠胃粘膜中TGF -β1mRNA的表达,减少IL -8mRNA的表达; 对大鼠胃粘膜组织具有保护作用,预防乙酸诱导性胃溃疡.
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丹参水溶性物质 SA －B 对 TGF －β1活化细胞内Smad 与 p38MAPK 信号传导通路的抑制作用
目的：探究丹参水溶性物质 SA －B 对 TGF －β1活化细胞内 Smad 与 p38MAPK 信号传导通路的抑制作用。方法：将肾小管上皮细胞培养液中加入不同的药物，诱导组加入20μg／ml 的马兜铃酸进行诱导；实验 A1、A2、A3组，在诱导组的基础上分别加入5、10、20μg／ml 的丹参水溶性物质 SA －B；对照组不加任何药物。细胞培养24、48、72h 后检测各组的 TGF －β1－mRND 水平、培养液中 TGF －β1的含量、Smad 以及 p38MAPK 的表达进行，记录检测结果。结果：诱导组的 TGF －β1－mRND 水平、TGF －β1蛋白含量分泌与对照组相比，均具有统计学意义（P ＜0.05），且实验组的同期诱导组相比，水平显著下降（P ＜0.05）。诱导组的 Smad 与 p38MAPK 合成趋势明显，而实验组 Smad 与 p38MAPK 的表达呈现下降趋势。结论：丹参的水溶性物质－SA －B 对 TGF －β1活化细胞内 Smad 与 p38MAPK 信号传导通路具有显著的抑制作用。
关键词： 丹参水溶性物质 SA -B TGF -β1 Smad p38MAPK -
加味苓桂术甘汤对肾纤维化大鼠肾组织 TGF －β1表达的影响
目的：观察加味苓桂术甘汤对大鼠肾纤维化模型的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：将40只 Wistar 雄性大鼠随机分为4组：正常对照组、模型对照组、低剂量加味苓桂术甘汤组与高剂量加味苓桂术甘汤组。按200mg／（kg·d）腺嘌呤灌胃建立大鼠肾纤维化模型。28d 后采集血液标本，检测大鼠血清 BUN、Cr 水平的变化；留取肾组织，用于 HE 染色观察肾组织病理改变及免疫组化方法检测肾组织 TGF －β1的表达。结果：模型对照组血清 BUN、Cr、肾组织 TGF －β1较正常对照组明显升高，加味苓桂术甘汤各组上述指标较模型对照组明显下降。结论：加味苓桂术甘汤可保护肾功能，通过下调 TGF －β1表达延缓肾纤维化进展。
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三阴性乳腺癌患者外周血中 TGF －β1含量与其临床特征及预后的关系
目的：研究乳腺癌患者在治疗前后外周血中 TGF －β1蛋白含量变化，初步探讨 TGF －β1含量与其临床特征及预后之间的关系。方法：酶联免疫吸附实验测定三阴性乳腺癌患者治疗前后外周血中 TGF －β1蛋白含量变化。并随访5年内的无瘤生存时间。研究 TGF －β1浓度的变化与各项临床特征及其预后之间的关系。结果：三阴性乳腺癌组患者外周血中 TGF －β1蛋白的含量显著高于非三阴型乳腺癌组，且经过有效的治疗后，其含量由（108．43±10．55）ng／L 降至为（58．41±10．78）ng／L，与治疗前比具有统计学差异（P ＝0．000）。TGF －β1的含量在不同年龄、绝经状态、肿瘤家族史、肿瘤大小等方面无显著差异，但与肿瘤的组织学分级及腋下淋巴结转移与否有显著的关联，其含量越高，5年内无瘤生存时间越短。结论：三阴性乳腺癌患者外周血中 TGF －β1的含量显著增高，与肿瘤组织学分级及腋下淋巴结是否转移显著正相关，与5年无瘤生存时间呈负相关，能够为乳腺癌的临床治疗、预后判断提供新的靶点及思路。
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TGF-β1在梗阻性黄疸大鼠胆总管中的表达
目的:探讨TGF -β1在梗阻性黄疸大鼠胆总管中的表达.方法:监测对照组(假手术组)、梗阻性黄疸大鼠1天、7天、15天、23天、30天共计5个时间点取大鼠梗阻段胆管壁的炎症水肿程度及转化生长因子β1(TGF-β1)在胆道损伤后不同时期的表达强度.结果:胆总管完全梗阻的情况下,随着时间的增加,胆管壁炎症水肿程度在术后初期逐渐增加,23天达到高峰,后逐渐下降.胆管壁的TGF -β1表达量在30天内逐渐增加.结论:胆道损伤后,7天内胆道炎性水肿程度迅速增加,如不行手术干预,胆道狭窄程度会逐渐加重,直至23天后才有所缓解,但随着瘢痕的增生胆管壁会逐渐加厚,导致胆道壁永久性狭窄.
