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Cu胁迫对大麦和玉米幼苗生长及DNA损伤的影响
目的探讨外源化学物质Cu在亚毒性暴露水平下对生物体遗传物质作用的特点和机制,筛选和利用敏感、特异和简便的生物标记物.
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金莲花种质遗传多样性的AFLP分析
金莲花是我国常用中药材品种,开展种质遗传多样性研究对新品种选育具有重要意义.本文利用AFLP标记技术对8份金莲花种质在基因组水平开展了遗传多样性分析,采用POPGENE和NTSYS软件对统计结果进行遗传和聚类分析.从64对AFLP引物组合中筛选出的8对引物组合,能够区分全部供试金莲花种质;地理位置较近的金莲花种质,遗传相似系数较高;引种可造成金莲花种质的遗传结构发生变异.
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不同种源高良姜遗传多样性的AFLP分析
目的:研究不同种源高良姜的遗传多样性,探求各种质间的亲缘关系,为合理利用高良姜种质资源及优良品种选育奠定理论基础.方法:采用扩增片段长度多态性(AFLP)技术,对8个种源地的高良姜进行遗传多态性分析,将扩增出的条带作为原始矩阵,用NTSYSpc-2.11F软件计算并分析高良姜种质间的相似度,构建遗传系统进化树.结果:通过筛选得到8对AFLP引物组合,共扩增出1120个DNA条带,多态性条带为1044个,多态性位点平均为92.57%;通过构建系统进化树,将8个种源地的高良姜种质分为3类.结论:高良姜种质间存在较高多态性,遗传多样性丰富.
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半夏不同种质资源AFLP指纹系谱分析及其应用
目的:获得更多半夏DNA指纹信息,验证AFLP与其他方法是否一致,为半夏及其他中药材道地性研究、种质资源鉴定、亲缘关系研究、品种选育和引种栽培提供分子水平生物学依据.方法:选择全国10个主要产地的野生或栽培半夏为材料,采用扩增酶切片段多态性AFLP方法研究,用NTSYSpc 2.1软件包利用UPGMA法进行聚类分析,构建遗传系统树.结果:筛选12对引物,共扩增出1673条带.进行聚类分析,结果与利用总生物碱含量差异结果相吻合.结论:本研究所获得的特征带和缺失带体现了AFLP的高特异分辨率在中药半夏品种鉴定上的潜力,绘制的系统进化树不同种源之间遗传关系的远近与其总生物碱含量差异趋势一致.
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迁地保护黄檗群体的遗传多样性评价
目的:评价迁地保护黄檗群体的遗传多样性水平.方法:利用8对荧光引物,对10个迁地保护黄檗群体共计67株个体进行AFLP分析.结果:共扩增1 574条谱带,其中多态带1 354条;黄檗物种水平的遗传多样性高于迁地保护群体水平,多态位点百分率PPL分别是86.02,41.55,有效等位基因数Ne分别为1.427 5,1.237 6,Nei基因多样性指数H分别是0.231 2,0.140 0,Shannon信息指数I分别是0.397 3,0.211 3.结论:初步评价了黄檗迁地保护效果.
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红景天Rhodiola rosea不同地理居群遗传多样性分析
目的:研究分布于中国新疆天山地区红景天属植物定名种红景天Rhodiola rosea不同居群的遗传多样性.方法:野外采集18个不同居群红景天样本,进行AFLP分析,用POPGENE v1.31(32-bit)及SPSS软件分析处理数据.结果:从2套AFLP酶切系统(EcoRI/MseI)中筛选9对引物组合中共扩增出238条谱带,其中228条呈现多态性.等位基因平均数(N_a)为1.488 3,有效等位基因数(N_e)1.390 7,Nei's基因多样性指数(H)0.217 0,Shannon's信息指数(I)0.310 8,多态性比率(P)为52.71%,居群间遗传分化系数(G_(st))0.364;用UPGMA聚类分析,可将18个居群分为2个大类群.第Ⅱ大类群由6个居群组成,且均分布于海拔3 175 m以上;结论:海拔高度3 150～3 250 m分布的红景天居群遗传变异为丰富,无论就地还是迁地保护该区域,对于拯救红景天种质资源都是非常重要的.
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中国不同地理居群丹参遗传多样性分析
目的:研究中国不同地理居群丹参的遗传多样性.方法:选取我国27个不同居群的丹参样本,进行AFLP分析,POPGENE及SPSS软件分析处理数据.结果:通过筛选得到10对AFLP引物,扩增得到528条带,其中476条为多态性条带,多态性带比率为90.15%;Nei's多样性指数He为0.261 2,Shannon多样性指数I为0.403 3;27个居群遗传相似性系数0.504～0.789;用UPGMA法得到所有样本的聚类图,可分为7个主要分支组和1个组外个体.结论:我国野生丹参居群间存在较高多态性,遗传多样性较为丰富.
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药用灵芝遗传多样性的AFLP分析
目的:分析不同药用灵芝栽培菌株的遗传差异,为灵芝道地性研究、种质资源鉴定、亲缘关系研究、品种选育和引种栽培提供分子生物学依据.方法:以24个来源不同的灵芝及紫芝栽培菌株和野生菌株为材料,采用扩增酶切片断多态性AFLP方法,用NTSYSpc 2.1软件进行UPGMA法聚类分析,构建遗传系统树.结果:筛选14对引物,共扩增出177条多态性谱带.聚类结果表明利用AFLP技术可将全部供试材料区分开.结论:药用灵芝栽培菌株在分子水平上存在较大差异,并在相似系数0.676水平上聚为赤芝群和紫芝群.
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我国肉苁蓉寄主梭梭种质资源多样性的AFLP分析
该研究主要采用AFLP技术结合PopGene32和NTSYSpc2.1软件分析了我国西北地区5省14地103份梭梭的遗传多样性.结果表明:梭梭群体总的多态位点百分率为94.13％,5个省居群平均Nei's基因多样性指数(H)为0.308 0,Shannon's多态性信息指数(I)为0.467 6,说明梭梭种群内遗传多样性较高.基因分化系数(Gst)为0.313 8,即68.62％的遗传变异来自省内,31.38％的遗传变异来自省间.5个省间的基因流(Nm)为1.093 5,其基因流属于风媒异交植物的特征.AMOVA分析表明,梭梭89.34％的遗传变异出现在省内,仅有10.66％的遗传变异发生在省与省之间,进一步分析得知省内的遗传变异主要发生在各采样点居群间(84.80％).依据Nei's遗传距离对不同居群进行UPGMA聚类分析,得知新疆和青海的梭梭样品和其他各省相比其遗传关系较远且各自聚为一支,而甘肃、内蒙古和宁夏产区的样品遗传关系较近聚为一支.总之,我国梭梭种群遗传多样性较高,各地区之间的遗传分化较小,现阶段该物种的种内丰度较高.因此,加强不同地区的梭梭种质繁育和人工种植推广可以有效的保护野生梭梭资源并实现可持续利用.
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吴茱萸遗传多样性的AFLP分析
目的:应用AFLP技术对吴茱萸的遗传背景进行研究,分析不同产区吴茱萸的遗传特性差异.方法:试剂盒提取吴茱萸幼嫩叶片基因组DNA,构建AFLP实验体系并筛选引物,对来自全国5个省份的46份样品进行遗传背景的研究；用NTSYS-pc 2.1软件对AFLP扩增结果进行聚类分析.结果:从72对AFLP引物中优选6对用于吴茱萸遗传背景的研究,通过研究发现在相关系数为0.53时,浙江地区的吴茱萸石虎变种样品与其他地区样品分开；石虎变种遗传差异比吴茱萸更显著并呈现出较强的地缘相关性.结论:吴茱萸遗传背景差异明显,AFLP分析方法可有效鉴别不同品种的吴茱萸,并能检测到地区间的差异.
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叶片中含极芳香物质的蜡梅属植物遗传多样性与亲缘关系
目的:揭示叶片中含极芳香物质的蜡梅属植物的遗传多样性与亲缘关系,为药材基原鉴别及与开发利用提供基础.方法:采用扩增酶切片段多态性AFLP方法,用POPGENE 32软件进行UPGMA聚类分析.结果:选出10对引物扩增出559条带,多态性条带为226条,多态性条带百分比为36.8%.观测等位基因数、有效等位基因数、Nei's基因多样性指数和Shannon信息指数在总体水平分别为1.992 6,1.3065,0.199 2,0.325 1.21个居群间的遗传距离的变异范围在0.039 2～0.289 4.结论:叶片中含极芳香物质的蜡梅属植物遗传多样性低,加强物种与种质资源保护具有重要意义;研究结果从分子水平验证了张若蕙等叶片中含极芳香物质的蜡梅属植物物种分为柳叶蜡梅、浙江蜡梅、山蜡梅、突托蜡梅的正确性.
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忍冬种质资源遗传多样性的AFLP分析
目的:研究国内主产区忍冬种质资源的遗传多样性,探讨它们之间的亲缘关系,并为新品种选育提供参考.方法:选用6对引物组合对13个忍冬种质进行AFLP分析,利用DPS V3.01软件计算各品种的遗传距离,按UPGMA法进行聚类分析.结果:共获得435条扩增带,其中191条具有多态性,平均多态检出率为43.9％.聚类结果表明,同一道地产区的栽培品种亲缘关系较近,山东种质基于AFLP标记的分类结果与形态特征基本一致.结论:AFLP分子标记揭示出忍冬种内存在丰富的遗传多样性,为忍冬种质资源的合理利用及品种选育提供了分子水平的理论依据.
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丹参雄性不育与可育近等基因系差异片段的发掘
利用雄性不育系培育新品种和生产杂种一代,在产量、品质等方面均具有独特优势.前期课题组已通过多代连续杂交获得丹参雄性不育与可育近等基因系.该文在前期工作基础上采用AFLP和BSA技术对378对引物进行筛选,发现7对引物和26个标记与丹参育性调控基因紧密连锁,由此构建出连锁遗传图谱.以前期发现的E11/M4-208标记为模板,运用染色体步移技术,在不育和可育系中分别扩增出2 028,2 027 bp的差异片段,发现4个突变碱基位点均处于内含子中.在所有差异标记中发现E01/M09-418,E05/M13-308,E05/M04-750,E01/M01-204 4个与丹参育性调控基因紧密连锁的标记,与拟南芥1,3,5号染色体相似性达100％.其中与育性调控基因距离很近(2.1 cM)的E01/M09-418与同处于拟南芥第3号染色体的核不育基因MS2相似度高达100％.不育系中获得的2 028 bp片段与MS2基因在两处相似度达100％.与拟南芥第5号染色体相似度100％的E05/M04-750,与杨树POP085-M05基因和拟南芥中低亲和力钙逆向转运蛋白序列具有较高相似性,且E非常低.该文遗传图谱的构建和功能性差异序列的发现,为后续准确锚定丹参基因组中育性调控基因及揭示其功能奠定了坚实基础.
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白术四倍体试管苗形态学及AFLP分析
为探明白术四倍体试管苗形态变异的遗传基础,以白术二倍体试管苗为试验材料,采用抽滤灭菌的秋水仙素浸泡0.5 ～1.0 cm的白术幼芽,在获得白术四倍体的基础上,比较其与二倍体在外观形态和气孔方面的差异,并采用AFLP技术探究两者基因组DNA的多态性.结果表明用0.1％的秋水仙素处理白术幼芽36 h,为获得白术同源四倍体的适条件,四倍体诱导率高达32.0％;四倍体与二倍体植株在叶面积指数、叶长、叶宽等形态指标及保卫细胞叶绿体数、气孔大小、气孔密度等方面均存在显著差异;筛选出24对引物获得451条位于80 ～ 500 bp的DNA片段,多态性位点占总检测位点的32.59％.白术染色体加倍前后DNA碱基序列在AFLP水平上发生了改变,二倍体和四倍体试管苗在形态上的差异是DNA多态性反映的结果.
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葶苈子的AFLP指纹图谱分析
目的:研究葶苈子的DNA指纹图谱,初步探讨AFLP分子标记技术在葶苈子鉴别上的应用.方法:采用AFLP分子标记技术,对中药葶苈子及其常见混淆品荠菜和印度薄菜进行基因组.DNA多态性分析.结果与结论:选用16对EcoR I/MseI引物进行扩增,共检测到清晰条带1 346条.其中多态性条带1 303条,特异性条带759条,多态率达96.8%.每对引物组合中样品均扩增出自己的特征带,引物利用率为100%.丰富的特异性条带组合可作为样品鉴定的依据.此外,利用UP-GAM法构建样品间聚类图谱,聚类结果显示南、北葶苈子首先聚为葶苈子类,然后再和荠菜聚在一起,在遗传上两者有着较近的亲缘关系,印度蔊菜单独聚为一类.
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AFLP标记对灯盏花遗传多样性及选育品系群体一致性的分析
目的:对灯盏花群体种质资源进行分析,为灯盏花的品种选育提供依据.方法:用筛选出来的11对引物对采自云南泸西、昆明、大理、丘北、石林的6份灯盏花种质资源进行AFLP遗传多样性分析.结果:①11个引物在6份种质资源中共产生636条DNA片段,其中604条带为多态性条带,约占82.40％.②在相似系数为0.706时,6份不同地区的灯盏花可聚为3类,第1类包括千山1号和千山2号大部分样品及大理、石林、昆明3个地区的野生居群；第2类为丘北的野生居群；第3类主要为部分千山2号及其他地区样品.千山1号和千山2号灯盏花平均遗传相似系数大,遗传相似系数变幅小,品系内遗传分化较小,遗传性状较稳定；③对6份灯盏花样品的分子系统聚类分析表明:地理来源相同的部分有相对聚合现象或少部分品系出现交差聚类,与其亲缘关系较近有关；丘北居群自行一类,与其特异的遗传基础差异较大有关.结论:AFLP对灯盏花的遗传多样性分析具有可靠性；系统选育对灯盏花的育种具有可行性.
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妊娠急性脂肪肝并急性肝衰竭的救治
妊娠急性脂肪肝(acute fatty liver of pregnancy,AFLP)是一种发生于妊娠晚期,围生期死亡率很高的妊娠合并症.其主要特点是肝细胞脂肪变性,临床上以黄疽、凝血功能障碍和肝功能急剧衰竭为主要特征,同时伴有脑、肾等多种脏器功能不全~([1]).确切病因及发病机制不明,产后容易发生致命性大出血.
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妊娠期急性脂肪肝20例临床分析
妊娠期急性脂肪肝(acute fatty liver of pregnancy,AFLP)是发生于妊娠晚期的一种严重并发症,主要病变为肝脏脂肪,短期内可发生多脏器损害,母婴病死率很高,孕产妇的死亡率在80%以上[1].因此,除积极地进行护肝等治疗外,早诊断、早治疗、及时终止妊娠是抢救母婴生命的有效手段.
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妊娠期特发性肝损害与脂肪酸氧化代谢障碍
子痫前期、 HELLP综合征 ( hemolysis, elevated liver enzymes, low platelets, HELLP) 与妊娠期急性脂肪肝 ( acute fatty liver of pregnancy, AFLP) 被看作为妊娠期特发性肝损害, 另外还包括妊娠剧吐、妊娠期肝内胆汁淤积症等. 这是一组特发于妊娠时期的具有肝损伤表现的疾病, 表现为胆汁淤积性肝损害或肝细胞性肝损害.
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兔荧光扩增片段长度多态性分析体系的建立
目的:建立兔荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)分析方法并对其在实验动物科学中应用进行探讨.方法:本实验以5个品种(系)兔为实验材料,对DNA提取、预扩增和选择性扩增等步骤进行优化并对结果进行检测.结果:5个品种(系)兔的扩增片段数均在120条以上,各品种(系)特异性条带均能找出,5个品种(系)兔能据此进行区分.结论:fAFLP是一种以PCR为基础的DNA指纹技术,为兔的指纹分析提供了一种快速高效的方法,可用于兔的遗传质量检测.
