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  • 吖啶橙催化光度法测定痕量碘及其机理研究

    作者:司文会;李克俭;訾言勤

    目的:建立催化动力学光度法测定痕量I-的新方法.方法:在 0.10 mol/dm3 的柠檬酸介质中,痕量I-催化碘酸钾氧化吖啶橙褪色和生色,并初步探讨了反应机理.结果:I-浓度在 0~1.10 μg/25 cm3 范围内与吸光度差呈线性关系,检出限 0.10 ng/cm3, RSD 1.20%~3.80%,回收率 98.10%~101.60%.结论:该方法用于环境样品中I-的测定,多数常见离子无干扰,结果满意可靠.

  • 结核菌生物活性检验临床应用研究

    作者:马丽萍;肖燕;夏志伟

    据张缇等报道"鉴别死活分枝杆菌的染色方法"(以下简称荧光染色)[1],即应用吖啶橙、金胺0荧光色素对结核分枝杆菌进行染色,死菌染色后呈红色,半死菌染色后呈黄色,活菌染色后呈绿色,并通过活菌计数加以验证,从而建立死活菌鉴别染色方法.我们认为:此方法能在短时间内解决死活结核菌的鉴别问题,具有较高的应用价值.但该文未报告其临床应用情况.因此,我们采用该方法,对初治涂阳肺结核病人痰结核菌的生物学活性进行鉴定,并进行了临床病例治疗效果观察,现将结果报告如下.

  • 溴酸钾氧化吖啶橙动力学光度法测定甲醛

    作者:韩丽娟;李贵荣;贺冬秀;李少旦;杨慧仙

    目的:建立测定微量甲醛的新方法.方法:在硫酸介质中,甲醛对溴酸钾氧化吖啶橙的反应具有显著的催化作用,其吸光度值降低,用标准曲线法测定微量甲醛,据此建立了测定甲醛的新动力学光度分析法.结果:方法的线性范围为 0.0250~0.200 μg/ml,检出限为 1.50×10-3 μg/ml, RSD为 1.71%~2.11% ,样品加标回收率为 93.4%~103.5%.结论:方法操作简便,灵敏度高.用于环境水样中微量甲醛的测定,结果满意.

  • 透明质酸酶腹腔注射联合吖啶橙染色对恶性腹水的诊断价值

    作者:徐芸

    目的:探讨透明质酸酶(HAase)腹腔注射、腹水沉渣吖啶橙(AO)染色对恶性腹水诊断的应用价值.方法:28例经病理学证实为恶性腹水患者,患者先抽取腹水2 000~4 000 ml,用2 000~3 000 u透明质酸酶腹腔注射,次日抽腹水,沉渣AO染色,荧光显微镜下观察,与病理细胞学对比检测癌细胞的阳性率.结果:用HAase前后腹水沉渣病理细胞学癌细胞检出率和腹水沉渣AO染色癌细胞检出率差异均有统计学意义(P均<0.005).透明质酸酶腹腔注射前腹水沉渣AO染色比常规病理细胞学检测肿瘤细胞的阳性率高(P<0.05).透明质酸酶腹腔注射后腹水沉渣AO染色与常规病理细胞学检测肿瘤细胞的阳性率差异无统计学意义(P>0.5).结论:透明质酸酶腹腔注射结合AO染色检测腹水肿瘤细胞的方法阳性率高,是一种简便、快速、经济的方法.

  • 4-羟基苯并恶唑-2-酮对HSC - T6细胞增殖的影响

    作者:林军;樊惠

    目的 研究4-羟基苯并恶唑-2-酮(HBOA)对HSC - T6细胞增殖的影响.方法 HSC - T6细胞分别在药物处理组(HBOA浓度分别为0.008,0.04,0.2,1,5 mg/ml)及对照组(单纯培养液)中体外培养32 h.应用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞增殖情况;荧光倒置显微镜下观察对照组和药物处理组HSC - T6细胞的形态学变化.结果 药物处理组HSC - T6细胞的增殖率均低于对照组,浓度为0.008 mg/ml的药物处理组与对照组相比无显著性差别(P>0.05);其他药物处理组分别与对照组比较能显著地抑制细胞增值(P<0.05或P<0.01).HBOA对HSC细胞的增殖抑制率均随着药物作用浓度的升高而逐渐升高;经吖啶橙染色后,在荧光倒置显微镜下观察,均可见细胞数量减少、体积缩小、核破裂、核浓缩等变化,且随着作用浓度的增加变化更加明显.结论 HBOA对HSC - T6细胞具有抑制增殖的功效.

  • 循环肿瘤细胞筛查模型的初步探讨

    作者:马富玲;刘敏;蒋宁;汤洋;郭佳宁;张婷;孙二琳;刘淑芬;张淑敏;王锦;畅继武

    目的建立模拟外周血中筛查肿瘤细胞的方法,作为肿瘤诊疗的辅助手段,协助判断治疗效果以及预后推断。方法抗凝外周血,分离有核细胞,吖啶橙染色,荧光显微镜观察肿瘤细胞。结果因吖啶橙高度异染性,使肿瘤细胞变为彩色,加之肿瘤细胞特有的形态学特点,使得肿瘤细胞易于与正常细胞分辨开来。该方法在肿瘤细胞系、肿瘤组织印片、混有肿瘤细胞的外周血中应用都能使肿瘤细胞得到很好呈现,且特异性和敏感性都理想。在部分肾癌患者中验证,可检测到循环肿瘤细胞。结论吖啶橙染色法可用于血液中肿瘤细胞的染色,特异性、敏感性均较好,可用于临床协助判断治疗效果以及预后判定,为患者制定更合理的治疗方案。

  • 治疗性双质粒HBV DNA疫苗制品中SDS残留量的测定

    作者:吴庆洲;饶桂荣;杨富强;陈光明

    目的 应用吖啶橙分光光度法来检测HBV DNA疫苗双质粒制剂中的十二烷基硫酸(sodium dodecyl sulfate,SDS)残留量.方法 将SDS标准品按不同浓度与吖啶橙混合作用后,经甲苯萃取,再测定A499值,制定出相应的标准曲线.根据待测样品的A499值,求出其SDS浓度.结果 SDS浓度在0~0.0032%的范围内,线性关系良好,相关系数r>0.99,而SDS浓度在0~0.0064%的范围,曲线的相关系数r仅为0.96.因此,应采用在0~0.0032%的范围的标准曲线.待测样品三批制剂的SDS残留量均小于0.002%,表明制剂的SDS残留合格,检测结果稳定可靠.结论 建立了检测HBV DNA疫苗双质粒制剂中SDS残留量的实验方法,为进一步的终产品质量控制及后续的实验研究奠定了基础.

  • 4-乙酰氧基苯并恶唑-2-酮对大鼠肝星状细胞增殖抑制的影响

    作者:樊惠;祁平;刘林;林军

    目的 探讨4-乙酰氧基苯并恶唑-2-酮(AcO-BOA)对体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖的影响.方法 将HSC-T6细胞分别在实验组(AcO-BOA浓度分别为0.008、0.04、0.2、1.0、5.0 mg/ml)及对照组(单纯培养液)中体外培养32 h后,应用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞增殖情况;荧光倒置显微镜下观察两组HSC-T6细胞的形态学变化.结果 实验组HSC-T6细胞的增殖率均低于对照组,浓度为0.008 mg/ml的实验组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);其他浓度的实验组分别与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05).AcO-BOA对HSC-T6细胞的增殖抑制率均随着药物作用浓度的升高而逐渐升高;经吖啶橙染色后,在荧光倒置显微镜下观察,均可见细胞数量减少、体积缩小、核破裂、核浓缩等变化,且随着作用浓度的增加变化更加明显.结论 AcO-BOA对HSC-T6细胞具有抑制增殖的功效.

  • 吖啶橙荧光染色诊断附红细胞体病研究进展及评价

    作者:蔡淑梅;安淑娟

    附红细胞体(eperythrozoon)是寄生于多种动物和人的红细胞表面、血浆及骨髓中的一种单细胞原生物,所引起的人畜共患传染病称之为附红细胞体病(EPE).已有越来越多的报道说明在中国人群中附红细胞体感染率有逐年递增的趋势,如文海蓉等[1]用血涂片镜检的方法检测南昌地区的不同人群764人,结果显示南昌地区人群附红细胞体总感染率为8.25%;和春桐等[2]用涂片染色及压片法在云南贡山地区附红细胞体感染率为68.18%,感染率以农村(77.34%)高于城市(30.29%);於雪琴等[3]对青浦区人附红细胞体感染率结果共调查320人,总感染率为16.25%;张敏娟等[4]对于宁夏居民及门诊患者检测附红细胞体感染率高达41.00%.附红细胞体感染对象为免疫力低下的人群和特殊人群(如猪饲养员、猪肉屠宰和销售人员等)[5].王剑飚等[6]对高原人附红细胞体研究中,附红细胞体的传播有垂直传播.人感染附红细胞体后,并不一定出现明显症状,即有"隐性感染",在免疫力低下或者病原体数量超过一定量的时候才会出现症状,对人类健康造成严重的危害甚至导致死亡.

  • 吖啶橙与长波紫外线灭活血浆中f2噬菌体的形态变化

    作者:王思雄;熊鸿燕;林辉;徐焰;李莉;宋建勇

    目的观察吖啶橙(AO)与长波紫外线(UVA)消毒血浆中f2噬菌体后形态的变化.方法以f2噬菌体为试验病毒,通过AO与UVA单用及联用灭活病毒效果测定筛选二者协同作用的佳条件,在此佳消毒条件下利用透射电镜观察f2噬菌体在消毒前后形态的变化.结果经AO处理后再经UVA照射,能明显减少血浆中f2噬菌体的滴度,两因素的T/E值大于1;经有效灭活病毒的剂量(6 μg/ml AO +4 500 J/m2 UVA)消毒后与消毒前相比,血浆中大多数f2噬菌体由球形变为纺锤状和丝状,且轮廓变得不清晰,电子密度降低.结论 AO与UVA两因素具有协同增效作用;消毒后f2噬菌体的形态明显发生了变化,由球形变为纺锤状和丝状.

  • 单细胞凝胶电泳在环境监测中的应用及其进展

    作者:肖虹;王润华;王勋

    近20年来,评价DNA损伤的方法得到了巨大发展.早在1978年Ryberg和Johanson[1]首次对DNA损伤进行了直接定量.他们在微碱性条件下将单个细胞包埋在琼脂糖薄层中并将它们消解以得到解开的DNA,而后对中和后的细胞用吖啶橙进行荧光染色,并用荧光光度计对荧光率进行测定.

  • 中性红、吖啶橙及PE标记的LAMP-2抗体在B16F10细胞溶酶体检测中的应用与比较

    作者:翟晓峰;施文;李国兴;孙永强;赵文静;钱红燕;李静;陈橼;何向锋

    目的 探讨中性红、吖啶橙及PE标记的LAMP-2抗体在小鼠黑色素瘤B16F10细胞溶酶体检测中的应用与价值.方法 分别用中性红、吖啶橙和PE标记的LAMP-2抗体标记B16F10细胞溶酶体,通过光学和荧光显微镜进行检测.结果 中性红染色法能够在光镜下清晰显示溶酶体在细胞中的分布与数量,并能够反应溶酶体的功能;吖啶橙能够同时将细胞质和溶酶体分别用绿色和红色荧光标示出来,但溶酶体的红色荧光淬灭很快,观测窗口较窄;PE标记的LAMP-2抗体能够将溶酶体在细胞内的位置和数量清晰以红色荧光呈现出来,配合DAPI染色,可以直观显示溶酶体同细胞核的相对位置关系.结论 中性红、吖啶橙和PE标记的LAMP-2抗体在溶酶体检测中具有不同的特点和优势,可根据实验需求灵活选用.

  • 吖啶橙快速染色法检查微丝蚴

    作者:饶忠秀;张富南;叶红

    病原学检查仍然是目前诊断丝虫病的可靠手段。此法在染色过程中,需经溶血-晾干-固定-晾干-染色等步骤,然后再行显微镜检查,操作烦琐,比较费时,而且在操作过程中,由于溶血、固定、染色在不同容器里反复进行,还可能造成微丝蚴脱落,影响检查结果的准确性。为此,我们采用吖啶橙快速染色法检查微丝蚴,取得较好效果。

  • 吖啶橙对草地贪夜蛾sf9细胞和AcMNPV病毒的损伤效应

    作者:邓平建;房师松;李喜梅;倪惠波;王叶元;林健荣

    背景与目的:探索吖啶橙对昆虫细胞的遗传损伤.材料与方法:用不同浓度的吖啶橙处理草地贪夜蛾Sf9细胞、AcMNPV病毒,观察其对细胞生长发育,微核发生率,AcMNPV感染力的影响.结果:sf9细胞经5μg/ml的吖啶橙处理后,细胞分裂生长速度减慢,细胞表面粗糙,微核发生率为10.4‰,10 μg/ml时可引起细胞膜破碎或死亡,微核发生率为22‰,出现三核,多核甚至核裂现象.当AcMNPV经吖啶橙处理后再感染sf9细胞,AcMNPV可在细胞内增殖,形成多角体,并出现一些类似三角形或四角形的异常多角体.结论:用一定剂量的吖啶橙处理草地贪夜蛾sf9细胞和AcMNPV病毒,可对细胞产生损伤和引起AcMNPV发生异常多角体.

  • 食用油烟对小鼠外周血网织红细胞的微核试验

    作者:袁道刚

    为了探讨食用油烟对染色体产生的损伤效应,采用吖啶橙染色法进行一次染毒及低剂量多次染毒微核试验,结果显示,微核率高峰出现在染毒后48小时,并且具有明显的剂量-反应关系,多次染毒比同剂量一次染毒微核率增高.

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