中药心舒宁注射液Beagle犬静脉滴注给药的急性毒性试验/重组人血管内皮抑制素(YH-16)对大鼠的长期毒性试验/注射用丹参素钠的安全性药理研究/注射用雷贝拉唑钠Beagle犬的长期毒性

HPLC法测定抗增生胶囊中丹参素钠的含量

目的:建立抗增生胶囊中丹参素钠的HPLC测定方法.方法:采用Lichrospher C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.9%乙酸(10:90);流速为1.0ml/分;检测波长为280nm.结果:丹参素钠浓度在10～48μg/ml,浓度与峰面积线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为97.7% ,RSD为1.93%,.结论:所用方法简便准确、重现性好,为抗增生胶囊的质量控制提供了方法.

高效液相色谱法测定心可舒胶囊中丹参素钠的含量

目的 建立心可舒胶囊中丹参素钠的含量测定方法 .方法 采用色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18(4.6X250 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-2%冰醋酸溶液(4:96);流速:0.8 ml.min-1;检测波长;280 nm.结果 丹参素钠在0.044～1.76μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率100.92%,RSD为1.07%.结论 本法简便、准确、重现性好,为心可舒胶囊的质量控制提供了依据.

胡黄连苷Ⅱ在脑缺血再灌注损伤中抗氧化作用的研究

目的 研究胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血再灌注损伤后的抗氧化作用和可能的机制。方法 采用线栓法对90只成年健康雄性Wistar大鼠建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型。按随机数字表法分组，治疗组和阳性对照组分别经尾静脉注射胡黄连苷Ⅱ( 10 mg/kg)和丹参素钠(10 mg/kg)，阴性对照组和假手术组给予0.1 mol/L PBS 250μl。Bederson评分法评价动物的神经行为功能，氯化三苯基四氮唑染色检测脑梗死体积，TUNEL法检测神经细胞凋亡，免疫组织化学法检测诱导性一氧化氮合酶(iNOS)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达，酶联免疫吸附试验检测脑组织中iNOS和SOD蛋白的浓度。结果 脑缺血再灌注损伤后，大鼠均表现神经功能障碍、行为异常，缺血侧出现脑梗塞病灶，神经细胞凋亡数量增多，iNOS表达增强，SOD表达减弱。治疗组治疗后，动物神经行为功能损伤程度明显改善[(1.28±0.38)]分、脑梗塞体积缩小[(68.73±4.46)％]、凋亡神经细胞数明显减少[(6.10±1.26)细胞数/视野]、iNOS表达降低(4.67±0.51)、SOD表达增强(0.53±0.14)，与阴性对照组比较差异有统计学意义（t值分别为3.16、2.51、4.15、3.12、3.25，P均＜0.05）。结论 脑缺血再灌注损伤后，胡黄连苷Ⅱ可能通过抑制细胞凋亡和调节iNOS、SOD的表达发挥神经保护作用。

丹参素钠大孔树脂吸附分离过程的近红外在线监测研究

目的:利用近红外光谱技术,以丹参为原料制备目标成分的大孔树脂吸附分离中试过程为例,在线监测其中丹参素钠的含量变化,为后期丹参素大生产过程的在线质量监控提供一种新方法.方法:采用透射模式在线采集大孔树脂吸附分离中试过程中水洗阶段的近红外光谱,同时收集水洗液,用高效液相色谱法测定其中丹参素钠的含量,结合偏小二乘法建立大孔树脂吸附分离阶段丹参素钠的定量校正模型,并应用于中试生产在线过程中.结果:采用二阶卷积求导的光谱预处理方法,选取833～1 165 nm和1 498～1 890 nm波段,建立丹参素钠定量校正模型,相关系数为0.8473,SECV为0.1776,可对中试过程中的洗脱起点和终点进行准确判断,对洗脱过程中高浓度的丹参素钠可以进行准确定量.结论:建立的定量模型具有良好的应用效果,且高效、快速地用于生产过程中丹参素钠的在线检测和质量控制,为后期丹参相关制剂大生产中的在线监控提供一种新方法.

HPLC法研究不同配伍比例下红花对丹参药材中丹参素钠溶出度的影响

目的 研究不同配伍比例下红花对丹参药材中丹参素钠溶出率的影响.方法 采用HPLC-UV法,色谱柱为Luna C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.7%冰醋酸水溶液(6:94,V/V)为流动相,流速0.8 mL·min-1,检测波长280 nm,柱温25℃.结果 丹参素钠在0.1～4.0 μg·mL-1的浓度范围内线性关系良好,其回归方程为Y=691 463X+8 057.9,r=0.999 9,平均加样回收率为92.48%,RSD为2.93%;丹参、红花的比例由1:1升至2:1时,丹参素钠的溶出率基本按正比例增长,但当两者的比例升至3:1时,丹参素钠含量明显低于正比例增长.结论 丹参与红花合用时的配伍比例好控制在1:1～2:1之间,此比例有利于丹参有效成分丹参素钠的溶出.

高效液相法测定丹参口服液中丹参素钠和原儿茶醛的含量

目的：建立高效液相法测定丹参口服液中丹参素钠和原儿茶醛的含量控制方法。方法 HPLC，C18柱，甲醇-1%醋酸（1：7）为流动相；检测波长为280 nm；流速1.0 ml/min。结果样品中丹参素钠和原儿茶醛分离完全，阴性供试品无干扰，丹参素钠在0.4784~2.3920μg（相当于丹参素0.4305μg~2.1528μg）范围内，进样量与峰面积积分值之间线性关系良好；原儿茶醛在0.096μg~0.480μg 范围内，进样量与峰面积积分值之间线性关系良好。平均回收率分别为99.95%、99.21%，RSD为1.93%、2.40%（n＝5）。结论该方法操作简便、可行、重现性好。

非水滴定法测定丹参素钠原料药的含量

目的:建立一种用非水滴定法来测定丹参素钠原料药的含量测定方法.方法:将丹参素钠用冰醋酸-醋酐(1∶1.5)溶解后,以结晶紫为指示液,用高氯酸滴定液(0.1 mol·L-1)滴定,用电位法来判定滴定终点,并用指示剂在电位突跃时的颜色作为滴定终点颜色；结果:非水滴定法用来测定丹参素钠原料含量,与传统高效液相法相比较,二者结果相吻合.结论:该方法操作简便、精密度高,可作为丹参素钠原料药含量测定的方法.

正交设计优选益心通脉合剂提取工艺

目的:优选益心通脉合剂的水提工艺.方法:以丹参素钠、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量和干膏收率的综合评分为指标,通过L9(34)正交试验考察加水量、煎煮时间和煎煮次数对益心通脉合剂水提工艺的影响.采用HPLC测定丹参素钠、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,检测波长分别为280,260 nm.结果:各因素对水提取工艺的影响顺序为提取次数＞加水量＞煎煮时间,佳水提工艺为加15倍量水煎煮3次,每次0.5h;丹参素钠和毛蕊异黄酮葡萄糖苷平均提取量分别为4.928,0.399 5 mg·g-1.结论:优选的提取工艺稳定可行,适用于益心通脉合剂的规范化生产.

复方肝宁颗粒的制备及其对CCl4诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:将复方肝宁经验方改制成复方肝宁颗粒,优化其提取工艺并评价该制剂对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.方法:通过Taguchi设计优化处方中五味子的乙醇提取工艺,正交试验优化其余药材的水提工艺,采用湿法制粒工艺得到复方肝宁颗粒;将60只昆明种小鼠,随机分成6组(正常组,CCl4模型组,联苯双酯阳性组和复方肝宁颗粒高、中、低剂量组),用0.1％ CCl4复制小鼠急性肝损伤模型,测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量.结果:佳醇提工艺为加12.5倍量75％乙醇回流提取2次,每次0.5h;佳水提工艺为加12倍量水提取3次,每次1.5h;五味子醇甲及丹参素钠转移率均＞95％.与正常组比较,模型组小鼠血清中AST和ALT的活性明显升高,肝组织中SOD活性降低,MDA含量升高;与模型组比较,复方肝宁颗粒高、中、低剂量组均能显著降低CCl4急性肝损伤小鼠血清中AST和ALT的活性,降低肝匀浆中MDA的含量,增强SOD的活性.结论:优选的提取工艺稳定可行.复方肝宁颗粒通过下调ALT,AST和MDA水平,上调SOD水平,对CCl4造成的小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用.

丹参素钠-PLGA缓释微球的制备及药剂学性能评价

目的:优选丹参素钠-聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)缓释微球的处方工艺并考察其药剂学性能.方法:采用W/O/O型乳化溶剂挥发法制备丹参素钠-PLGA微球,以载药量、包封率及收率为考察指标,通过单因素试验优选处方工艺,并考察其体外释药性能.采用激光粒度分析仪、扫描电子显微镜和X射线衍射法对该微球进行表征.结果:选取内水相体积300 μL,PLGA质量浓度125 g·L-1,二氯甲烷-丙酮(3∶7),外油相为液体石蜡200 mL,加入正己烷6 mL,0.25％司盘80为乳化剂,1 400 r·min-1搅拌4h.丹参素钠-PLGA微球平均载药量(20.71±1.42)％,平均包封率(63.27±1.70)％,平均收率(99.10±0.83)％,体外累积释放率达98％需要120 h.平均粒径(71.72±1.71) μm,表面圆整光滑,内部含有蜂窝状孔洞.部分药物可能以晶体状态分散于载体材料中.结论:W/O/O型乳化溶剂挥发法成功制备了丹参素钠-PLGA微球,优选的处方工艺稳定合理,可为丹参素钠制剂的开发提供参考.

高效液相色谱法测定宽心口服液中丹参素钠的含量

目的:建立丹参素钠含量测定方法.方法:HPLC法,色谱柱为SpherisorbC18(4.0 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-水-磷酸(1:30:0.5);检测波长为280 nm;柱温室温;流速1.2 mL·min-1.结果:丹参素钠含量在(25～250)μg·mL-1范围内具有良好的线性关系(r=0.9992),平均回收率为99.21%,RSD为0.98%.结论:该法简便、快速、准确、可用于宽心口服液的质量控制.

HPLC法测定止痛化癥丸中丹参素的含量

制订止痛化癥丸质量标准,采用高效液相色谱法,对处方中丹参有效成分丹参素进行含量测定,色谱柱:Hypersil GOLD C18,流动相:甲醇:冰醋酸:二甲基甲酰胺:水(2:1:2:95),检测波长:283nm.线性范围:0.0518-0.5180μg,r=0.9999,丹参素钠平均回收率为98.62%,RSD=0.54%.方法 结果准确,重复性好,可作为该制剂的质量控制指标.

高效液相色谱法测定宫炎片中丹参素钠的含量

目的 建立宫炎片的质量控制标准.方法 采用HPLC法对丹参素钠进行含量测定.Diamonsil TM C18 5 μ(250×4.6mm)色谱柱:甲醇-水-0.5%三氯乙酸(8:90:2)为流动相;流速0.8 ml/min;柱温25℃;检测波长:280 nm.结果 HPLC定量方法分离效果好,线性范围0.202-1.01μg.平均加样回收率98.7%,RSD为2.3%.结论 本法可作为宫炎片的质量控制方法.

HPLC法测定肾衰宁片中丹参素钠的含量

目的 建立以HPLC法检测肾衰宁片中丹参素钠的含量测定.方法 色谱柱:依利特C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-1%磷酸溶液(4:96):流速:0.8ml/min;检测波长:280mm;以丹参素钠为对照品,采用外标法定量.结果 丹参素钠线性范围为0.0737～0.6633 mg(r=0.9999),平均回收率为99.88%,RSD为0.43%.结论 本法简便,结果 准确,重现性好,可用于该药品的质量控制.

HPLC同时测定尿塞通胶囊中丹参素钠、橙皮苷及丹酚酸B含量

目的：建立同时测定尿塞通胶囊中丹参素钠、橙皮苷、丹酚酸B含量的方法。方法采用高效液相色谱法,C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长286 nm。结果丹参素钠、橙皮苷、丹酚酸 B 分别在0.03844～1.922μg、0.0002070528～4.044μg、0.03428～1.714μg范围内线性关系良好,平均回收率为90.9%～107.1%,RSD为2.1%～3.2%。结论所建立的方法简便、准确,可用于尿塞通胶囊的质量控制。

丹参素钠及丹参注射液在大鼠体内的药动学比较

目的:建立HPLC测定大鼠血浆丹参素的浓度,比较丹参素钠及丹参注射液在大鼠体内的药动学特点,评价丹参注射液中其他成分对丹参素药动学的影响.方法:大鼠分别iv给予丹参素钠或丹参注射液(丹参素30 mg·kg~(-1)),颈动脉取血,分离血浆,高氯酸萃取后进行HPLC分析,测定血浆丹参素浓度.DAS2.0软件处理数据.结果:丹参素在0.5～80.0 mg·L~(-1)内线性良好,低检测浓度为0.2 mg·L~(-1).大鼠静脉给予丹参素钠和丹参注射液后的丹参素浓度-时间曲线均符合二室模型,两药t1/2a,AUC,CL等参数有显著性差异.结论:丹参注射液中共存成分可影响丹参素的体内过程,加快其分布和消除.

丹参滴注液中丹参素钠在Beagle犬体内的代动力学研究

目的:探讨丹参滴注液中丹参素钠在Beagle犬体内的药代动力学.方法:健康Beagle犬禁食12 h后,静脉滴注丹参滴注液10 mL·kg-1,血浆样品用乙酸乙酯提取,采用HPLC测定不同时间血药浓度.结果:丹参素钠在0.225 ～ 18.000mg·L-1线性关系良好,低检测限为0.113 mg.L-1,Beagle犬静脉滴注丹参滴注液后的药代动力学参数:tmax为30 min,Cmax为(9.5742±2.3715)mg.L-1,t1/2为(19.23 ±2.97) min,CL为(0.012 7 ±0.003 0)L·min-1·kg-1,AUC0-tn为(474.954±95.483) mg·min· L-1,AUC0-∞为(482.494 ±95.353) mg·min·L-1.结论:所建立血药浓度检测方法简便、稳定、可靠,丹参素钠在Beagle犬体内呈单室模型.

纯镁超声微弧氧化-植酸-丹参素钠复合涂层的细胞生物相容性

目的 为了提高纯镁的耐腐蚀性和细胞的生物相容性,对纯镁超声微弧氧化处理后,以植酸为偶联剂载丹参素钠.方法 选择小鼠成骨细胞MC3T3-E1,实验A组纯镁超声微弧氧化,B组纯镁超声微弧氧化-植酸,C组纯镁微超声弧氧化-植酸-10 μg/ml丹参素钠,通过SEM扫描电镜观察试件表面形貌、检测表面元素,CCK-8检测试件表面细胞增殖和黏附能力,通过激光共聚焦显微镜检测试件表面细胞表达的骨架伸展形态.结果 3组材料表面细胞的黏附、增殖能力顺序为C组＞B组＞A组,各组试件表面细胞的生长和伸展情况C组佳,B组次之,A组低,纯镁超声微弧氧化-植酸-丹参素钠复合涂层对成骨细胞MC3T3-E1黏附、增殖有不同程度的促进作用,并提高了细胞生物活性,对A、B、C三组实验结果进行统计学分析均具有统计学意义.结论 纯镁超声微弧氧化涂层通过植酸偶联载10 μg/ml丹参素钠涂层的细胞相容性佳.

丹参素钠对慢性不可预知温和应激模型小鼠的抗抑郁作用

目的:探讨丹参素钠对慢性不可预知温和应激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)模型小鼠的抗抑郁作用.方法:采用慢性不可预知温和应激方法建立小鼠抑郁症模型,造模成功后,连续灌胃(ig)给予丹参素钠(10,20和40 mg· kg-1)或氟西汀(10 mg·kg-1)或溶剂3周.采用旷场实验、糖水偏爱实验、强迫游泳实验和悬尾实验检测小鼠抑郁样行为的变化;ELISA法检测小鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)的浓度;HPLC法测定小鼠海马组织5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)的含量.结果:抑郁样行为学评测结果显示,与正常对照组相比,CUMS模型组小鼠水平运动和垂直运动得分降低(P ＜0.001)、糖水偏爱度显著下降(P＜0.001)、强迫游泳不动时间和悬尾不动时间明显延长(P＜0.001),而丹参素钠(20和40 mg· kg-)给药3周明显改善CUMS小鼠上述抑郁样行为;ELISA检测结果显示,丹参素钠可显著性减少ACTH和CORT在CUMS小鼠血浆中的含量;HPLC结果显示,丹参素钠可明显增加CUMS小鼠海马内5-HT,NE和DA的含量;Western Blot结果显示,丹参素钠可明显增加CUMS小鼠海马p-CREB和BDNF的蛋白表达.结论:丹参素钠能明显改善CUMS所致的小鼠抑郁样行为,且该作用可能与其抑制下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能亢进和增加海马内单胺类神经递质的含量及激活CREB/BDNF通路有关.