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河豚毒素时间分辨荧光免疫分析法的初步研究
河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)是一种存在于河豚鱼等生物体内的稳定的麻痹毒素,中毒时造成及呼吸神经中枢麻痹,引起呼吸停止,迅速死亡~([1]).为了控制TTX中毒的发生,应对河豚鱼养殖、销售进行严格管理,并进行TTX的检测.
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亲水液相色谱-三重四极杆质谱检测河豚鱼肝中的河豚毒素
目的:建立河豚鱼肝中河豚毒素(TTX)的亲水液相色谱-三重四极杆质谱联用(LC-MS-MS)定量检测方法.方法:样品经匀浆,超声,乙腈沉淀离心后,取上清液进样测定.极性聚酰胺键合硅胶柱InnovationTMHP Amide (100 mm×3.0mm,5μm),流动相乙腈-0.3％甲酸(体积比为70∶30),流速为0.5 mL· min-1；柱温30℃,进样量5 μL.选择正离子多反应监测(MRM)模式,[M+H]*,m/z 320.1162.1进行定量分析.结果:TTX的线性范围为0.031 3 ～2.00 mg·L-1(r =0.999 9)；检测限(S/N =3)为3.0 pg,加样回收率在96.3％ ～ 103.0％.结论:该法灵敏度高,重复性好,简便快速,适用于河豚毒素的测定.
关键词： 亲水液相色谱-三重四极杆质谱联用 河豚毒素(TTX) 河豚鱼 肝脏 -
河豚毒素在小鼠体内分布及代谢动力学
河豚毒素(TTX)是1个重要的海洋毒素,具有相当广泛的药理作用.药理学研究成果表明,TTX在阻滞可兴奋细胞膜上的钠离子通道、通透性方面有独特的功能,可强烈抑制神经兴奋传导.TTX中毒后麻痹症状出现在食后20 min～3 h,致死时间短为1.5 h,长约8 h [1～3].由于TTX的LD50约为10 μg·kg-1,且组织液的干扰作用,所以生物体内TTX含量测定、分布及药物动力学研究较困难.1985年颜松民等[4]用毒效法进行了小鼠TTX药物动力学研究,但详细的作用情况及分布特征尚不清楚.本文首次用同位素示踪法研究了小鼠静脉注射125I-TTX的代谢动力学,并对其在脏器组织中的分布特征进行了探讨.
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河豚毒素与局麻药联合应用对家兔齿髓刺激所致疼痛的对抗作用
河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)是一种毒性极高的非蛋白神经毒素,具有很强的局麻作用,其效力比目前常用局麻药强万倍以上,持续时间长[1,2].将TTX与常用局麻药联合应用于齿髓镇痛,国内外文献尚未报道.我们设想将极微量TTX与常用局麻药利多卡因、丁卡因联合给药,通过齿髓刺激试验,测定其局部镇痛作用,观察是否具有协同或增强局麻效果,以探讨TTX作为协同局麻药应用于临床的可能.
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河豚毒素的生物合成
介绍国内外河豚毒素研究的新动态一利用海洋细菌进行河豚毒素生物合成的研究,包括河豚毒素的来源、产河豚毒素的菌种及性质、培养条件及影响因素、代谢合成机理及未来的研究展望.
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LC-MS法测定大鼠血浆中河豚毒素的含量
目的:建立大鼠腹腔注射给药后,血浆中河豚毒素(TTX)的高效液相色谱-质谱联用(LC-MS)定量检测方法.方法:血浆样品经沉淀剂[(乙腈-含0.5%醋酸的甲醇液(3∶1)]处理后漩涡离心,取上清液冻干、复溶,进样测定.色谱柱为Agilent Zorbax SB C18柱(150 mm×4.6mm,5μm);流动相为10 mmol·L-1七氟丁酸-10 mmol·L-1甲酸(1∶1,氨水调至pH4.0);流速1.0 mL·min-1;柱温为30℃;进样量10μL.以选择离子监测(SIM)方式进行定量分析,用于监测的离子为[M+H]+m/z 320.1.结果:TTX的线性范围为1.76～42.2 ng·mL-1,r=0.9996;检测限为1.76 ng·mL-1,即17.6 Pg;加样回收率(n=5)在99.9%～107.6%之间;大鼠腹腔给药后30 min达到血药浓度峰值.结论:本法专属性强,灵敏度高,重现性好,适用于血浆样品中TTX的定检测研究.
