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两种减肥品对大鼠的减肥作用试验
目的了解市售2种减肥品的功效,观察减肥品的减肥效果.方法建立营养性肥胖大鼠模型:将80只平均体重为(39.0±2.93)g的断乳大鼠随机分为7个试验组和1个对照组,试验组用特制饲料喂养45 d,供饲量为第1、2周每天每只鼠13 g,以后每周增加2 g至第6周止.对照组普通饲料喂养.减肥试验:将7组平均体重为(290.98±15.32)g的肥胖型大鼠分为6个试验组和1个对照组.两种受试物(减肥茶和水解明胶粉)各设3个剂量组:0.4、0.8、1.6g/kg,相等于人体推荐量的4、8、16倍.灌胃量为每100g体重1ml.每日1次连续灌28 d.每周称体重两次.试验结束时称体重和体脂.并计数体脂/体重比.
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慢病毒-基质细胞衍生因子-1α-绿色荧光蛋白载体转染大鼠心肌成纤维细胞
目的 探讨慢病毒-基质细胞衍生因子-1α-绿色荧光蛋白(LV-SDF-1 α-GFP)对心肌成纤维细胞影响,佳感染条件及目的蛋白表达和分泌特点.方法 差速贴壁法分离培养乳大鼠心肌成纤维细胞,观察和免疫荧光鉴定.不同滴度及条件的LV-SDF-1 α-GFP转染心肌成纤维细胞,观察荧光表达,探索佳转染条件.LV-SDF-1α-GFP目的基因病毒以及阴性对照CON145病毒的转染心肌成纤维细胞,绘制生长曲线,探索转染对心肌成纤维细胞的增殖有无明显影响.利用佳转染剂量组转染心肌成纤维细胞,斑点印迹法(Dot blotting)检测SDF-1 α目的蛋白分泌.计量资料进行统计学分析.结果 心肌成纤维细胞具很高活性,传至4代纯度高,折光度好,无自发性搏动.LV-SDF-1 α-GFP佳转染感染复数(MOI)值为10,添加感染增强液,聚凝胺组感染效果好,效率达80％.LV-SDF-1 α-GFP组以及阴性对照CON145组对心肌成纤维细胞毒性作用小,细胞形态无明显变化,与非转染组生长曲线相似,差异无统计学意义(P＞0.05).转染LV-SDF-1 α-GFP的心肌成纤维细胞培养至第4天SDF-1α蛋白分泌量达高值,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 LV-SDF-1 α-GFP载体对心肌成纤维细胞具很高的转染效率,细胞毒性小,并能够分泌SDF-1α目的蛋白.
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乳鼠心肌细胞酶消化培养和贴块培养法的比较
目的探索经济、简单易行的心肌细胞培养方法.方法选用新生乳大鼠心肌细胞进行0.25%胰酶分离培养和贴块培养两种培养方法.结果用0.25%胰酶消化培养可获得大量的单细胞,但是酶对细胞的损伤比较大,酶消化所受的影响因素比较多,此过程获取单细胞所需的时间比较长;贴块培养法简便易行,得到的细胞结构完整、存活率高,且经济实惠、适合长期研究且需细胞量不多的实验.结论酶分离培养和贴块培养各有优劣势,应根据不同的实验目的选用不同的培养方法.
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汉坦病毒体外感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞
目的 证实乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞是汉坦病毒属(HV)汉滩病毒(HTNV)和汉城病毒(SEOV)感染的靶细胞,观察病毒感染星形胶质细胞后的动态变化.方法 建立乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞的体外培养体系,用HTNV 76-118和SEOV L99分别感染乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞,免疫荧光染色、Western印迹和RT-PCR检测病毒感染细胞后病毒NP和S基因片段的变化.结果 成功建立了乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞的体外培养体系,并通过免疫荧光染色、Western印迹和RT-PCR证实HTNV 76-118和SEOV L99可以感染离体培养的乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞,随感染时间推移,病毒感染细胞数和病毒量显著增加.结论 乳大鼠大脑皮层星形胶质细胞可作为HTNV和SEOV感染的靶细胞.这为研究肾综合征出血热发病机制提供了实验平台.
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乳鼠心肌细胞缺血预适应模型的建立及电镜下超微结构的改变
目的探讨培养乳鼠心肌细胞建立缺血预适应(IPC)模型的方法及对细胞超微结构的影响.方法出生1～2 d的SD大鼠用改良法分离培养心肌细胞,检测模拟缺血各时间点乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞死亡率,据此建立预适应模型并与单纯缺血/再灌注组比较其LDH、细胞死亡率和超微结构的改变.结果乳鼠心肌细胞在模拟缺血4 h以后LDH、细胞死亡率与对照组相比有明显差异(P＜0.001); 以模拟缺血90 min, 再灌60 min诱导的IPC模型与单纯缺血/再灌注(I/R)组相比明显降低LDH漏出率、细胞死亡率(P＜0.005, P＜0.001), I/R组心肌细胞超微结构破坏严重; IPC组心肌细胞超微结构基本完整清晰.结论乳鼠心肌细胞对缺血有较强耐受力,模拟缺血4 h以上才有明显损伤.模拟缺血90 min, 再灌60 min能成功建立IPC模型,且维持超微结构完整性.
