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炎症胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶基因转录的机制
目的:通过瞬时转染p38MAPK途径中上游激酶,组成激活型MAPK激酶3和MAPK激酶6,进一步了解p38MAPK级联传导信号系统调节诱导型一氧化氮合酶基因在胶质细胞中的转录激活机制.方法:实验于2003-01/2004-08在美国南卡洲医科大学神经科学研究室和南通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室进行.采用MAPK激酶3和MAPK激酶6表达质粒与接有荧光素酶的大鼠诱导型一氧化氮合酶启动基因质粒;cAMP反应元件和核因子-κB联合转染C6胶质细胞株.测定荧光素酶活性,观察诱导型一氧化氮合酶基因激活表达机制.结果:①MKK3b/MKK6b能引起诱导型一氧化氮合酶启动基因质粒的激活,并都能够被p38MAPK抑制剂SB203580所抑制.②MKK可以诱导cAMP反应元件介导的和核因子-κB依赖的转录活性.③显性抑制型CRE结合蛋白和CCAAT/增强子结合蛋白都是p38MAPK的靶向作用目标,转染这两种转录因子产生相反的影响:显性抑制型CRE结合蛋白增强了诱导型一氧化氮合酶启动基因质粒的表达,而显性抑制型CCAAT/增强子结合蛋白则引起抑制作用,对cAMP反应元件也具有相同的影响.④此外,激活型MAPK激酶3和MAPK激酶6诱导诱导型一氧化氮合酶启动子的激活能够被野生型活化转录因子增强.然而磷酸化缺陷型的野生型活化转录因子则起抑制作用.结论:转录因子的靶向作用特点,对于炎症反应中NO的过量产生具有选择干扰性,在临床上具有实用价值.
关键词： 细胞外信号调节MAP激酶类 NF-κB 一氧化氮合酶 神经胶质/细胞学 转染 -
秀丽隐杆线虫神经胶质细胞对神经系统发育和功能的影响
秀丽隐杆线虫(简称线虫)神经胶质细胞(简称胶质细胞)分为三种类型:鞘状胶质细胞、槽状胶质细胞和谷氨酸受体胶质细胞,主要分布在化学感受器、头部感受器、外唇感受器和内唇感受器这四种感觉器官中.在神经系统发育过程中,胶质细胞在线虫神经元的树突延伸和轴突的导向延伸中发挥关键作用,还参与了突触生成,并且通过形成感受器通道的方式来维持感觉神经末梢的正常形态和功能.此外,线虫胶质细胞还可作为神经元的起源.在神经系统成熟过程中,线虫胶质细胞既可通过维持神经元形态来间接控制感觉神经元的功能,也可直接控制感觉神经元的功能.有些胶质细胞可以感受特定的外界刺激,用这些信息来调节与之相伴神经元的活动.线虫胶质细胞不仅通过神经元来影响神经系统,其自身也可以感受机械刺激.本文总结了目前已知线虫胶质细胞对神经发育和功能影响的研究进展.
关键词： 新小杆线虫 漂亮 神经胶质/细胞学 神经系统/生长和发育 综述 -
缝隙连接与脑功能研究进展
缝隙连接是一些细胞间连接通道的聚合物,它能够让细胞间交流一些物质,如离子、小分子,并实现交换.目前,在哺乳动物组织中已发现的缝隙连接蛋白家族大约有20个成员.其中有一半表达在神经系统中,如星型胶质细胞、少突胶质细胞可以表达某些特定的缝隙连接蛋白.已有大量的研究表明:缝隙连接对于胶质细胞间、星型胶质细胞和神经元之间,以及神经元之间的细胞间交流是非常重要的,并与维持正常脑功能密切相关.文中以胶质细胞间和神经元之间,以及胶质细胞和神经元之间的缝隙连接与脑功能的研究进展,作为主题进行论述.
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氰戊菊酯对C6胶质细胞增殖的影响
目的 研究氰戊菊酯对C6胶质细胞增殖的影响.方法 以3.16、10、31.6和100 mg/L的氰戊菊酯对C6胶质细胞进行染毒,通过四噻氮唑盐(MTT)比色法观察其在不同时间点(24、48、72 h)对细胞增殖的影响;利用BrdU掺入法反映其对细胞DNA合成的影响;使用流式细胞术检测其对细胞周期的作用.结果 氰戊菊酯对C6胶质细胞增殖有明显抑制作用,且呈现剂量、时间依赖性;可抑制C6胶质细胞DNA合成;可阻滞C6胶质细胞从G0/G1期进入S期.结论 氰戊菊酯能够抑制C6胶质细胞增殖,其抑制作用可能是使细胞周期阻滞于G0/G1期,减少细胞DNA合成.
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米诺环素对活化小胶质细胞的细胞毒性因子表达的影响
[目的]探讨米诺环素抑制小胶质细胞活化过程中细胞毒性因子表达的变化及意义.[方法]建立小胶质细胞体外培养模型,分为对照组、脂多糖(LPS)活化组和米诺环素干预组.在各时间点取细胞培养液,行ELISA方法检测TNF-α和IL-1β蛋白含量,以及Griess Reagent方法检测NO含量.[结果]①培养的小胶质细胞为圆形、折光性强的小细胞.经LPS活化后,胞体相对增大,呈巨噬细胞样,伴有多个细长的突起.②小胶质细胞产生的细胞毒性因子在对照组中也有少量存在.活化组细胞经LPS激活后TNF-α水平升高早,其次为IL-1β,而NO晚.干预组的TNF-α在各时间点均可见其含量较活化组显著下降;之后出现IL-1β的显著下降,而NO晚出现.[结论]米诺环素可以抑制活化小胶质细胞的细胞毒性因子的产生.
关键词： 神经胶质/细胞学 二甲胺四环素/药理学 细胞毒性 免疫 -
胶质瘤细胞株U251,SHG-44,BT325中β-catenin的表达及其成瘤性分析
目的:探讨β-catenin在人神经胶质细胞株(HA)、人神经胶质瘤细胞株U251,SHG-44,BT325中的表达及其与恶性程度的相关性.方法:运用实时荧光定量PCR检测β-eatenin在HA,U251,SHG-44,BT325细胞内的表达水平,并通过免疫荧光辅助分析β-catenin的表达及细胞内定位情况.建立裸鼠胶质瘤模型,观察肿瘤的生长.结果:β-catenin基因在人神经胶质瘤U251,SHG-44,BT325细胞株内的表达均高于HA细胞株,其中U251细胞表达高,SHG-44细胞次之,而BT325细胞表达低.在HA细胞株中,β-catenin蛋白主要在细胞膜表达,而在人神经胶质瘤U251,SHG-44,BT325细胞株中β-catenin蛋白表达出现了明显的胞质和胞核的易位表达.通过对荷瘤鼠模型的观察发现U251细胞所造肿瘤生长速度快,SHG-44细胞次之,而BT325细胞的肿瘤生长速度慢.结论:β-catenin基因表达与人神经胶质瘤U251,SHG-44,BT325细胞株恶性程度呈正相关.U251细胞表达β-catenin高,更适合神经胶质细胞瘤Wnt/β-catenin信号传导通路相关研究.
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Nogo-66受体在成年大鼠脊髓白质内胶质细胞的分布
目的: 研究Nogo-66受体(NgR)在成年大鼠脊髓白质的分布情况. 方法: 选用正常雄性SD大鼠脊髓切片,进行免疫组织化学、免疫荧光双标和包埋前免疫电镜染色,观察NgR免疫阳性物质在脊髓白质的定位情况. 结果: 在光镜水平可观察到NgR阳性的点状结构主要分布在脊髓白质胶质细胞胞体周边和突起上,且与细胞膜关系密切;在电镜水平可观察到NgR阳性的胶体金颗粒分布在星形胶质细胞之间,寡突胶质细胞之间以及星形胶质细胞和寡突胶质细胞之间的缝隙连接上. 结论: 本研究提供了NgR在正常成年大鼠脊髓白质胶质细胞分布并且在缝隙连接定位的形态学证据,提示NgR可能在胶质细胞间的通讯中发挥一定的调节功能.
