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高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定蔬菜及食品中的1-蔗果三糖和蔗果四糖
目的 应用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器联用(HPAEC-PAD)技术,建立蔬菜、食品中低聚果糖(蔗果三糖和蔗果四糖)检测方法.方法 以NaOH和乙酸钠为淋洗液梯度淋洗,在CarboPae PA1色谱柱上阴离子交换分离了蔗果三糖和蔗果四糖,用脉冲安培检测器(金电极)进行了检测.结果 二者的线性范围分别为1.22～15.20μg/g和1.64～18.30μg/g,检出限分别为0.085μg/g和0.089μg/g.对浓度为6.08和7.32μg/g的蔗果三糖和蔗果四糖混合标准连续进样,其相对标准偏差(RSD)分别为2.80%和1.28%(n=6).应用本方法分析了菊苣、朝鲜蓟和通力爽口服液等蔬菜和食品中蔗果三糖和蔗果四糖的含量.蔗果三糖和蔗果四糖含量高的蔬菜组织为菊苣根,分别为6.61g/100g干重和6.51g/100g干重.低聚果糖粉中蔗果三糖和蔗果四糖含量高,分别为34.13g/100g和32.12g/100g.样品加标回收率蔗果三糖和蔗果四糖分别为93.97%和97.14%.结论 该方法简单、方便、灵敏度高,适于蔬菜及食品中蔗果三糖和蔗果四糖的测定.
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漏芦多糖的提取、单糖组分分析及含量测定
目的:提取漏芦多糖,分析其单糖组分并测定其质量分数,为以后漏芦多糖研究提供参考.方法:水提醇沉法提取粗多糖,Sevag法除蛋白,高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测(HPAEC-PAD)法测定其单糖组成,苯酚-硫酸法测定多糖质量分数.结果:漏芦多糖的单糖组成为葡萄糖、阿拉伯糖和果糖,其摩尔比为1:1.61:2.21.以单糖混合物为对照品测得漏芦多糖中总糖的质量分数为95.78％.结论:HPAEC-PAD法具有样品不用衍生、灵敏度高、精密度好等优点,适合多糖类样品中单糖的分析;苯酚-硫酸法实验操作简便,准确可靠,可用于多糖含量测定.
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高效液相色谱-电化学检测法在药物分析中的应用
基于电化学检测法具有无需衍生、高灵敏度、高选择性以及成本低的特点,高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ED)已经成为药物分析的重要工具.从HPLC-ED技术开始使用40年以来,已有大量相关文章和综述发表.本文将对应用在HPLC中的电化学检测器和检测方法进行回顾,重点介绍HPLC-ED技术在药物分析中的新研究进展,并讨论这种技术的未来发展趋势.
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水源水中无机硫化物的离子色谱-脉冲安培测定法
目的 建立水源水中无机硫化物的离子色谱-脉冲安培测定法.方法 水样经0.22μm尼龙膜过滤后,进入配有IonPac AS7易极化阴离子专用分析柱和脉冲安培检测器的离子色谱系统,以100 mmol/L NaOH-250 mmol/L NaOAc-0.5%(V/V)乙二胺为淋洗液进行等度淋洗后,硫离子与其他阴离子分离后,经电位脉冲安培检测器进行检测.结果 在5～1 000μg/L线性范围内,硫化物的线性方程为r=0.325 4x-1.305 3,r=0.999 8,检测限为0.5μg/L,平均回收率为90.8%～96.7%,RSD为1.32%.结论 该方法具有操作简单,选择性好,灵敏度高,重复性好等特点,适用于水中无机硫化物的检测.
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高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定多花黄精多糖的单糖组成
目的 建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)测定多花黄精多糖的单糖组成.方法 多花黄精多糖经提取后,用硫酸水解,用CarboPac PA1色谱柱(250 mm×4 mm,10.0 μm)进行分离,采用梯度洗脱,HPAEC-PAD测定多花黄精多糖中单糖的组成.结果 测得各单糖在1～100mg/L线性关系良好(r＞0.999),低检出限为0.015～0.025 mg/L,RSD为1.35％～2.80％,加样回收率为88.36％～111.3％.结果表明不同产地的多花黄精多糖均由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖组成.结论 本实验所建立的方法分离效果好,灵敏度高,可用于多花黄精多糖的单糖组成和测定的分析研究.
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高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗的多糖含量
目的 采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(high performance anion exchange chromatography withpulsed amperometric detector,HPAEC-PAD)测定b型流感嗜血杆菌(haemophilus influenzae type b,Hib)结合疫苗的多聚磷酸核糖基核糖醇(polyribosylribitol phosphate,PRP)多糖含量.方法 用终浓度为0.3N的NaOH溶液将待测疫苗中的PRP多糖或分离得到的游离多糖在室温下振荡水解(16±8)h,采用CarboPac@PA-10阴离子交换柱在NaOH/醋酸钠溶液梯度洗脱条件下分离水解产物,用脉冲安培检测器检测信号,根据样品的峰面积计算得到待测疫苗中的PRP多糖含量及游离多糖含量,样品均重复检测2次,计算2次检测结果的相对标准偏差(RSD).同时采用《中国药典》三部(2010版)附录ⅧJ中的地衣酚法测定相同批次样品的PRP多糖含量及游离多糖含量,并对两种方法得到的结果进行比较.结果 相同样品重复检测2次,结果间的差异非常小,RSD不超过4.6％.HPAEC-PAD法测得的总PRP结果与地衣酚法测得的结果接近,前者测得的S01～S03样品的PRP浓度值分别为后者的105％、104％和106％; HPAEC-PAD法测得的游离PRP结果与地衣酚法测得的结果差别较大,前者测得的S01～S03样品的游离PRP浓度值分别为后者的126％、109％和115％.结论 HPAEC-PAD法测定Hib结合疫苗的PRP多糖含量灵敏度高,重复性和分离效果好,样品不需要衍生处理,可同时测定多组分,可作为传统地衣酚法的替代方法用于Hib结合疫苗中多糖含量的测定.
关键词： 阴离子交换色谱 脉冲安培检测 b型流感嗜血杆菌结合疫苗 多糖 -
冻干人凝血酶中三羟甲基氨基甲烷含量离子色谱-脉冲安培测定法的建立及验证
目的 建立检测冻干人凝血酶(Thrombin,TB)中三羟甲基氨基甲烷(Tris)含量的离子色谱-脉冲安培法,并进行方法验证.方法 以戴安Ionpac CS16为阳离子交换色谱柱,40 mmol/L甲基磺酸(Methylsulfonic acid,MAS)溶液为淋洗液,流速为1.0 mL/min;采用500 mmol/L氢氧化钠溶液进行柱后衍生,流速:0.3 mL/min;柱温:30℃;进样体积:25 μL;经脉冲安培检测器进行检测.同时对该方法进行专属性、精密度、准确性验证,并确定方法的线性范围、检测限和定量限.结果 该方法可特异性检测Tris含量,供试品中甘氨酸、枸橼酸离子、钠离子等物质对Tris的测定无干扰;精密度RSD为0.18％;加标样品的平均回收率为98.1％,RSD≤5％;Tris对照品在0.01～0.08 mmol/L的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=1 755.3X+1.838,R2=0.999 8;检测限和定量限分别为0.004和0.012 mg/L.结论 成功建立了冻干TB中Tris含量的离子色谱-脉冲安培检测法,且方法具有良好的特异性、精密度及准确性.
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积分安培检测-离子排斥色谱法测定食品中亚硫酸盐的研究
目的:建立积分安培检测-离子排斥色谱法测定食品中亚硫酸盐的方法.方法:采用ICE-ASl型离子排斥分离柱(9×250 nm),10 mmol/L H2SO4淋洗液,样品经10 mmol甘露醇+20 mmol Na2HPO4缓冲液浸泡提取.过滤后进样积分安培检测分析.结果:方法线性好,相关系数r=0.9999,相对标准偏差RSD<3.5%,样品加标回收率在87.88%～101.79%,方法检出限为0.85 mg/kg.结论:该方法样品前处理简单,测定结果准确,重现性好,对分析测定食品中亚硫酸盐具有实用意义.
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牛奶中乳糖和乳果糖离子色谱电化学修饰法测定
目的:用离子色谱电化学修饰方法测定牛奶中的乳糖和乳果糖,为建立这种淋洗液价廉,无毒,测定方法简单,灵敏度大大提高的分析测试方法提供依据.方法:本实验采用离子色谱分离、碳纳米管修饰电极、脉冲安培检测,Dionex CarboPae PA1(2 mm×250 mm)分离柱+Dionex CarboPac PA1(2 mm×50 mm)保护柱,以5 mmol/L氢氧化钠+1 mmol/L乙酸钠为淋洗液测定牛奶中的乳糖和乳果糖.结果:该方法具有良好的重现性、线性关系和较低的检测限.修饰后,乳糖和乳果糖的检测限分别是:0.0007、0.0006 mg/L;样品测定的回收率分别为95%～105%.结论:采用离子色谱电化学修饰方法测定牛奶中的乳糖和乳果糖,测试结果表明,该方法的准确度、精密度均较好,满足分析测试要求,采用碳纳米管修饰电极测定,使峰高和峰面积都显著提高,从而大大地提高了检测的灵敏度,是一种简便快速、分离效果良好的分析方法.
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离子交换色谱法测定保健食品中低聚果糖的含量
目的:功能性食品不仅具有食品的基本属性,还具有调节人体生理活性的功能.低聚果糖作为一种功能性食品就具有这类功能.因此,能够对功能性食品中营养成分的有效测定并以此来合理的搭配饮食变得越来越重要了.本文描述了采用离子色谱法测定功能性食品中的低聚果糖的方法.方法:本文以中性糖类物质在强碱性溶液中发生解离为基础,在阴离子交换柱上进行分离,并与脉冲安培检测器联用,建立了功能性食品中低聚果糖含量的灵敏的自动分析方法.使用单因素优化法对与反应有关的实验参数进行了优化.结果:在佳实验条件下,方法的线性响应范围为0.05～45 μg/ml,两种物质的检出限分别为50、60 ng,对标准溶液进行11次平行测定得本方法的精密度小于3.1%,为了验证该方法的准确度,进行了回收率实验,大豆低聚糖样品中的回收率在95.8%～100.8%范围内.结论:方法灵敏,快速,简单,需要样品量少.
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高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗多糖及游离多糖的含量
目的:建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)测定b型流感嗜血杆菌(Hib)结合疫苗的多糖及游离多糖含量.方法:将疫苗中的有效抗原成分—Hib多糖,其结构为多聚磷酸核糖基核糖醇(polyribosylribitol phosphate,PRP),用6 mol·L-1盐酸进行水解,得到其核糖醇(ribitol)单体;使用CarboPac(R) MA1阴离子交换柱(4 mm×250 mm),以580 mmol·L-1氢氧化钠溶液为流动相,流速为0.4 mL· min-1,柱温35℃,进样体积100 μL,脉冲安培检测器收集信号,核糖醇的含量以峰面积计算得到,再根据核糖醇占PRP干重的质量分数(41.3％),计算出Hib结合疫苗中PRP及游离多糖(Free PRP)的含量,并评估该方法的重复性和再现性.结果:核糖醇质量浓度在0.075～1.05μg·mL-1范围内,与峰面积响应值呈良好的线性关系(r=-0.999 9),低检测限为2.5 ng·mL-1;标准品供试溶液连续进样6次,峰面积及保留时间的RSD均小于5％;核糖醇加标回收率在80％～120％之间;对来自5个企业的4个不同批次的Hib结合疫苗的PRP及Free PRP含量进行测定,结果均符合规定.结论:本方法在测定Hib结合疫苗的PRP及Free PRP含量时,样品前处理简单,分离效果好,且灵敏度高,结果稳定,可靠,对控制该疫苗的质量具有重要意义.
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高效阴离子交换色谱法测定那屈肝素钙中2,5-脱水甘露醇和葡萄糖胺
目的:建立高效阴离子交换色谱法测定那屈肝素钙中2,5-脱水甘露醇和葡萄糖胺.方法:样品在3 mol·L-1三氟乙酸110℃下水解8h,旋蒸除酸后用Carbopac PA20 (150 mm ×3 mm)阴离子交换柱在流速0.4 mL·min-1和30℃下,以15mmol·L-1氢氧化钠洗脱10 min后用15 mmol·L-1氢氧化钠-150 mmol·L-1醋酸钠溶液洗脱10 min,脉冲安培检测器检测.结果:2,5-脱水甘露醇和葡萄糖胺线性范围分别为1～50 μg· mL-1(r=0.9997)和4.2～124.6 μg· mL-1(r=0.9994),检测限分别为163.0 ng· mL-1和327.5 ng·mL-1,回收率(n=6)分别为102.4％和99.5％,RSD均小于3.0％.结论:该法简单、灵敏、可靠,可用于那屈肝素钙的质量控制.
