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耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌OXA和NDM-1耐药基因的研究
目的 检测江苏盛泽医院耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌的OXA和NDM-1耐药基因,分析耐碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制.方法 采用改良Hodge试验检测30株耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌产酶情况;用PCR的方法检测OXA-23、OXA-24、VIM、IMP和NDM-1碳青霉烯酶耐药基因.结果 30株分离菌中25株菌改良Hodge试验阳性,22株携带OXA-23型碳青霉烯酶耐药基因,未扩增出NDM-1碳青霉烯酶耐药基因.结论 本院耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌的耐药机制主要是携带OXA-23型碳青霉烯酶基因.
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泛耐型鲍曼不动杆菌耐药机制的探讨
目的 了解泛耐型鲍曼不动杆菌(pan-drug resistant Adnetobacter baumannii,PDRAB)的耐药性和产耐药酶的情况,以及介导碳青霉烯酶的基因型及外膜蛋白的改变.方法 收集临床分离的PDRAB 68株,用三维试验测定菌株产耐药酶的情况;用琼脂稀释法测定低抑菌浓度(MIC);用PCR法检测OXA-23基因和IMP-1基因;用SDS-PAGE检测外膜蛋白.结果 以头孢三嗪(CRO)为底物,68株PDRAB中单产AmpC酶4株,同时产AmpC酶和ESBL酶1株,产可水解头孢三嗪但不能被克拉维酸(CA)和氯唑西林(CLO)抑制的酶的17株,不分解CRO的46株;以亚胺培南(IMP)为底物,所有PDRAB均产可水解亚胺培南的酶,但不能被EDTA、CA和CLO抑制.MIC结果示PDRAB株对包括IMP在内的常用抗菌药物均高度耐药.68株PDRAB均扩增出OXA-23基因,而IMP-1基因均为阴性.与鲍曼不动杆菌敏感株(S株)相比,PDRAB株和仅亚胺培南敏感株(M株)缺失了分子量约27 000处的蛋白质条带,但在31 000处出现一条新的蛋白质条带;与M株相比,有12株PDRAB在约33 000处出现蛋白质条带的缺失.结论我院分离的68株PDRAB携带OXA-23型碳青霉烯酶基因,大多数存在外膜蛋白的缺失或改变,这些改变可能共同介导了细菌在多重耐药前题下继发的对碳青霉烯类药物的耐药.
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OXA-23基因和外膜蛋白介导鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的机制分析
目的 分析碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的耐药性、耐药基因及外膜蛋白的表达情况.方法 收集徐州医学院附属医院CRAB 64株,药敏试验采用琼脂稀释法,改良Hodge试验和酶粗提取液水解底物法检测碳青霉烯酶,EDTA-Na2双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶,PCR法检测主要的碳青霉烯酶基因,PCR产物进行DNA测序分析,肠杆菌科基因间重复一致性序列PCR (ERIC-PCR)进行同源性分析,接合试验探讨耐药基因的可传递性,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析菌株外膜蛋白的表达.结果 64株CRAB仅对多黏菌素B保持良好的敏感性(100％);改良Hodge试验结果为阴性,酶粗提液水解底物法结果显示弱阳性;EDTA-Na2双纸片协同试验呈阴性;与敏感菌株相比,CRAB全部扩增出OXA-23基因;同源性分析将其分为4型,Ⅰ型为主要流行株(40株),其中30株来源于重症监护病房(ICU);接合试验未获成功;外膜蛋白分析发现,CRAB主要改变为缺失相对分子质量(Mr) 27 000的蛋白质条带和出现Mr 30 000新蛋白质条带.结论 本院ICU病区存在CRAB的克隆流行,其耐药机制可能与OXA-23基因的表达及外膜蛋白的缺失与新增有关.
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耐亚胺培南鲍曼不动杆菌OXA-23基因检测及分析
目的 了解临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌OXA-23基因的存在状况.方法 收集我院临床分离的非重复耐亚胺培南鲍曼不动杆菌16株,采用纸片扩散法确定其耐药率,以PCR 对亚胺培南耐药菌株进行OXA-23 基因的检测并测序,序列与基因库比对.结果 16株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌中,OXA-23基因阳性11株,阳性率为68.8%.随机抽取2株OXA-23基因阳性株进行测序后,经网上GenBank 比对,与OXA-23 标准株100%同源.结论 分离菌株主要来源于痰标本,耐亚胺培南鲍曼不动杆菌OXA-23基因的携带率较高,分离菌株的耐药性可能与OXA-23型碳青霉烯酶基因有关.
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耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌感染治疗的实验依据
目的 分析一株鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素的机制.方法 用三维试验检测碳青霉烯酶,用聚合酶链反应(PCR)扩增和产物测序方法确认耐碳青霉烯酶类抗生素的机制;采用微量肉汤稀释法测定头孢哌酮/舒巴坦和左旋氧氟沙星的MIC值,应用棋盘格局法检测头孢哌酮/舒巴坦和左旋氧氟沙星的联合抗菌效应,计算FIC指数.结果 三维试验显示该菌株产碳青霉烯酶,经分子生物学确认有blaOXA-23基因;头孢哌酮/舒巴坦的MIC值为64μg/ml,左旋氧氟沙星的MIC值为32μg/ml,两者联合使用后其MIC都下降一个梯度,计算得FIC=1.结论 该菌株产OXA-23碳青霉烯酶,头孢哌酮/舒巴坦与左旋氧氟沙星联合使用后,表现为相加作用.
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ICU病区泛耐药鲍曼不动杆菌OXA-23基因与ArmA甲基化酶基因的研究
目的:了解我院泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)碳青霉烯酶OXA-23基因及介导氨基糖苷类高水平耐药的ArmA甲基化酶基因的存在状况,为有效的临床治疗和医院感染控制提供实验室依据.方法:收集我院2013-2015年从ICU病区分离的泛耐药鲍曼不动杆菌共60株,经VITEK 2-Compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药敏试验,采用PCR检测OXA-23基因及ArmA甲基化酶基因,并对其扩增产物进行基因测序.结果:60株泛耐药鲍曼不动杆菌所携带的OXA-23基因阳性率83.3％(50/60),ArmA基因阳性率为98.3％(59/60).同时携带2种基因型有50株.结论:我院ICU分离的泛耐药鲍曼不动杆菌中,广泛存在着OXA-23基因及ArmA甲基化酶基因,应引起临床医生高度重视,防止在院内其他的临床科室流行传播.
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鲍曼不动杆菌的耐药性及β-内酰胺酶耐药基因研究
目的 分析鲍曼不动杆菌(Ab)的耐药性及耐药基因,为临床合理应用抗生素提供重要依据.方法 采用K-B纸片扩散法对30株Ab进行抗菌药物敏感性的测定,PCR技术检测8种β-内酰胺酶基因,并对1株Ab的OXA-23基因进行了测序分析.结果 30株Ab菌对头孢曲松的耐药率低为6.67%,亚胺培南的耐药率达到了100%,其中头孢他啶、头孢吡肟、阿莫西林/舒巴坦的耐药率均达到了80%以上.30株Ab菌中TEM基因阳性16株(53.3%)、IMP基因阳性10株(33.3%)、VIM基因阳性8株(26.7%)、PER基因阳性4株(13.3%)、OXA-23基因阳性20株(66.7%)、OXA-24基因阳性23株(76.7%)、ADC基因阳性5株(16.7%),SHV基因阳性3株(10%),OXA-23测序结果显示,其与FJ975154.1的同源性高,为98%.结论 鲍曼不动杆菌的耐药性与β-内酰胺类基因的高表达密切相关.
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医院内感染碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药基因及同源性分析
目的：分析引起院内感染的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）耐药基因及同源性。方法收集CRAB 40株，采用琼脂稀释法检测低抑菌浓度（MIC）；PCR检测主要的碳青霉烯酶基因，PCR产物进行DNA测序分析；肠杆菌科基因间重复一致性序列聚合酶链反应（ERIC‐PCR）对耐药菌株进行基因分型及同源性分析，质粒接合试验探讨耐药基因的可传递性。结果40株CRAB仅对多黏菌素B（100％）和头孢哌酮／舒巴坦保持良好的敏感性（57．5％），对其他药物均产生不同程度耐药；全部菌株均检测出OXA‐23和OXA‐51基因；同源性分析显示，按80％的聚类相似系数可将40株菌株分为4个型，A1型为主要流行株（19株），且各科室存在交叉感染；质粒接合试验未获成功。结论该院存在CRAB的流行传播，其耐药机制主要与OXA‐23基因的表达有关；在合理使用抗菌药物的同时，应做好隔离及防护措施，尽量避免医院内交叉感染。
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亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型研究
目的 对临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶基因型进行研究,以指导临床合理应用抗生素.方法 用琼脂稀释法检测低抑菌浓度(MIC),聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-58、IMP和VIM碳青霉烯酶基因,并对PCR产物进行测序.结果 鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药率为36.9%,且亚胺培南耐药组菌株对12种抗菌药物耐药率与敏感组比较,差异有统计学意义(P<0.05);在24株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌中21株PCR扩增出OXA-23基因,2株扩增出VIM基因,检出率分别为87.5%和8.3%,OXA-24、OXA-58、IMP基因均未检出;PCR产物测序表明与Genbank相关基因同源性为100%.结论 该院亚胺培南耐药鲍不动杆菌耐药现象严重;OXA-23碳青霉烯酶基因的产生是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制之一.
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多重耐药鲍曼不动杆菌OXA-23基因与qacE△1基因检测的研究
目的 对本院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌(MRAB)OXA-23和qacE△1耐药基因进行检测分析.方法 收集2009年1月至2010年12月分离的85株多重耐药鲍曼不动杆菌,用聚合酶链反应(PCR)方法检测OXA-23和qacE△1耐药基因并测序,序列与基因库比对.结果 85株耐药菌中OXA-23、qacE△1基因的阳性率依次为55.3%、81.2%.其中58株耐亚胺培南MRAB OXA-23、qacE△1基因的阳性率为75.86%、84.48%;而其余27株亚胺培南敏感MRAB两个基因的阳性率分别为11.11%、74.07%.结论 OXA-23基因存在与鲍曼不动杆菌耐亚胺培南密切相关,qacE△1基因检测结果提示这些菌株81.2% 携带Ⅰ类整合子,是本组细菌多重耐药表型的主要原因之一.
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某院2011年12月-2012年12月ICU亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型的研究
目的:对重症监护病房(ICU)临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因型进行研究,为临床防治提供理论依据.方法:收集2011年12月-2012年12月青岛市海慈医疗集团ICU临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌65株,采用K-B琼脂纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、IMP、VIM6种碳青霉烯酶基因,并对PCR产物进行测序.结果:65株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌除对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、多黏菌素B的耐药率较低外,对其他药物的耐药率均在90％以上.65株扩增出OXA-51基因,56株扩增出OXA-23基因,6株扩增出VIM基因,检出率分别为100％、86.15％、9.23％,OXA-24、OXA-58及IMP均未检出；PCR产物测序表明与GenBank相关基因同源性为100％.结论:该单位ICU亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药现象严重；OXA-23型碳青霉烯酶的产生是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制之一.
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鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药基因研究
目的:检测耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌携带的耐药基因.方法:K-B琼脂扩散法做抗菌药物敏感实验,聚合酶链式反应技术(PCR)在所收集菌株中扩增BL4imp,BL4 vim,OXA-24,OXA-23基因.结果:筛选出亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌(IMRABs)12株,采用PCR技术在3株IMRABs同时扩增出BLA vim,OXA-23基因;7株扩增出OXA-23基因;2株耐药基因丢失.结论:部分表型为产金属酶的IMRABs耐药机制不单纯与携带金属酶基因相关,而是与携带其他耐药基因协同作用有关.
