首页 > 文献资料
-
氨基糖苷类药物耐药基因armA实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立
目的 建立一种快速、准确检测细菌中armA耐药基因的TaqMan实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction,real-time PCR)方法.方法 根据armA基因设计特异的引物及探针,在多种常见致病菌中检测其特异性;使用阳性质粒标准品评价该方法的灵敏度;使用粪便模拟标本验证该方法的应用性.结果 本方法特异性好,建立的armA耐药基因real-time PCR方法标准曲线,确定其对质粒标准品的灵敏度为4.07×101拷贝/ml.应用该方法对粪便模拟标本进行检测,其检测下限为1.3×104cfu/ml.结论 本研究建立了armA耐药基因荧光定量PCR检测方法,有望在耐药基因监测中推广使用.
关键词： armA基因 实时荧光定量-聚合酶链反应 粪便模拟标本 -
阴沟肠杆菌临床分离株armA基因分布与分子分型研究
目的 调查某医院阴沟肠杆菌临床分离株的耐药性和armA基因分布情况,探索armA阳性菌株与耐药性的关系及其分子分型特征.方法 采用微量肉汤稀释法对51株临床分离的阴沟肠杆菌进行药敏试验;荧光定量PCR方法检测16S rRNA甲基化基因armA;脉冲场凝胶电泳试验(PFGE)分析armA阳性菌株间的亲缘关系.结果 阴沟肠杆菌临床分离株对阿米卡星和庆大霉素的耐药率分别为39.2％和54.9％,armA基因阳性率为23.5％,arm A阳性菌株对阿米卡星和庆大霉素均耐药;12株携带armA基因菌株主要分为5型,无明显优势菌株.结论 产16S rRNA甲基化酶armA的阴沟肠杆菌菌株对氨基糖苷类药物耐药,应加强对该基因监测,合理指导临床抗生素应用.
关键词： 阴沟肠杆菌 16SrRNA甲基化酶 armA基因 耐药性 -
鲍曼不动杆菌armA基因的分布与耐药性的研究
目的 调查我院鲍曼不动杆菌中16S rRNA甲基化基因armA的分布以及与鲍曼不动杆菌耐药谱的关系,并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用.方法 收集72株鲍曼不动杆菌,采用K-B法对鲍曼不动杆菌进行药物敏感试验,后采用PCR筛选鲍曼不动杆菌的16S rRNA甲基化基因armA,并利用随机扩增多态性DNA法(RAPD)技术进行基因分型.统计各鲍曼不动杆菌菌株对多种氨基糖苷类药物的药敏结果,并分析基因型与耐药性的关系.结果 根据PCR产物片段大小,72株鲍曼不动杆菌共有armA基因阳性菌株20株(27.8%).含有armA基因型鲍曼不动杆菌菌株对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星的耐药率均为90%;随机扩增多态性DNA法显示20株armA基因阳性的鲍曼不动杆菌主要分为7型,A型为优势克隆株.结论 产16S rRNA甲基化基因armA的鲍曼不动杆菌菌株可对多种氨基糖苷类抗生素高水平耐药.同一克隆菌株在病房内和病房间的传播为我院armA基因传播的主要方式.
关键词： 鲍曼不动杆菌 16S rRNA甲基化基因 耐药性 armA基因 -
导致阿米卡星双圈耐药肠杆菌科细菌耐药性研究
目的：探讨临床分离的纸片扩散法药物敏感性试验对阿米卡星（AMK）呈双圈耐药的肠杆菌科细菌相关携带基因及药物诱导对耐药基因mRNA表达量的影响。方法收集纸片扩散法药物敏感性试验对AMK呈双圈耐药的大肠埃希菌（编号Eco85）和肺炎克雷伯菌（编号Kpn110）各1株；纸片诱导法探讨耐药表型的改变；聚合酶链反应（PCR）扩增氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及其可变区以及16S rRNA甲基化酶基因；逆转录PCR分析armA基因在AMK诱导前后菌株中的表达情况；接合试验探讨耐药基因的可传递性。结果 Eco85和Kpn110分别在第10代和第16代诱导后转变为双圈消失；2株菌均扩增出Ⅰ类整合子基因，可变区分别携带aadA5-dfra17和aadA2-dfrA12基因盒，未扩增出Ⅱ和Ⅲ类整合子基因；Eco85扩增出aac（6）-Ⅰ基因，而Kpn110扩增出ant（3″）-Ⅰ基因；Eco85和Kpn110均扩增出armA基因，基因测序未发现突变，未检出rmtB基因；经AMK诱导后菌株armA基因mRNA表达量明显上升；接合试验未获成功。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对AMK呈双圈耐药可能与16S rRNA甲基化酶armA基因的诱导表达相关。
-
VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统检测亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌对阿米卡星的准确性评估
目的：评价VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统（简称VITEK 2 Compact）检测亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌对阿米卡星药物敏感性试验结果的准确性，并了解其16S rRNA甲基化酶基因的存在情况。方法分别采用VITEK 2 Compact、纸片扩散法、E-test法检测72株临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌和15株亚胺培南敏感的鲍曼不动杆菌对阿米卡星的敏感性，同时采用聚合酶链反应（PCR）检测其16S rRNA甲基化酶armA基因。结果在72株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌中，纸片扩散法和E-test法的结果均一致；有69株细菌VITEK 2 Compact检测低抑菌浓度（MIC）为4～≥64μg/mL，而纸片扩散法和E-test法结果均为耐药；有3株细菌VITEK 2 Compact检测MIC为≤2μg/mL，纸片扩散法和E-test法有2株敏感；有59株细菌出现双圈耐药现象。在纸片扩散法及E-test法检测为阿米卡星耐药的70株鲍曼不动杆菌中，armA基因阳性率为92.9%（65/70）。15株亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌中，VITEK 2 Compact对阿米卡星的MIC均≤2μg/mL，纸片扩散法和E-test法的阿米卡星药物敏感性试验结果与VITEK 2 Compact一致，均为敏感。结论VITEK 2 Compact在检测耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对阿米卡星的敏感性时会出现不准确的结果，双圈耐药现象可能与携带16S rRNA甲基化酶基因armA有关。
-
多重耐药鲍曼不动杆菌中16SrRNA甲基化酶基因的检测及耐药分析
目的 了解医院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因分布情况,为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 采用Phoenixl00微生物全自动鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验;采用PCR方法检测armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD基因.结果 46株鲍曼不动杆菌中armA基因阳性36株,阳性率78.3％,未检出rmtA、rmtB、rmtC、rmtD基因.药敏试验结果显示医院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌对多黏菌素全部敏感,对四环素、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、甲氧苄啶-磺胺甲(噁)唑耐药率分别为13.0％、80.4％、91.3％、95.7％、95.7％,对其他测试药物耐药率100％.结论 医院分离鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药性已非常严重,携带armA基因是导致氨基糖苷类耐药的原因之一,延缓鲍曼不动杆菌多重耐药性已刻不容缓.
关键词： 多重耐药鲍曼不动杆菌 16SrRNA甲基化酶 armA基因 -
ICU病区泛耐药鲍曼不动杆菌OXA-23基因与ArmA甲基化酶基因的研究
目的:了解我院泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)碳青霉烯酶OXA-23基因及介导氨基糖苷类高水平耐药的ArmA甲基化酶基因的存在状况,为有效的临床治疗和医院感染控制提供实验室依据.方法:收集我院2013-2015年从ICU病区分离的泛耐药鲍曼不动杆菌共60株,经VITEK 2-Compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药敏试验,采用PCR检测OXA-23基因及ArmA甲基化酶基因,并对其扩增产物进行基因测序.结果:60株泛耐药鲍曼不动杆菌所携带的OXA-23基因阳性率83.3％(50/60),ArmA基因阳性率为98.3％(59/60).同时携带2种基因型有50株.结论:我院ICU分离的泛耐药鲍曼不动杆菌中,广泛存在着OXA-23基因及ArmA甲基化酶基因,应引起临床医生高度重视,防止在院内其他的临床科室流行传播.
-
鲍曼不动杆菌临床株中可移动遗传元件ISCR1的作用
目的 了解鲍曼不动杆菌临床株中新型可移动遗传元件ISCR1的携带情况及其下游基因环境,探讨鲍曼不动杆菌耐药播散机理.方法 收集多重耐药鲍曼不动杆菌临床株34株和敏感株21株,PCR扩增ISCR1基因及其下游的基因环境,扩增产物测序分析.结果 34株多重耐药鲍曼不动杆菌临床株中,携带ISCR1基因14株,其中11株ISCR1阳性多重耐药株,在ISCR1基因下游携带氨基糖甙类耐药基因armA基因；21株敏感株中,ISCR1基因扩增结果均为阴性.结论 ISCR1元件可能参与了armA耐药基因的水平播散.
-
不同来源革兰阴性菌armA基因分布与氨基糖苷类抗生素耐药性
目的 调查不同来源的革兰阴性菌中16S rRNA甲基化酶armA的分布及其与耐药性的关系.方法 采用常规药敏试验对953株不同来源的革兰阴性菌进行分析,荧光定量PCR方法检测armA基因,分析armA基因携带与氨基糖苷类抗生素敏感性之间的关系.结果 共收集846株临床来源革兰阴性菌和107株养殖场来源克雷伯菌属菌株,其中不动杆菌属对阿米卡星和庆大霉素耐药率分别达到86.4％ (152/176)和89.8％(158/176).不动杆菌属携带armA基因的比率也高,达66.5％.养殖场来源的107株克雷伯菌属菌株对阿米卡星、庆大霉素的耐药率以及armA基因携带率均比临床来源高,分别达到74.8％,79.4％和65.4％.256株携带armA基因的菌株对阿米卡星和庆大霉素耐药率分别高达95.7％和98.4％.结论 不同种属革兰阴性菌对氨基糖苷类抗生素的敏感性和armA基因的携带率不同,但均表现出armA基因的携带与氨基糖苷类耐药表型具有很高的一致性,提示在革兰阴性菌中armA的检测结果可以预测菌株对氨基糖苷类抗生素的敏感情况.
-
介导氨基糖苷类高水平耐药16SrRNA甲基化酶armA基因的基因环境分析
目的：探讨介导氨基糖苷类高水平耐药基因 armA在不同种属中的基因环境。方法 BLASTN比对分析GenBank数据库中 armA基因所处的基因环境。分析 armA基因分布的种属、地域及其侧翼序列特征。结果所有的 armA基因均位于插入序列IS CR1的下游。 armA基因在肠杆菌科细菌中广泛检出，在肠杆菌科细菌中其侧翼序列结构保守。结论不同国家、地区，不同菌属中报道的 armA基因环境有极大的相似性。
关键词： armA基因 16S rRNA甲基化酶 肠杆菌属 假单胞菌属
