首页 > 文献资料
-
ELISA法检测食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价
目的：酶联免疫吸附法（ ELISA ）定量测定食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价。方法：利用双抗体夹心ELISA法，对rhCNB多肽的方法学灵敏度、线性范围、精密度与准确度和回收率进行方法学验证。结果：该方法特异性高，在0.195～12.5 ng／ml的线性范围内，线性关系良好，标准曲线方程为Y ＝15.1X－0.26，R2＝0.9968，定量下限（LLOQ）为0.195 ng／ml；该方法的批内精密度CV分别为3.55％、1.39％和4.71％；批间精密度CV分别为1.59％、3.2％和3.8％，均＜5％，准确度在91.9％～108.8％之间，方法回收率在88.5％～108.3％之间，＜110％，说明该ELISA方法的准确度较高。符合验证要求。结论：双抗体夹心ELISA法灵敏度高、通量大、重复性、准确度及精密度好，可用于生物样品中rhCNB多肽的定量检测。
-
大鼠血浆中重组人钙调磷酸酶B亚基的ELISA双抗体夹心法测定及其药动学研究Δ
目的：建立大鼠血浆中重组人钙调磷酸酶B亚基（rhCNB）的测定方法，并研究其药动学特征。方法：采用酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法，将1μg/ml的rhCNB单克隆抗体mAb包板，加入待测样品，再加入rhCNB多克隆抗体pAb（稀释比例为1∶5000）和辣根过氧化酶（HRP）标记抗免疫球蛋白G（IgG）（稀释比例为1∶10000），以四甲基联苯胺显色，用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度（OD值）。测定6只大鼠iv 2.5 mg/kg rhCNB后2、15、30、60、120、240、480、720 min的血药浓度，以BAPP 3.0软件计算药动学参数。结果：rhCNB检测质量浓度的线性范围为0.195～12.5 ng/ml（r2＝0.9950），定量下限为0.195 ng/ml，准确度为97.300％～103.622％（RSD均小于7.5％，n＝6）；批内、批间和反复冻融3次的RSD均不大于8.5％（n＝6、18、15）。该药在大鼠体内的药动学特征符合二室模型，AUC0-720 min为173.038 mg·min/L、t1/2为94.62 min。结论：建立的方法特异性强、灵敏度高、准确度及精密度好，可用于生物样品中rhCNB的定量检测和药动学研究。
关键词： rhCNB多肽 酶联免疫吸附双抗体夹心法 大鼠 定量检测 药动学
