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用PCR-SSP分析HLA-B位点血清学分型困难标本
目的:对血清学HLA-B位点分型困难标本用PCR-SSP方法分析,并寻找血清分型效果不佳原因.方法:用本室建立的PCR-SSP方法对100株标准细胞及91份血清学分型困难标本分别作HLA-B位点分析,前者作为PCR-SSP方法的参考对照品.结果:100株标准细胞分析结果与已知结果一致;91份疑问标本均顺利地用PCR-SSP分型,结果共有70种等位基因格局,其中36种与血清学完全不同,占52%.PCR-SSP还检出了一些原先认为上海人中空白的基因,如B49.结论:从PCR-SSP分型结果推断血清学部分标本分型结果不佳的原因是缺少单价抗血清;同一交叉反应组内错检;反应强度不当,导致结果难辨;操作中跨孔污染.而PCR-SSP就没有这方面的问题.证实了本室建立的PCR-SSP法可作为准确可靠的HLA-B位点分型手段.
关键词： 血清学分型 HLA-B位点 PCR-SSP基因分型 -
罕见B(A)血型的鉴定
目的 观察2例罕见B(A)血型的血清学特征并研究其分子机制.方法 用血型血清学鉴定2例献血者标本ABO血型,用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)基因分型和直接测序确定其基因型.结果 2例献血者血型血清学检测结果均表现为B(A)亚型的特点.标本1基因分型为BO2,测序结果为第7外显子B基因发生640A＞G突变,符合B(A)04/O02的基因型特点;标本2基因分型为BO1,测序结果为第7外显子B基因发生700C＞G突变,符合B(A)02/O01的基因型特点.结论 2例标本均为B(A)表现型,基因型分别为B(A)04/O02和B(A)02/O01.
关键词： B(A)血型 血型血清学 PCR-SSP基因分型 直接测序 输血 -
33例无偿献血者ABO血型正反定型不符原因分析
目的：分析无偿献血者ABO血型正反定型不符的原因。方法应用血清学方法检测 ABO血型正反定型不符标本，并辅以ABO基因分型方法。结果205744例无偿献血者标本，其中33例正反定型不符，经进一步鉴定抗体筛查阳性13例，ABO亚型12例，血型反定型抗体减弱8例。结论当无偿献血者ABO血型正反定型不符时，应换人多次重检排除人为因素，同时进一步进行血清学试验及序列特异引物引导的 PCR（PCR‐SSP）基因分型，确保无偿献血者的ABO血型鉴定正确，使临床输血更加安全和有效。
关键词： 无偿献血者 ABO亚型 PCR-SSP基因分型 -
筛选试剂红细胞的血型基因分型方法建立和应用
目的 建立重要的红细胞血型的基因分型技术用于筛选抗原谱合理的试剂红细胞.方法 首先建立检测红细胞血型系统RhCE、Kidd、MNS、Duffy、Diego、Lutheran、Cltton、Lutheran和Kell等的聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分型技术;对于无法获得相关血型试剂的Diego和Colton血型系统,采用测序方法验证该技术检测血型的准确性,其他6个血型系统则用血清学方法验证该技术检测血型的准确性;后应用该方法对82名O型固定献血者的8个血型系统做基因分型.结果 血型基因PCR-SSP分型技术的结果,与血清学和测序检测结果比较,完全一致.所建立的血型基因分型技术对82名O型献血者8种红细胞血型检测,筛选出13位可能适合提供试剂红细胞的献血者.结论 成功建立了分型准确、方便、经济的红细胞血型基因PCR-SSP技术,用于从大量献血者中筛选出抗原谱合理的试剂红细胞.
关键词： 红细胞血型 试剂红细胞 PCR-SSP基因分型 抗原谱
