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病毒清丸的质量标准研究
目的通过测定本方中贯众的有效成分东北贯众素的含量,制定本方的质量标准.方法用高效液相色谱法测定东北贯众素的含量.结果通过对6批本方样品的东北贯众素的测定,得出本方东北贯众素的平均含量为5.83%.结论此方法对控制本方的质量重现性好,结果符合药典的规定.
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绵马贯众不同萃取部位的抑菌活性
目的:研究绵马贯众不同萃取部位的抑菌活性.方法:以70％乙醇冷浸72 h制备绵马贯众粗提物,液-液分离法制备石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水5个部位萃取物,用K-B纸片扩散法对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、酵母菌、黄曲霉和黑根霉6种供试菌株的抑菌活性进行研究.结果:绵马贯众5个萃取部位均表现出一定的抑菌效果,且随着用药量的增加其抑菌活性总体上呈现出增强的趋势,其中以三氯甲烷萃取部位和乙酸乙酯萃取部位的抑菌活性较大,水萃取部位的抑菌活性小.结论:不同部位对供试菌株的抑菌活性不同.
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基于psbA-trnH序列DNA条形码技术的绵马贯众鉴定研究
利用sbA-trnH序列对绵马贯众药材、基原植物进行真伪鉴定.对实验样本的sbA-trnH序列进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增及产物测序,为扩大研究范围,从GenBank中下载了3属8种植物的psbA-trnH序列.利用DNAMAN 8.0软件进行峰图的查看、拼接及比对,使用MEGA 6.0软件计算K2P遗传距离并建立系统聚类树对其进行分析.结果显示psbA-trnH序列可对绵马贯众、其基原植物粗茎鳞毛蕨,以及同科属植物进行鉴别,其中绵马贯众与其基原植物粗茎鳞毛蕨的sbA-trnH序列完全一致,并可与其他易混药材及植物明显区分.表明psbA-trnH序列对绵马贯众药材、基原植物及其混伪品的鉴别具有可行性,为后续蕨类药材的鉴定研究提供一定的科学基础.
关键词： sbA-trnH序列 绵马贯众 粗茎鳞毛蕨 -
绵马贯众、紫萁和单芽狗脊贯众饮片抗菌及凝血试验对比研究
目的:为紫萁、单芽狗脊贯众寻找临床用药依据.方法:以对9个菌种的抑菌活性和凝血时间为指标,对紫萁、单芽狗脊贯众与绵马贯众的饮片进行比较研究.结果:三种药材的生品均有抑菌活性,对不同菌种其抑菌活性各有不同.三种药材的炭品均有凝血作用,以单芽狗脊贯众作用强,绵马贯众次之,紫萁更次之.抑菌活性生品明显强于炭品,凝血作用炭品明显强于生品.结论:为市场主流品种紫萁、单芽狗脊贯众找到了临床用药依据,证实了生品长于驱虫、清热解毒,炭品长于止血的传统炮制理论是科学的.
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抗感颗粒中混淆品单芽狗脊贯众投料的HPLC-MS/MS检测
目的 建立检测抗感颗粒以绵马贯众易混淆品单芽狗脊贯众投料的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法.方法 单芽狗脊贯众药材中山柰苷含量远超过绵马贯众,通过测定抗感颗粒中山柰苷的含量,可以判断生产企业是否存在以单芽狗脊贯众投料的情况.具体测定条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为含0.02％甲酸的乙腈-0.02％甲酸溶液,梯度洗脱;质谱采用电喷雾正离子模式(ESI+),多反应监测(MRM)定量分析,以m/z 579.2→287.1作为定量离子对.结果 山柰苷在272.46 ～5 449.25 pg内线性关系良好,回归方程为Y=139.217 2 X-2 901.93,相关系数r=0.999 6,平均回收率(n=6)为94.97％,RSD为0.85％.在检测收集的12批样品中,2家企业的7批样品山柰苷含量异常偏高,可能存在以单芽狗脊贯众投料的情况.结论 建立的方法简便、准确、可靠,可用于检测抗感颗粒中单芽狗脊贯众的使用情况.
关键词： 高效液相色谱-串联质谱 抗感颗粒 绵马贯众 单芽狗脊贯众 山柰苷 -
HPLC和TLCS测定绵马贯众抗疟有效部位中东北贯众素含量
绵马贯众是鳞毛蕨科植物粗茎鳞毛蕨Dryopteris crassirhizoma Nakai的干燥根茎及叶柄残基,为较常用中药,具有清热解毒、驱虫等功效.
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中药绵马贯众的化学成分研究
目的研究中药绵马贯众的化学成分.方法用硅胶和凝胶柱色谱进行分离,根据理化性质、波谱特征鉴定结构.结果从其甲醇提取物中分离并鉴定了6个化合物:二十六烷酸(Ⅰ),二十五烷醇(Ⅱ),nerolidol(Ⅲ),东北贯众素(Ⅳ),黄绵马酸AB(Ⅴ),蔗糖(Ⅵ).结论Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅵ为首次从鳞毛蕨属植物中得到,Ⅴ为首次从绵马贯众中分离得到单体.
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抗感颗粒中绵马贯众的鉴别和赤勺的含量测定
采用TLC法及HPLC法对抗感颗粒中的绵马贯众进行鉴别及对赤勺的主要成分芍药苷进行含量测定.TLC法中,以氯仿-丙酮-冰醋酸(16:4:0.3)作为展开剂;HPLC定量分析中,以Hypersil BDS C18为色谱柱,乙腈-水-磷酸(20:90:0.1)为流动相,检测波长为230nm,芍药苷在20.31～203.1μg·ml-1范围内线性关系良好(r=0.9999),其平均回收率为99.57%,RSD为0.96%.TLC法专属性较强,HPLC法分离效果好、准确可靠,可为抗感颗粒的质量控制提供科学依据.
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绵马贯众中间苯三酚类化合物抗H1N1流感病毒神经氨酸酶的活性成分筛选
目的 研究绵马贯众中间苯三酚类化合物对H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)的抑制作用.方法 通过检索建立了由34个间苯三酚类化合物组成的配体库,从Protein Data Bank中下载的X-ray晶体三维结构文件,采用AutoDock Vina软件及LigPlot+软件筛选出与NA结合能较低且与NA形成氢链作用较强的分子;采用荧光法检测化合物对NA活性的作用.结果 通过分子对接筛选出4个(绵马酸ABA、绵马酸ABB、绵马酸ABP、绵马贯众素ABBA)与NA有较好结合的化合物,并对这4个化合物进行活性验证,结果表明绵马贯众素ABBA对NA抑制作用强,IC50值为(26.73 ±0.57)μmol/L.结论 绵马贯众中绵马贯众素ABBA具有较好的抗H1N1流感病毒NA的作用,为开发新的抗流感病毒药物奠定了基础.
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绵马贯众抗疟活性筛选
以Peters 4 d抑制试验法,对绵马贯众的甲醇总提物及其4个不同极性的部位进行了抗疟活性测试.结果表明:部位A和B具有较强抗疟活性.
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绵马贯众的化学成分研究(Ⅱ)
目的研究绵马贯众的化学成分.方法.采用GC-MS对从绵马贯众中经硅胶柱层析得到的油状物进行成分分析鉴定.结果.从抗疟有效部位A中经硅胶柱层析得到一油状物,采用GC-MS色谱仪从该油状物中分离出17个色谱峰并鉴定了其中的12个成分.结论.12个成分分别为丁基环己烷、顺式十氢萘、1-甲基乙基-环己烷、9-(1-甲基亚乙基)-二环[6.1.0]壬烷、环己烷基环己烷、(-)-3,7,7-三甲基-11-亚甲基-螺[5.5]十一-2-烯、[1S-(1α,3aβ,4α,8aβ)]-十氢-4,8,8-三甲基-9-亚甲基-9-1,4-亚甲基奥、3,7,11-三甲基-2,6,10-三烯十二烷-1-醇、石竹烯、2,3,4,4a,5,6-六氢-1,4a-二甲基-7-(1-甲基乙基)-萘、[1aR-(1aα,7α,7a,7b)]- 1a,2,3,5,6,7,7a,7b-八氢-1,1,7,7a-四甲基-1H-环丙烷[a]萘、α-姜黄烯,均为首次从该植物中鉴定.
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绵马贯众部位Ⅱ的抗疟作用和急性毒性实验研究
以Peters 4天抑制试验法,对绵马贯众部位Ⅱ进行了抗疟药效实验,测得其对伯氏疟原虫K173株的ED50为59.74 mg/ kg,对伯氏疟原虫抗氯喹株(RC/ K173)的ED50为111.22 mg/ kg,抗性指数为2.10;还对该部位进行了急性毒性实验,测得一日灌胃给药对小鼠的LD50为8890 mg/ kg(95%可信区间为6405～12338 mg/ kg),治疗指数为148.
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亚毒性中药使用应加强管理
亚毒性中药是指具有毒性或有小毒而未列入国务院《医疗用毒性药品管理法》规定的有毒中药品种,临床使用过量或应用不当会中毒或产生严重不良反应,应用或药房管理上需加以注意.《药典》及《北京市中药饮片炮制规范》收载的品种《药典》2010年版收载的品种:有小毒品种:丁公藤、九里香、土鳖虫、大皂角、川楝子、小叶莲(藏药)、飞扬草、木鳖子、水蛭、艾叶、北豆根、仙茅、地枫皮、红大戟、两面针、吴茱萸、苦木、苦杏仁、草乌叶、南鹤虱、鸦胆子、重楼、急性子、蛇床子、猪牙皂、绵马贯众、紫萁贯众、蒺藜、榼藤子、鹤虱、翼首草(藏药).
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绵马贯众中间苯三酚类化合物分离及其抑菌活性研究
目的 研究绵马贯众Dryopteris crassirhizoma中间苯三酚类化合物并探讨其抑菌活性.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备液相及重结晶等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据(MS、1H-NMR、13C-NMR)鉴定结构;采用美国临床实验室标准研究所(CLSI)制定的M38-A2和M07-A9方案分别研究化合物对真菌和细菌的抑菌活性.结果 从绵马贯众50％乙醇提取物中分离得到10个间苯三酚类化合物,分别鉴定为1-丁酰基间苯三酚(1)、1-甲基-3-丁酰基间苯三酚(2)、2-乙酰基-4-丁酰基间苯三酚(3)、1-甲基-3-乙酰基-5-丁酰基间苯三酚(4)、黄绵马酸PB(5)、异黄绵马酸AB (6)、异黄绵马酸AB (6)、黄绵马酸AA (7)、绵马酸ABA (8)、黄绵马酸AB (9)、绵马酸ABP (10).化合物8对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌表现出与阳性对照头孢西丁相当的抑制活性,小抑菌浓度(MIC)均达到2.5 μg/mL.结论 化合物1～4首次从绵马贯众中分离得到.化合物8对真菌和细菌都有明显的抑菌活性.
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绵马贯众中间苯三酚类化合物抗流感病毒的活性筛选
目的 基于绵马贯众中间苯三酚类成分寻找具有良好抗流感病毒活性的化合物.方法 将25个绵马贯众中间苯三酚类化合物与12种流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)进行分子对接,通过评价结合能、结合模式及发生相互作用的重要氨基酸等指标进行虚拟筛选.通过神经氨酸酶抑制实验验证其中4个候选化合物体外抑制NA的活性,在此基础上,采用犬肾MDCK细胞通过细胞病变(CPE)法对候选化合物M22的抗病毒活性进行进一步的验证.结果 通过分子对接筛选出5个与NA有较好结合能力的候选化合物;NA抑制实验结果表明候选化合物中M22对NA抑制作用显著;CPE实验结果表明M22对多种流感病毒毒株均具有较好的抑制作用.结论 绵马贯众中候选化合物M22具有较好的抗流感病毒作用,为开发新的抗流感病毒药物的深入研究奠定了基础.
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RP-HPLC法测定绵马贯众药材中绵马贯众素
目的 分离纯化绵马贯众素,建立RP-HPLC法测定绵马贯众中绵马贯众素的方法.方法 采用ODS柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为异丙醇-甲醇-氯仿-水-磷酸(102:20:12:24:0.1),检测波长283 nm.结果 该方法的线性范围为0.4～1.6 μg,r=0.995(n=5),平均回收率101.23%,RSD=2.11%(n=5).结论 绵马贯众素质量分数达到99.13%,可作为对照品.绵马贯众素定量测定方法简便,准确,重现性好,可用于该药材及其制剂中该成分的定量测定.
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阴离子交换树脂分离纯化绵马贯众总多酚的工艺研究
目的 研究阴离子交换树脂分离纯化绵马贯众总多酚的工艺条件.方法 分别以绵马贯众素ABBA、绵马贯众总多酚的比吸附量、洗脱率、质量分数为指标,优选绵马贯众总多酚的佳纯化工艺.结果 佳工艺为绵马贯众药材提取液以6 BV/h的体积流量通过201×7氢氧型阴离子交换树脂柱(柱径与柱高比为1∶7),树脂饱和后,水洗至中性,再用3％氯化钠的60％乙醇溶液以6 BV/h的体积流量洗脱,洗脱9倍量树脂柱体积.绵马贯众素ABBA及绵马贯众总多酚洗脱率分别为90.1％和91.1％,绵马贯众素ABBA、绵马贯众总多酚的质量分数分别为29.4％、49.2％.结论 采用201×7氢氧型阴离子交换树脂纯化绵马贯众总多酚效率高,成本低,具有广阔的应用前景.
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常用药材绵马贯众活性成分研究
目的:研究绵马贯众中活性成分间苯三酚衍生物类化合物.方法:采用缓冲硅胶层析法分离纯化化合物,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物结构.结果:从绵马贯众根茎的乙酸乙酯萃取部位分离到9个间苯三酚衍生物类化合物,现报道已鉴定的前3个化合物.分别为白绵马素AA(Ⅰ),白绵马素AP(Ⅱ),白绵马素PP(Ⅲ).结论:化合物Ⅱ、Ⅲ为首次从自然界分离得到单体,首次在该植物中发现.首次报道了化合物Ⅱ和化合物Ⅲ碳氢NMR数据、化合物Ⅰ的碳谱数据,并利用多种2DNMR技术对这3个化合物的NMR数据进行了归属.
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绵马贯众不同萃取部位总间苯三酚含量的测定
目的:测定绵马贯众不同萃取部位总间苯三酚的含量.方法:以0.5％坚牢蓝BB盐溶液为显色剂,室温放置10min显色,采用可见分光光度法,在476 nm波长下测定绵马贯众不同萃取部位总间苯三酚的含量.结果:对照品间苯三酚在2～12 μg范围内线性关系良好,回归方程为y=0.049 2x+0.018 3(r=0.999 6),平均加样回收率为99.76％,RSD=2.17％(n=6).结论:本法操作简便,结果准确,重现性好,适用于绵马贯众不同萃取部位总间苯三酚含量的测定.
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贯众的生药学研究
贯众始载于<神农本草经>,列为下品,味苦、性微寒、有小毒,有驱虫、止血、清热解毒的功能,临床上用于虫积腹痛、热毒疮疡、痄腮肿痛、崩漏及防治流感等.综述了贯众品种、化学成分、药理研究以及临床应用的研究进展,提出了贯众研究开发利用的发展方向,并对一些问题进行评述:
