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羊痒病病毒株对鼠神经瘤细胞的影响
目的:研究羊痒病病毒株(22L)对神经瘤细胞(N2a)的影响,并建立研究朊病毒病的细胞模型.方法:用感染22L的鼠脑匀浆感染正常的N2a细胞,经荧光倒置显微镜、电镜及HE染色对正常细胞和染毒细胞(N2a-22L)的形态和内部结构进行观察,并通过Western blot检测细胞中朊病毒(Prions,PrP(sc))的含量.结果:镜下观察可见,N2a-22L细胞的神经突起较N2a细胞明显增多,并交织成复杂的网状结构;线粒体出现明显的空化,嵴消失;细胞体积减小,细胞核皱缩,细胞间通过突起连在一起,细胞核与细胞质界限模糊.N2a-22L细胞蛋白PrP经PK酶消化后,可见抗PK酶的PrP(sc),N2a细胞的PrP蛋白均能被PK酶消化,表明N2a-22L已稳定感染了22L.结论:N2a-22L细胞可作为研究朊病毒病的细胞模型,为研究朊病毒病发病机制提供了有效途径.
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阿魏酸抑制朊病毒复制作用的研究
目的 本试验通过已建立的ScN2a细胞模型,探讨阿魏酸对朊病毒复制的影响.方法 通过Western blot法检测阿魏酸对朊病毒复制作用的影响.结果 0.5、1和5μg/mL的阿魏酸能够极显著的抑制PrPsc的表达水平(P<0.01).结论 由于中药单体阿魏酸可以抑制ScN2a中PrPSc蛋白的复制,所以中药单体阿魏酸对朊病毒病可能起到一定的治疗作用,这为我们以后对于研究朊病毒的治疗提供了新的思路.