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P53蛋白和VEGF在肺癌组织中的表达及临床意义
近年来,肺癌的发病率和死亡率呈上升趋势.寻找肿瘤的早期诊断指标和正确估计其预后具有重要的临床意义.已有研究表明野生型P53蛋白可以抑制血管生成因子(如血管内皮生长因子VEGF)的表达,并通过旁观效应抑制肿瘤的生长和转移,而突变型P53则可以上调VEGF的表达,促进血管形成并促进肿瘤的生长和转移,但亦有不同的报道[1,2].为了进一步研究肺癌组织中P53蛋白和VEGF表达与其病理生理学特征间的关系,我们采用免疫组织化学方法对94例肺癌及10例正常肺组织中VEGF、P53表达情况进行了检测.
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单纯疱疹病毒胸苷激酶丙氧鸟苷自杀基因系统对宫颈癌Hela细胞系体外杀伤作用的研究
目的:观察单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)丙氧鸟苷(GCV)自杀基因系统对人宫颈癌Hela细胞系体外杀伤作用及其旁观效应. 方法:采用脂质体转染法将GINaTK载体转入包装细胞PA317.取病毒上清液感染Hela细胞,得到带有HSV-TK基因的Hela/TK细胞,并将其用于体外实验. 结果:载体HSV-TK导入了PA317细胞.体外实验结果显示,当Hela/TK细胞数占混合细胞10%时,低浓度(10 mg/L)的GCV就可将50%左右的肿瘤细胞杀死.GCV作用后的实验组Hela /TK细胞基因组经琼脂糖凝胶电泳后可观察到典型的DNA梯状条带. 结论:逆转录病毒可介导HSV-TK基因转入人宫颈癌Hela细胞并获稳定表达,HSV-TK/GCV自杀基因系统在体外对宫颈癌细胞有杀伤作用,且存在明显的旁观效应.
关键词: 单纯疱疹病毒胸苷激酶 旁观效应 逆转录病毒载体 人宫颈癌 自杀基因治疗 -
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的抗胰腺癌细胞的作用
目的 探讨腺病毒介导的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因对人胰腺癌株Panc-1细胞的抑制作用及其机制.方法 利用腺病毒载体Ad-TRAIL将人类TRAIL全长cDNA转染导入Panc-1细胞.分别利用RT-PCR和Western blot检测TRAIL在mRNA水平及蛋白水平的表达.利用MTT法测定细胞增殖活性及TRAIL基因的旁观效应.利用流式细胞仪检测胰腺癌细胞的凋亡率,并用Western blot检测procaspase-8和procaspase-3蛋白的表达.结果 Panc-1细胞感染Ad-TRAIL腺病毒后,可稳定地高表达TRAIL.Ad-TRAIL能显著抑制Panc-1细胞的生长.高表达TRAIL的转染细胞能通过旁观效应导致未转染细胞的生长抑制.Ad-TRAIL实验组的凋亡率显著高于对照组(P<0.01),且Ad-TRAIL能使procaspase-8和procaapase-3蛋白表达下降.结论 Ad-TRAIL对胰腺癌Panc-1细胞具有明显的抑制作用,其机制可能与促凋亡和旁观效应有关.