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胰腺癌中p33ING1b基因变化及其表达研究
目的检测胰腺癌中p33ING1b蛋白表达及基因变化情况,以了解p33ING1b在肿瘤发生过程中的作用.方法采用免疫组化、聚合酶链反应单链构象多态性技术(PCR-SSCP)和杂合型缺失(LOH)技术,检测胰腺癌中p33ING1b表达及p33ING1b基因变化情况.结果ING1b蛋白的阳性表达率为85%(34/40),SSCP显示在40例病例中仅1例突变,LOH率为60.9%(14/23).结论突变与缺失表达并不是p33ING1b的主要失活形式,染色体改变可能导致p33ING1b功能下降,从而引发肿瘤发生.
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喉癌患者血浆DNA微卫星等位基因杂合型缺失的监测及意义
目的:分析喉癌患者肿瘤DNA微卫星多态位点等位基因杂合型缺失在肿瘤组织与血浆的表达及关系,探讨血浆肿瘤DNA的动态变化在临床早期诊断、筛查及随访中的意义.方法:2003年9月～2004年12月青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院耳鼻咽喉头颈外科喉癌患者43例,抽取术前、术后防凝血,分离淋巴细胞和血浆,采集肿瘤、癌旁组织标本,分别提取DNA.选取头颈部鳞状细胞癌等位基因杂合型缺失(LOH)表达较高的3个微卫星多态位点D9S162、D9S1782、D17S1665,设计并合成引物,PCR扩增,聚丙烯酰胺电泳,用ID Image Analysis Software 凝胶成像分析系统分析电泳结果.结果:D9S162肿瘤、术前血浆、术后血浆LOH表达率分别为51.85%,44.44%,33.33%;D9S1782分别为43.48%,39.13%,34.78%;D17S1665分别为51.43%,42.86%,37.14%.术后血浆3个位点有6位次LOH消失;早期和晚期喉癌血浆DNA的LOH表达无统计学差异(P＞0.05).结论:肿瘤DNA的LOH的表达与血浆肿瘤DNA的表达一致,监测血浆肿瘤DNA的变化有助于喉癌的早期诊断,术后随访过程中动态监测血浆肿瘤DNA可以预测肿瘤有无复发或再发.
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DNA甲基化与肿瘤
基因组含有两类遗传信息:一类是经典遗传信息,包括基因突变、基因杂合型缺失和微卫星灶不稳定等,是基于基因序列改变导致基因表达水平改变;另一类是肿瘤表观遗传学信息,主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑、基因组印记和非编码RNA调控等几个方面,是基于非基因序列改变所致基因表达水平改变.两者关键区别在于前者是永久性的,而表现遗传改变如DNA甲基化是一个可逆过程[1].DNA甲基化与人类多种疾病有关,尤其是肿瘤.近年来,肿瘤DNA甲基化的研究逐渐向临床应用方面过渡,为肿瘤的治疗提供一条新的思路.
