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纳洛酮复合吗啡对裸鼠人胃癌皮下瘤生长的影响
目的 观察纳洛酮复合吗啡对裸鼠人胃癌皮下瘤生长的影响.方法 建立裸鼠人胃癌MGC-803细胞皮下瘤模型,将50只裸鼠随机分为五组:对照组(C组)、生理盐水组(S组)、20 mg/kg 吗啡组(M组)、1 mg/kg纳洛酮组(N组)、1 mg/kg纳洛酮+20 mg/kg 吗啡组(NM组),每组10只.成瘤后,C组不作任何处理;S、M、N组裸鼠每天在右下腹分别腹腔注射生理盐水1.5 ml/kg、吗啡20 mg/kg或纳洛酮1 mg/kg;NM组裸鼠每天在右下腹先腹腔注射纳洛酮1 mg/kg,30 min后再给予吗啡20 mg/kg;连续注射14 d.每2天测量1次肿瘤的长径和短径,计算肿瘤相对体积(RTV);用药结束后拉颈处死裸鼠,采用透射电镜观察肿瘤组织的结构变化,免疫组化、半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测肿瘤组织中Cyclin D1、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达.结果 M组裸鼠皮下瘤RTV为(2.21±0.62)%,明显小于C组的(3.16±0.68)%、S组的(2.98±0.61)%、N组的(3.16±0.35)%和NM组的(2.64±0.37)%(P<0.05);NM组裸鼠皮下瘤RTV明显小于C、S和N组(P<0.05).电镜下,C、S、N及NM组皮下瘤组织结构基本正常,M组皮下瘤细胞出现胞浆空泡化、核膜破裂、核染色质边集等.M组裸鼠皮下瘤组织内Cyclin D1、VEGF、MMP-9阳性染色肿瘤细胞、mRNA和蛋白的表达明显低于C组(P<0.05);NM组裸鼠皮下瘤组织内Cyclin D1、VEGF、MMP-9阳性染色肿瘤细胞、mRNA和蛋白的表达明显高于M组(P<0.05).结论 吗啡可抑制裸鼠人胃癌皮下瘤的生长,纳洛酮可拮抗这一作用,其机制可能与其调节Cyclin D1、VEGF、MMP-9的表达有关.
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多时间点动态增强MRI评价裸鼠皮下移植瘤的实验研究
目的：探讨多时间点动态增强MRI在评价裸鼠皮下移植瘤模型中的价值。方法裸鼠20只，建成BGC-823细胞株皮下瘤模型，随机分成A、B两组进行磁共振成像，应用3.0TMR对肿瘤先进行 T1WI、T2WI成像，A组通过尾静脉注入磁共振造影剂Gd-DTPA后再进行T1WI增强扫描，分别在4min、30min、1h、2h各个时间点进行扫描。B组通过尾静脉注入生理盐水进行对照，同样在以上4个时间点进行T1WI扫描，采用信号增强率评价每个时间点图像的增强效果。结果 T2WI肿瘤呈高信号，境界清楚，肿瘤信号欠均匀。T1WI肿瘤呈等信号或稍低信号，信号尚均匀。在4min、30min、1h、2h各个时间点，A组信号增强率分别为2.8%、4.7%、3.5%、1.5%，B组信号增强率分别为0.1%、0.2%、0.1%、0.1%，A组信号增强率明显高于B组（t=4.302，P=0.001；t=6.872，P=0.000；t=5.458，P=0.000；t=2.701，P=0.002）。结论3.0T磁共振可以客观、清楚显示裸鼠皮下移植瘤，通过尾静脉注射造影剂对皮下瘤有较好的增强效果，多时间点动态增强MRI显示皮下瘤在注射造影剂后30min信号增强率高。
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蟾蜍灵在体内外抑制急性红白血病细胞K562增殖及下调WT1表达的研究
目的：研究蟾蜍灵在体内外抗 K562细胞增殖及对WT1表达影响。方法半固体集落形成实验检测蟾蜍灵对K562细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析蟾蜍灵对K562细胞周期的影响,Western blot观察蟾蜍灵对WT1表达作用。通过高致瘤性K562细胞制备裸鼠皮下荷瘤模型,分组为模型组、蟾蜍灵组及高三尖杉酯碱组,比较各组皮下瘤体积与重量、病理形态学改变及WT1蛋白表达情况。结果①半固体集落形成实验、流式及Western blot结果显示,蟾蜍灵能明显抑制K562细胞增殖,阻滞细胞在G0/G1期,并下调其WT1蛋白表达,呈剂量依赖性；②蟾蜍灵组和阳性对照组裸鼠肿瘤的抑瘤率均明显高于模型组(P<0．05),且蟾蜍灵组和阳性对照组裸鼠皮下瘤重量均明显低于模型组(P <0．05)；③病理切片显示,蟾蜍灵导致K562皮下瘤组织内肿瘤细胞大量坏死、凋亡,继发出血及纤维化等改变；并明显抑制K562皮下瘤组织中WT1蛋白表达水平。结论蟾蜍灵在体外可抑制K562细胞增殖及阻滞细胞周期于G0/G1期,并下调其WT1蛋白表达,在体内可明显抑制裸鼠K562皮下瘤体积和重量,导致皮下瘤组织坏死、凋亡,并可下调其WT1蛋白的表达。
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裸大鼠人子宫内膜癌模型的建立和评价
目的:建立裸大鼠人子宫内膜癌皮下瘤和宫腔原位移植瘤模型,初步观察其生物学特性.方法:体外培养子宫内膜癌细胞株Ishikawa,注射于8只雌性裸大鼠皮下,2周后处死2只成瘤裸大鼠,将皮下瘤修剪成2mm3的组织块移植入10只同种雌性裸大鼠左侧子宫内.4周后牺牲10只裸大鼠,取出左侧子宫.通过巨检、镜检、免疫组化、流式细胞仪等初步观察肿瘤的生物学特性.结果:8只雌性裸大鼠皮下均成瘤,10只雌性裸大鼠中7只左侧子宫内成瘤,免疫组化证实雌激素受体和孕激素受体在皮下瘤均有表达.流式细胞分析早期裸大鼠人子宫内膜癌的S期细胞含量为37.83%.结论:人子宫内膜癌裸大鼠皮下瘤和宫腔原位移植瘤模型成功建立,为子宫内膜癌的体内实验和新型治疗提供了较理想的动物模型.
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Cdx2逆转录病毒感染对裸鼠人胃癌皮下瘤生长的影响
目的 观察Cdx2基因过表达的重组逆转录病毒载体(pLXSN-Cdx2)对裸鼠人胃癌皮下瘤生长的影响.方法 构建重组逆转录病毒载体pLXSN-Cdx2,建立裸鼠人胃癌皮下瘤模型,将30只裸鼠随机分为pLXSN-Cdx2组、空载体逆转录病毒颗粒pLXSN组和对照组,每组10只.向3组动物肿瘤内分别注射pLXSN-Cdx2、pLXSN或生理盐水0.2 mL,共7次,测量各组肿瘤体积的大小；15 d后处死裸鼠,显微镜下观察移植瘤组织形态变化,应用RT-PCR检测肿瘤中Cdx2基因mRNA的表达,TUNEL检测细胞凋亡指数.结果 pLXSN-Cdx2构建成功；与对照组和pLXSN组比较,pLXSN-Cdx2组的肿瘤生长速度明显减慢(P＜0.05)；pLXSN-Cdx2组肿瘤体积为(14.15±2.17)mm3,明显低于pLXSN组和对照组的肿瘤体积(P＜0.05)；pLXSN-Cdx2组Cdx2 mRNA的表达量为(2.71±0.65),高于pLXSN组和对照组(P＜0.05).pLXSN-Cdx2组的凋亡指数(14.4±5.3)％显著高于pLXSN组(7.6±2.2)％和生理盐水组(7.7±2.3)％(P＜0.05).结论 重组逆转录病毒载体pLXSN-Cdx2瘤内注射可抑制裸鼠人胃癌皮下瘤的生长.
