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OsmY文献资料
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OsmY缺失对伤寒沙门菌在高渗应激早期基因表达的影响
目的:研究伤寒沙门菌OsmY在高渗应激早期对其他基因表达的调节.方法:通过同源重组的方法利用自杀质粒制备伤寒沙门菌osmY基因缺陷变异株;采用伤寒沙门菌全基因组芯片比较野生株和osmY基因缺陷变异株在高渗应激早期的基因表达差异,并对其中部分表达差异基因进行实时定量PCR验证.结果:成功制备伤寒沙门菌osmY基因缺陷变异株;基因芯片结果显示,在高渗应激早期,与野生株相比,伤寒沙门菌osmY基因缺陷变异株有128个基因表达下调,有27个基因表达上调.实时定量PCR与芯片结果一致.结论:OsmY可作为一调节因子在伤寒沙门菌高渗应激早期对基因表达起重要调节作用.
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伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY的克隆表达与多克隆抗体的制备
目的:克隆表达伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY并制备多克隆抗体.方法:通过PCR技术从伤寒沙门菌基因组DNA中获得伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY,再将此基因片段克隆到表达载体pET22b(+)上,并转入大肠埃希菌JM109进行表达；Ni柱纯化后的OsmY蛋白作为抗原免疫家兔,并获得多克隆抗体.结果:成功制备伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY的蛋白表达菌株,并获得了纯化的OsmY蛋白,成功制备兔抗OsmY的多克隆抗体.结论:成功克隆表达了伤寒沙门菌高渗诱导基因osmY,并获得了多克隆抗体,有助于今后研究OsmY在伤寒沙门菌高渗应激中的作用.
