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上皮型钙黏素β-链接素在鼻咽原发癌和淋巴结转移癌组织中的表达差异
目的研究鼻咽原发癌和淋巴结转移癌组织中上皮型钙黏素(E-cadherin)和β-链接素(β-catenin)蛋白水平和mRNA水平表达的差异性,探讨鼻咽癌癌细胞侵袭转移的机制.方法采用蛋白印迹法、免疫组化法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测21例鼻咽原发癌和21例淋巴结转移癌组织中上皮型钙黏素和β-链接素蛋白和mRNA的表达水平.结果 (1)21例淋巴结转移癌组织中,癌细胞的上皮型钙黏素蛋白表达率(50%)和蛋白印迹相对强度(65.0±15.9)均明显低于21例原发癌组织中的表达水平(80%和206.7±32.7),且淋巴结转移癌组织中的上皮型钙黏素mRNA表达水平也低于原发癌组织,差异有显著性(P<0.05);(2)β-链接素在鼻咽原发癌和淋巴结转移癌组织中均有较高的蛋白表达量,其mRNA表达水平在不同组织中的表达也相似,均未显示有差异性(P>0.05);(3)鼻咽原发癌和淋巴结转移癌组织中癌细胞表达上皮型钙黏素和β-链接素未显示相关性(P>0.05).结论 (1)在鼻咽癌组织中,导致癌细胞侵袭转移的一个重要因素可能是上皮型钙黏素的表达下调.(2)因突变失活而积聚于细胞内的β-链接素蛋白可能也在协同促进鼻咽癌细胞侵袭转移过程中起作用.
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Cx26基因修饰对人胃癌MGC-803细胞增殖和迁移能力的影响
目的 探讨Cx26基因对人胃癌MGC-803细胞的生长、细胞周期及迁移的影响.方法 将重组表达质粒pBudCE4.1-Cx26转染至人胃癌MGC-803细胞(转染组),另设空白组(未经任何特殊处理)和对照组(空载质粒组).收集40例胃癌组织及对应癌旁正常组织.通过RT-PCR和Western blot法测定细胞及组织中的Cx26 mRNA及蛋白表达水平.划痕染料示踪法检测细胞间通讯功能.采用MTF比色法及Transwell迁移实验分别检测转染后细胞增殖及迁移的变化,Western blot法检测各组细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase 3)表达情况,流式细胞仪检测转染后细胞周期变化.结果 Cx26基因mRNA和蛋白在人胃癌组织中的表达量低于癌旁组织,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).Cx26基因修饰人胃癌MGC-803细胞后,转染组与对照组和空白组比较,Cx26 mRNA和蛋白表达升高(均P＜0.05),细胞传递的荧光强度亦升高(P＜0.01).转染后48 h、72 h细胞增殖均受到抑制(均P＜0.01).转染24 h后,转染组MGC-803细胞穿膜数低于对照组和空白组(均P＜0.01),细胞凋亡相关蛋白Bax和caspase 3表达均增加(均P＜0.01),Bel-2表达各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).转染后48 h,转染组MGC-803细胞被阻滞在G2期(P＜0.01).结论 转染Cx26基因对人胃癌MGC-803细胞的增殖与迁移具有抑制作用,对细胞凋亡有促进作用,并可阻滞细胞在G2期.
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密封蛋白4与高危型人乳头瘤病毒联合检测对于高级别鳞状上皮内病变及宫颈鳞癌的诊断价值
目的:探讨密封蛋白4(CLDN4)在不同级别宫颈病变组织中的表达及其与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)联合检测的意义.方法:选取2015年6月至2016年12月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院妇科门诊就诊且经病理组织学检查证实的低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)和宫颈鳞癌患者的子宫颈组织标本各30份,同时选取30例慢性宫颈炎患者的子宫颈组织标本作为对照组.采用免疫组织化学法检测子宫颈组织中CLDN4蛋白表达,实时定量PCR检测HR-HPV,液基细胞学检查(TCT)检测宫颈脱落细胞学改变.采用ROC曲线分析比较TCT联合HR-HPV与CLDN4联合HR-HPV检测对HSIL和宫颈鳞癌的诊断价值.结果:随着宫颈病变程度加重,CLDN4表达阳性率上升(r=0.832,P<0.05).HR-HPV感染与CLDN4表达共阳性主要出现在HSIL和宫颈癌组.TCT联合HR-HPV和CLDN4联合HR-HPV检测诊断HSIL和宫颈鳞癌的AUC分别为0.683和0.633.TCT联合HR-HPV检测诊断HSIL和宫颈鳞癌的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为100.0％、36.7％、61.2％、100.0％、46.7％;CLDN4联合HR-HPV检测诊断HSIL和宫颈鳞癌的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为96.7％、30.0％、58.0％、90.0％、55.0％.结论:CLDN4表达与宫颈鳞癌及癌前病变的发生和发展相关,CLDN4联合HR-HPV检测可指导临床HSIL及宫颈鳞癌的诊断和治疗.
