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循环微囊泡miR-27 a参与脑缺血小鼠血脑屏障紧密连接损伤的机制研究
目的 研究脑缺血小鼠循环系统中,循环微囊泡miR-27a对血脑屏障紧密连接损伤的作用机制.方法 构建小鼠大脑中动脉栓塞模型,离心超滤法分离缺血2h脑组织上清液中微囊泡,采用透射电镜观察微囊泡形态,并检测微囊泡直径.在脑缺血2 h模型基础上,股静脉注射5 mg·kg-1微囊泡,TTC染色观察缺血脑组织梗死体积;HE染色检测紧密连接蛋白occludin和claudin-5变化;Western blot检测oc-cludin、claudin-5、TLR4、NF-κB、p38蛋白表达水平;ELISA法测定IL-1β和TNF-α含量.结果 从缺血小鼠脑组织中分离的微囊泡为圆形或近圆形的双层膜结构小囊泡,颗粒平均直径为160 nm,符合微囊泡的形态学特征.与缺血组比较,注射微囊泡miR-27a能够加重缺血小鼠脑组织损伤,进一步增加脑组织梗死体积,降低缺血脑组织中occludin和claud-in-5蛋白表达,上调TLR4表达,激活NF-κB、p38蛋白的磷酸化,IL-1β 和TNF-α 释放增多;而给予阻断剂antagomiR-27a能够减轻小鼠脑组织损伤,抑制TLR4、NF-κB、p38蛋白的活化.结论 微囊泡miR-27a可明显增加缺血小鼠脑组织损伤,加重缺血脑组织紧密连接损伤,其机制与上调缺血脑组织中TLR4、NF-κB、p38蛋白的磷酸化,释放IL-1β 和TNF-α相关.
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循环微粒对口腔癌进展的作用机制研究
目的 比较正常人和口腔鳞状细胞癌患者循环微粒的含量,并探究循环微粒在口腔癌进展中的作用.方法 差速离心法收集正常人和口腔癌循环微粒.流式细胞术检测循环微粒的浓度;MTT法和EdU实验检测细胞增殖活性,划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;裸鼠移植瘤模型检测循环微粒对肿瘤细胞体内成瘤的影响.结果 口腔癌患者循环微粒的含量比正常人的高,且循环微粒的浓度与口腔癌患者血液高凝状态密切相关.口腔癌患者来源的循环微粒促进口腔癌细胞增殖、迁移、侵袭和体内成瘤.结论 口腔癌患者来源的循环微粒促进口腔癌细胞增殖、迁移、侵袭和体内成瘤,在口腔癌的发生、发展中起重要作用.
