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姜黄素对H2O2损伤PC12细胞的保护作用
目的探讨姜黄素(curcumin,Cur)对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用.方法以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型,采用甲氮甲唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5diphenyltetrazolium bromide, MTT)法检测细胞增殖状况,碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测细胞凋亡,罗丹明123(Rhodamine123,Rh123)染色FCM检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial potential membrane,△Ψm),双氢罗丹明123(Dihydrohodamine123,DHR)染色FCM检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)的含量.结果 20和40 μmol·L-1 Cur均可使25～400 μmol·L-1 H2O2作用24 h后对PC12细胞生长的抑制率下降,可明显抑制100和200 μmol·L-1 H2O2作用24 h后对PC12细胞凋亡的诱导作用和对PC12细胞△Ψm的降低作用,可明显降低100和200μmol·L-1 H2O2作用12 h后细胞内ROS的含量.结论 Cur对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用,其机制可能与降低细胞内ROS的含量,进而抑制△Ψm的降低有关.
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腺嘌呤核苷酸转位酶1在亚硒酸钠抑制脑胶质瘤中的作用机制
目的:研究腺嘌呤核苷酸转位酶1(ANT1)在亚硒酸钠抑制脑胶质瘤生长中的作用机制.方法:将不同浓度的亚硒酸钠(0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L)侵染人脑胶质瘤细胞SHG44,MTT比色法检测亚硒酸钠对SHG44的增殖的影响；PCR法检测ANT1的表达；提取细胞线粒体后通过观察线粒体的荧光强度,检测SHG44的线粒体膜电位和膜通道开放程度.结果:亚硒酸钠对人脑胶质瘤细胞具有明显的抑制作用,2.0及4.0 μmol/L染硒组差异均有统计学意义(P＜0.05),ANT1的表达在各染硒组均出现显著性增加(P＜0.05)；线粒体膜电位在2.0及4.0μmol/L染硒组显著降低(P＜0.05),线粒体膜通道转运孔开放程度在1.0、2.0及4.0μmol/L组显著增高(P＜0.05).结论:亚硒酸钠能抑制人脑胶质瘤细胞SHG44地生长,并伴随线粒体膜电位降低和线粒体膜通道转运孔开放程度增加,ANT1可能参与了其作用机制.
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UCP2 与细胞凋亡
解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)是线粒体内膜上的一种蛋白,基因定位于11号染色体上(11q13)上,基因全长8.4 kb,有8个外显子.它对线粒体的质子泵(proton pump)有调节的作用.它的调节能够从多种途径减缓,甚至抑制细胞的凋亡(apoptosis)和线粒体的损伤.其原因是UCP2能够减少△Ψm(线粒体跨膜电位)的变化,减少了线粒体ca2+ 的沉积和活性氧类(reactive oxygen species,ROS)的产生,减少线粒体通透性转换孔(permeability transition pore,PTP)的开放和细胞色素C的释放.此外,UCP2还能抑制某些因素对NF-kB通路系统的激活,从而阻止细胞的凋亡.
