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唯一健在的中国远征军女兵
1942年,中国远征军第一次远征失败,数万名远征军穿越原始莽荒的"野人山"回国,因为疾病流行,缺医少食,再加上瘴气弥漫,这短短数百里的丛林之路,竟变成了吞噬至少一万五千名远征军将士的死亡之路,由此也写下世界军事史上悲惨的一幕.
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B淋巴细胞吞噬功能研究进展
以往的观点认为只有巨噬细胞、单核细胞、粒细胞和树突状细胞是专职的吞噬细胞,而B细胞作为免疫系统的抗体产生细胞,虽然能够产生特异的免疫球蛋白与抗原结合,却不具备吞噬能力.但近的研究指出硬骨鱼类(彩虹鳟鱼)和两栖类(爪蟾)的B细胞可以吞噬颗粒抗原,首次揭示了进化上较为原始的B细胞同样具有吞噬能力.众多研究提示哺乳动物B-1 B细胞很可能具有吞噬能力.
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慢病毒介导SRB-1受体基因沉默对人脑小胶质细胞吞噬Aβ蛋白能力的影响
目的:利用慢病毒载体筛选人脑小胶质细胞(HM1900)清道夫受体SRB1基因敲减稳定细胞系,检测该细胞系对AD致病蛋白Aβ的吞噬水平变化.方法:采用反转录PCR确认人脑小胶质细胞(HM 1900)SRB1 (GeneID:949)基因表达情况,利用软件设计三组不同序列的针对人SRB1基因的慢病毒shRNA干扰载体,包装为慢病毒感染HM1900细胞,实时荧光定量PCR检测各慢病毒干扰载体的靶基因干扰效率.选用干扰效果佳的RNA干扰慢病毒筛选并获得SRB1基因敲减细胞系,稳定传代后用realtime-PCR检测SRB1受体表达下调情况.通过蛋白内吞实验测定基因敲减后该细胞系对病理蛋白Aβ的吞噬能力,与正常小胶质细胞进行比较.结果:利用筛选出的干扰载体完成对HM1900细胞系的SRB1基因敲减,荧光定量PCR检测显示SRB1基因在靶细胞HM1900中表达抑制率达83.7％.蛋白内吞实验显示该基因敲减细胞系对病理蛋白Aβ的吞噬能力下降到对照组的57％(P＜0.05).结论:通过慢病毒载体成功建立SRB1基因稳定敲减的人脑小胶质细胞系,SRB1受体参与了小胶质细胞对病理蛋白Aβ的吞噬及清除过程.
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神经干细胞上清液对骨髓巨噬细胞的调控作用
目的 观察不同来源的神经干细胞(NSCs)上清液对骨髓巨噬细胞的增殖、吞噬及分泌细胞因子的影响,为探讨NSCs治疗疾病提供新的思路.方法 采用原代培养及胚胎干细胞(ESCs)来源NSCs的上清液处理骨髓来源的巨噬细胞,通过SRB比色法检测细胞增殖情况;油红及免疫荧光染色观察巨噬细胞的吞噬能力;ELISA法检测各组巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-6及IL-10的表达情况. 结果 骨髓来源细胞在含L929上清液的培养液中培养7 d可获得良好的巨噬细胞.NSCs培养基组、NSCs上清组和ESC-NSCs上清组巨噬细胞增殖率分别为(100±1.2)%,(135±2.1)%和(132±3.4)%,油红阳性细胞百分率分别为(50.7±4.5)%,(92.2±3.7)%和(89.5±4.3)%.相比NSCs培养基组,NSCs上清组和ESC-NSCs上清组的IL-6、IL-10含量增高,而TNF-α含量下降(P<0.05).结论 原代培养的NSCs、ESC来源的NSCs上清液均可促进骨髓巨噬细胞增殖,增强其吞噬能力.
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短葶山麦冬多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响
目的 观察短葶山麦冬多糖(LMP)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响.方法 分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞用不同质量浓度LMP(62.5、125、250、500 μg/mL)共同培养,检测巨噬细胞吞噬中性红试验,趋化作用和分泌TNF-α、IL-6的功能.结果 不同质量浓度的LMP能显著增强巨噬细胞吞噬能力和趋化作用,促进TNF-α、IL-6释放.结论 LMP能增强小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能.
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A类Ⅰ型清道夫受体调节小鼠腹腔巨噬细胞抗肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌感染
本研究旨在探讨A类Ⅰ型清道夫受体（scavenger receptor class A type I ，SR‐AI）在呼吸道感染常见病原体肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌感染过程中的免疫调节功能。以肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌临床分离株与野生型小鼠和 SR‐A I－／－小鼠腹腔原代巨噬细胞互作，研究SR‐AI在吞噬和炎症反应中的作用。荧光染料染色菌体及检测胞内荧光强度，数据显示 SR‐A I敲除后巨噬细胞对肺炎克雷伯菌的吞噬能力下降，但对铜绿假单胞菌的吞噬能力升高。采用实时定量荧光聚合酶链反应检测相关炎症因子mRNA水平，发现 SR‐A I敲除后肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌刺激巨噬细胞引发的炎症反应均增强。结果表明，SR‐AI参与巨噬细胞对肺炎克雷伯菌的吞噬，但不参与对铜绿假单胞菌的吞噬，且可能抑制了肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌引发的炎症反应。
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心肌细胞吞噬聚乳酸-乙醇酸纳米粒子的形态学实验
目的探讨心肌细胞吞噬聚乳酸-乙醇酸(polylactic-polyglycolic acid,PLGA)纳米粒子的形态学机理,制备组织细胞吞噬纳米粒子的相关模型,为纳米粒子作为包载各类药物或基因载体提供实验形态学依据.方法:将制备的PLGA纳米粒子加入生理盐水中,超声振荡成注射用纳米粒子悬浮液后,注射至活体家兔心肌组织内,48小时后取材切片、电镜下观察.结果:心肌细胞胞质内及胞核内可见大量被吞噬的纳米粒子,并且出现了PLGA纳米粒子被吸收、降解的迹象.结论:心肌细胞完全可以通过吞噬方式大量摄取;PLGA纳米粒子,将PLGA纳米粒子作为向心肌细胞内转运某种药物或基因的载体是完全可行的.
关键词： 心肌细胞 纳米粒子 聚乳酸-乙醇酸共聚物 吞噬 -
系统性红斑狼疮患者巨噬细胞表型和功能初步研究
为了比较健康者与SLE患者巨噬细胞表型和吞噬功能的不同,收集性别、年龄匹配的健康对照者及SLE患者外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞,磁珠分选CD14+单核细胞,巨噬细胞集落刺激因子诱导7d,分化为成熟巨噬细胞.FACS检测巨噬细胞表面CD163表达.取健康人CD4+T细胞标记CFSE,在抗CD3、CD28抗体刺激下,以5∶1比例分别与SLE和HC巨噬细胞共培养4d,FACS检测CD4+T细胞增殖比例.紫外辐照Jurkat T细胞株诱导人来源凋亡细胞,将pHrodo Green标记的凋亡细胞(5∶1)与SLE和HC巨噬细胞共培养2h,FACS检测pHrodo+ CD14+巨噬细胞的百分率.结果显示,与HC相比,SLE巨噬细胞CD163表达量显著下降;SLE巨噬细胞对CD4+T细胞增殖抑制能力显著降低;SLE巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬功能显著下降.这些结果提示SLE患者巨噬细胞表型、免疫调节能力和吞噬功能存在异常,可能参与其发病.
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17β-雌二醇调节小鼠淋巴结树突状细胞的表型和吞噬功能
为探索17β-雌二醇(E2)对免疫应答能力的调节是否与树突状细胞(DC)的成熟和功能相关,用Metrizamide密度梯度离心方法分离BALB/c小鼠淋巴结内的淋巴细胞得到DC,不同浓度的E2处理DC 24 h后,使用PE标记的单抗CD11c和FITC标记的单抗MHC Ⅰ/MHC Ⅱ/CD40/CD54/CD80/CD86、IL-10/TNF-α以及右旋糖酐(dextran)双标DC,流式细胞仪分别检测其表型和胞内细胞因子的表达及吞噬能力的变化.结果显示,不同浓度的E2处理DC 24 h后,MHC分子、黏附分子CD54和共刺激分子CD86与对照组相比显著提高,而CD40显著降低,但CD80的表达无明显改变.胞内细胞因子IL-10和TNF-α的表达水平随E2的处理而显著增加,其中TNF α的变化呈剂量依赖性.与对照组相比,DC的吞噬能力随E2的处理浓度增加而显著降低.以上结果表明,E2能够改变DC的成熟和功能,这提示E2对机体的免疫应答的影响可能通过DC的改变而改变.
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柘树根多糖的体外免疫增强作用
柘树[Cudrania tricuspidata(Carr)Bur]属桑科植物,在<本草纲目>等资料中记载可治疗关节疼痛、黄疸等.研究了提取的三种柘树根多糖直接及协同有丝分裂原ConA或LPS对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响和三种多糖对腹腔巨噬细胞(MФ)吞噬功能的影响.
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利奈唑胺与万古霉素对小鼠巨噬细胞RAW 264.7吞噬功能的影响
目的 探讨利奈唑胺和万古霉素对金葡菌肽聚糖(PG)刺激的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7吞噬功能的影响.方法 在激光共聚焦显微镜和荧光显微镜下观察巨噬细胞吞噬荧光微球的过程.将小鼠巨噬细胞系分为3组:对照组、PG组和抗菌药组(低、中、高剂量),用流式细胞仪计算吞噬率和吞噬指数.结果 异硫氰酸荧光素(FITC)标记的微球可被吞入巨噬细胞内.与对照组相比,经PG刺激后,小鼠巨噬细胞吞噬功能明显上升(P＜0.01).对比PG组,各剂量利奈唑胺组吞噬能力降低(P＜0.05),中、高剂量万古霉素组吞噬能力增高(P＜0.05),低剂量万古霉素组吞噬功能无明显变化(P＞0.05).结论 亚MIC和治疗浓度的利奈唑胺能抑制金葡菌PG刺激引起的吞噬功能的增高,而治疗浓度的万古霉素能增强其吞噬功能.2种药物对吞噬功能不同影响的临床意义尚待阐明.
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阿奇霉素对健康成人外周血中性粒细胞功能的影响
目的:探讨阿奇霉素对健康成人外周血中性粒细胞(PMN)功能的影响.方法:以不同浓度的阿奇霉素工作液(终浓度为0.05、0.1、 0.5、 1.0、 10.0和20.0 mg /L)处理PMN后,分别以DAK比色法、Trinder反应和物理学方法检测PMN的吞噬功能、趋化活性、细胞内髓过氧化酶(MPO)活性和NBT还原活性的变化.结果:低浓度时(＜1.0 mg /L)阿奇霉素可抑制PMN的趋化和MPO活性(P<0.05),而高浓度时则可增强其活性(P<0.05),对吞噬和NBT还原功能则随阿奇霉素的作用浓度呈剂量依赖性关系(P<0.05, r=0.887).结论:阿奇霉素可增强人外周血中性粒细胞的非特异性免疫功能.
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胆汁酸膜受体TGR5在小鼠骨髓来源的树突状细胞中的表达及其相关功能
目的 通过TGR5天然激动剂石胆酸(LCA)刺激小鼠树突状细胞(DC),探讨TGR5受体在DC成熟活化及吞噬功能方面的作用.方法 体外诱导小鼠骨髓细胞形成DC,LCA 30 μmol/L预处理2h后,用CFSE标记的胸腺凋亡细胞测试其吞噬功能；加入脂多糖(LPS)1 μg/mL诱导其成熟,6h后提取细胞总RNA,PCR法检测IL-12、TNF-α和IL-10等细胞因子；48 h后以流式细胞术检测细胞表面分子MHCII、CD80、CD86表达水平.组间比较采用t检验.结果 (1)LCA可以上调DC表达TGR5,并增强DC吞噬凋亡细胞功能(P＜0.05)；(2)LCA可以降低LPS引起的DC表面MHCⅡ、CD80和CD86表达水平(均P＜0.05),提示LCA可抑制DC成熟；(3)LCA可抑制LPS诱导的DC促炎性细胞因子IL-12、IL-6、TNF-α mRNA表达,而IL-10表达水平升高(均P＜0.05).结论 TGR5受体激动剂可抑制DC成熟并增强DC吞噬功能,发挥免疫调节作用.
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不同结构的中/长链脂肪乳对肿瘤病人免疫细胞的影响
目的:探讨不同结构的中/长链脂肪乳对胃肠肿瘤病人免疫细胞功能的影响.方法:①将胃肠肿瘤病人的外周血分别与不同剂量(10 mg/mL、20 mg/mL、100 mg/mL)的结构脂肪乳(STG)、物理混合的中/长链脂肪乳(MCT/LCT)在体外共同孵育2 h后.以FITC-葡聚糖(dextran)为吞噬标志,应用流式细胞技术检测中性粒细胞的吞噬率;②将分离的淋巴细胞分别在含不同剂量(10 mg/mL、20 mg/mL、100 mg/mL)的结构脂肪乳或物理混合的中,长链脂肪乳培养基中孵育24 h,应用Annexin-V/PI双染色方法测定淋巴细胞的凋亡率.结果:①在含10 mg/mL脂肪乳的培养环境中,STG组、MCT/LCT组和空白对照组的中性粒细胞吞噬率间差异无统计学意义;②在含20 mg/mL脂肪乳的培养环境中,STG组的中性粒细胞吞噬率显著低于MCT/LCT组(P=0.024),但其与空白对照组间差异无统计学意义;③在含100 mg/mL脂肪乳的培养环境中,STG组的中性粒细胞吞噬率均显著低于MCT/LCT组和空白组(P<0.05);④随着脂肪乳浓度的增加,STG组的中性粒细胞吞噬率呈下降趋势(P<0.05);⑤STG组和MCT/LCT组的淋巴细胞凋亡率不随培养环境中脂肪乳浓度增加而改变,且2组间差异无统计学意义.结论:模拟体内常用的脂肪乳剂量时,结构脂肪乳不明显改变胃肠肿瘤病人的中性粒细胞吞噬功能和淋巴细胞凋亡率.大剂量应用脂肪乳时,结构脂肪乳能抑制中性粒细胞的吞噬功能,而物理混合的中/长链脂肪乳则无此现象.
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巨噬细胞在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用
慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制目前尚未完全阐明,巨噬细胞是构成固有免疫系统细胞的异质群体,在呼吸道内大量存在,具有多种功能,可能参与COPD的发病过程.本文综述巨噬细胞在COPD发病机制中的作用研究进展.
关键词： 慢性阻塞性肺疾病(COPD) 巨噬细胞 发病机制 极化 吞噬 -
小叶黑柴胡多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响
目的 研究小叶黑柴胡多糖(BPs)对巨噬细胞免疫功能的影响.方法 收集KM小鼠腹腔巨噬细胞,用不同质量浓度的BPs溶液(10、100、200 mg·L-1)刺激,检测巨噬细胞吞噬E.colj、趋化和分泌一氧化氮(NO)的功能.结果 BPs各个浓度组均能显著促进巨噬细胞吞噬E.coli和趋化作用(P＜0.001),但对巨噬细胞分泌NO无明显影响；BPs 100、200mg·L-1可明显抑制脂多糖诱导的巨噬细胞分泌NO(P＜ 0.05).结论 BPs可增强巨噬细胞免疫功能,但能抑制脂多糖诱导的炎症介质分泌.
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小鼠巨噬细胞对钩端螺旋体56606v和56606a的吞噬及炎症应答的比较研究
目的·比较问号钩端螺旋体56606v株和56606a株对小鼠巨噬细胞的感染情况,探究致病性钩端螺旋体的致病机制.方法·用问号钩端螺旋体强毒株56606v株和减毒株56606a株分别感染C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞后,对样本进行免疫荧光染色,观察巨噬细胞对钩端螺旋体的吞噬及清除能力,并通过realtime-PCR检测感染后巨噬细胞的细胞因子的表达.结果·免疫荧光染色和realtime-PCR结果均发现在感染72 h后,56606v株仍能在巨噬细胞中存活,而56606a株不能在巨噬细胞中存活;巨噬细胞对56606v株的吞噬率高于对56606a株的吞噬率,而感染56606v株后细胞因子的表达低于感染56606a株后的水平.结论·问号钩端螺旋体强毒株56606v株能在巨噬细胞中存活,并引起较低的炎症反应,可借此逃避免疫细胞的杀伤从而引发疾病;而减毒株56606a株被巨噬细胞吞噬后则被清除,且引发较强的炎症反应,易被机体免疫细胞清除,从而不引起疾病.
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异甘草酸镁对自身免疫性肝炎单核细胞免疫功能影响的实验研究
目的 研究异甘草酸镁对自身免疫性肝炎(AIH)患者单核细胞吞噬能力和抗原递呈功能的影响.方法 体外培养经密度梯度离心法获得的AIH患者(AIH组)及健康对照者(对照组)的外周血单个核细胞(PBMCs),添加不同浓度异甘草酸镁处理24 h,流式细胞仪测定HLA-DR+和CD80+细胞百分比.将经CD14单克隆磁珠抗体分选提纯后的PBMCs与FITC标记的大肠杆菌共培养,荧光显微镜观察并计算吞噬率和吞噬指数,流式细胞术检测加以验证.结果 与对照组比较,AIH组(未加药)PBMCs的HLA-DR+和CD80+细胞百分比、细胞吞噬率及吞噬指数明显降低,差异均有有统计学意义(P＜0.01).在对照组中,与空白组比较,异甘草酸镁组PBMCs的HLA-DR+和CD80+细胞百分比、吞噬率及吞噬指数升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);在AIH组,与空白组比较,异甘草酸镁组(1、10 mg/mL) PBMCs的HLA-DR+和CD80+细胞百分比、吞噬率及吞噬指数显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 异甘草酸镁能够提高AIH患者减弱的单核细胞抗原递呈功能和吞噬能力,提示异甘草酸镁具有调节AIH患者单核细胞免疫功能的作用.
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致病性钩端螺旋体对豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制作用
目的 通过比较不同毒力钩端螺旋体对豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨固有免疫在钩端螺旋体病发病机制中的作用.方法 用三种不同毒力的钩体(致病性问号钩端螺旋体赖型有毒株Lai株、赖型无毒株IPAV株以及非致病性双曲钩端螺旋体Patoc型PatocⅠ株)分别感染体外培养的豚鼠腹腔巨噬细胞,并分别于感染后0.5、1.5、3和6 h加入热灭活表皮葡萄球菌孵育30 min,通过计算巨噬细胞对灭活表皮葡萄球菌的吞噬率和吞噬指数,检测钩体对巨噬细胞吞噬功能的影响;感染后3 h透射电镜观察巨噬细胞对钩体的吞噬、降解和细胞超微结构的变化;用激光共聚焦显微镜观察细胞对钩体的吞噬和巨噬细胞细胞骨架的变化. 结果 3 h和6 h Lai株、IPAV株及PatocⅠ株感染组与对照组相比吞噬率和吞噬指数均明显降低(P＜0.05);巨噬细胞对三种不同毒力的钩体均有吞噬作用,但有毒株Lai株可以抵抗巨噬细胞的杀伤和降解,而无毒株IPAV和非致病株PatocⅠ株则无此功能. 结论 致病性钩体可以抵抗巨噬细胞的杀伤和降解,逃避固有免疫反应的清除作用,有利其在机体内播散.
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巨噬细胞对聚乙烯和钛合金颗粒吞噬反应的差异性
目的观察巨噬细胞对超高分子量聚乙烯(UHMWPE)颗粒和钛-6铝-4钒(Ti-6Al-4V)颗粒吞噬反应的差异.方法将巨噬细胞分别在含UHMWPE和Ti-6Al-4V颗粒的培养基中培养,在不同时段观察细胞吞噬颗粒的情况,并计算含有吞噬颗粒的巨噬细胞所占的比例.结果UHMWPE颗粒在培养后1 h即被巨噬细胞吞噬,且随时间延长,含有吞噬颗粒的巨噬细胞比例快速大量增加.而Ti-6Al-4V颗粒引起巨噬细胞吞噬现象出现的较晚,且在相同时段内含颗粒细胞的比例相对较小.结论UHMWPE颗粒能够引起巨噬细胞迅速而显著的吞噬反应,可能是其导致假体周围骨溶解的原因之一.
