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悬浮培养GLC-82肺肿瘤细胞积聚体与蛋白激酶FAK、AKT、ERK和SRC活化的关系
背景与目的:蛋白激酶FAK部分介导肿瘤细胞在悬浮培养下细胞积聚体的形成,从而阻止细胞发生凋亡和促进细胞增殖,但是参与细胞积聚体形成的FAK下游通路尚不清楚.本研究旨在研究蛋白激酶FAK及其可能的下游分子ERK、AKT和SRC活化在悬浮状态肺癌GLC-82细胞积聚中的作用.方法:用polyHEMA悬浮培养观察肺正常细胞HBE和肿瘤细胞GLC-82积聚体形态;细胞凋亡用DNA琼脂糖凝胶电泳检测梯状DNA分析;细胞转化能力用软琼脂糖集落形成实验分析;磷酸化蛋白激酶水平用免疫印迹实验检测;RNA干扰实验降低FAK蛋白水平的表达.结果:GLC-82肺腺癌细胞在polyHEMA悬浮状态下能够存活和形成积聚体,肺正常细胞HBE在polyHEMA悬浮状态下发生凋亡和不形成积聚体.磷酸化FAK、ERK、AKT和SRC的水平和GLC-82积聚体有关.沉默FAK蛋白的表达,能够部分地阻断肿瘤细胞积聚体的形成,降低磷酸化ERK和AKT水平,以及降低软琼脂集落形成能力.FAK RNA干扰前后的GLC-82细胞软琼脂集落形成率分别为(12.2±1.1)%和(3.6±0.7)%(P=0.001).结论:GLC-82肺癌细胞积聚体的形成部分由FAK信号通路介导,ERK和AKT是FAK的下游通路蛋白.
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二氧化硒对肺癌细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响
背景与目的:近年研究表明硒可诱导肿瘤细胞凋亡,并且其与端粒酶活性以及肿瘤的发生密切相关.本研究旨在通过观察二氧化硒(selenium dioxide,SeO2)对肺腺癌细胞株GLC-82的体外作用,探讨SeO2对肺癌细胞的作用机制,以及细胞凋亡与端粒酶活性之间的关系.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度SeO2作用不同时间对肺癌GLC-82细胞生长的抑制作用;用TRAP-PCR-ELISA法检测SeO2作用前后GLC-82细胞端粒酶活性变化;采用流式细胞术(FCM)观察SeO2作用后GLC-82细胞的凋亡率;通过琼脂糖凝胶电泳法观察DNA梯状带;通过光镜和透射电镜观察GLC-82细胞的形态变化.结果:在3、10、30μmol/L SeO2作用下,GLC-82细胞的生长和端粒酶活性明显受抑制,24 h时细胞生长抑制率分别为0.7%、12.8%、31.8%,72 h时分别达15.1%、51.2%、61.1%;24 h时端粒酶活性分别为1.173±0.029、1.127±0.067、1.050±0.098(P＜0.05),48h时为1.150±0.026、1.047±0.060、0.950±0.036(P＜0.05),未处理组24 h和48 h时端粒酶活性分别为1.227±0.032、1.167±0.023;流式细胞仪检测二倍体峰前出现凋亡峰,30 μmol/L SeO2与GLC-82细胞共育24 h、48 h、72 h后细胞凋亡率分别为0.7%、3.8%、12.1%;琼脂糖凝胶电泳显示细胞凋亡典型梯状条带;SeO2作用后,GLC-82细胞呈典型的凋亡细胞形态.结论:SeO2通过抑制端粒酶活性、诱导细胞凋亡而抑制肺腺癌细胞株GLC-82细胞的生长,其抑制作用具有时效性和量效性.
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O-甲基芒籽碱对人肿瘤GLC-82、HL60细胞抑制的影响
目的 观察O-甲基芒籽碱抗肿瘤的效果.方法 以MTT法观察不同浓度O-甲基芒籽碱对人肿瘤GLC-82、HL60细胞抑制的影响.结果 10、100和1 000μmol/L O-甲基芒籽碱能抑制GLC-82细胞的增殖,其D值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);0.1、1、10、100和1 000μmol/L O-甲基芒籽碱能抑制HL60细胞的增殖,其D值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01).O-甲基芒籽碱对GLC-82,HL60的半数抑制浓度分别为83.31、65.59μmol/L.结论 O-甲基芒籽碱可抑制人肿瘤GLC-82、HL60细胞的增殖,具有一定的抑瘤作用.
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氧代克斑宁对人肿瘤细胞GLC-82、HL60增殖的影响
目的:探讨氧代克斑宁抗肿瘤作用.方法:以MTT法观察氧代克斑宁在不同浓度下对人肿瘤GLC-82、HL60细胞增殖的影响.结果:氧代克斑宁在1001.tM浓度时对肺腺癌GLC-82细胞株具有明显抑制作用,而对人白血病HL60细胞株在1μM浓度时即显示极强的抑制作用.氧代克斑宁对GLC-82,HL60的IC50分别为109.17、86.61μM.结论:氧代克斑宁可抑制人肿瘤细胞株GLC-82、HL60增殖.
