首页 > 文献资料
-
成蚊形态学鉴定能力验证研究
目的 通过设计组织能力验证活动,了解我国实验室成蚊形态学鉴定技术能力.方法采用幼虫孵化的办法获得样品,15只为1组,设计3种目标蚊种、4种干扰蚊种.结果共有境内外28家实验室参加了能力验证活动,初测满意率85.7％.目标蚊种共发放213只,总正确率为96.2％.干扰蚊种共发放207只,鉴定总正确率:81.2％.结论实验室总体鉴定能力良好,对于按蚊等种类需要加强技术培训.
-
云南省江城县苏岛库蠓形态学和分子生物学鉴定
目的 采用形态学和分子生物学方法对在云南省江城县采集的库蠓进行鉴定,明确该库蠓的准确分类.方法 2017年9月在云南省江城县采集蠓虫样本,采用不损伤库蠓形态的方法提取基因组DNA,用CO Ⅰ基因和ITS-1基因特异引物进行PCR扩增和序列测定,采用Clustal X、DNAStar和Mega 6.1等软件进行核苷酸同源性和系统进化分析.同时将库蠓虫体压片,在体视显微镜下进行形态学鉴定,并计算AR、HR、PR、CR和TR1、TR2、TR3等数值.结果 在江城县采集15只库蠓,均具有两复眼相连接,小眼面间无柔毛,触角15节,第3、11～15节分布有嗅觉器,翅面翅基、径中、径端、径5室、中4室各有1个淡斑,中1室、中2室分别有2个和3个淡斑,其中基淡斑大,向后延伸至臀室基部翅缘;腹部有2个发达受精囊不等大,PR=3.10:±0.48,与苏岛库蠓PR值差异无统计学意义(t=1.79,P＞ 0.05).遗传进化分析显示,在ITS-1基因进化树上江城县采集的15只库蠓与苏岛库蠓位于同一分支内,核苷酸同源性在96.8％～99.3％之间,而与其他库蠓核苷酸同源性均低于94.2％;在CO Ⅰ基因进化树上15只库蠓形成一个独立进化簇,这15只库蠓核苷酸同源性在99.4％以上.结论 15只江城采集的库蠓均为苏岛库蠓,其种内变异较小.本研究增添了苏岛库蠓种类鉴定所需要ITS-1基因和CO Ⅰ基因序列,为库蠓快速鉴定和遗传进化研究提供了序列信息.
关键词： 苏岛库蠓 细胞色素氧化酶Ⅰ基因 间隔区-1基因 分子鉴定 形态学鉴定 -
动、植物性食物中毒诊断标准探讨
根据现行动、植物性食物中毒诊断标准,确诊条件之一须取得形态学鉴定资料,但因难以取得该资料,对依法确诊带来困难.形态学鉴定条件执行难点和问题有:缺少鉴定机构、方法和标准;无剩余中毒食物或加工后形态破坏;普通市售有毒动、植物食物及常见误食的有毒动、植物的鉴定价值小;动、植物加工品形态学鉴定困难;同一有毒成分存在不同种类生物问题.为此,提出完善诊断标准的建议:形态学鉴定应作为补充性诊断标准;实脸室诊断资料范围应扩大;对诊断标准总则表述提出建议.并探讨建议国家应出台有毒动、植物食品目录,加强毒素及人体生物样品等实脸室指标及检测方法研究.
-
临床少见丝状真菌的实验室诊断
目的：通过对临床少见丝状真菌的分离和分析鉴定，探讨尖端赛多孢子菌、裂褶菌、短柄帚霉、匍枝根霉、茄病镰刀菌等临床不常见丝状真菌的实验诊断方法，为临床明确诊断真菌感染种类提供科学依据。方法从临床标本培养出的5株真菌用形态学方法未能作出准确鉴定，通过聚合酶链反应（PCR）和基因测序方法分析核糖体转录间隔区域 ITS 和 ITS2序列，在 NCBI 网站应用 Blastn 对获得的基因序列进行同源性分析及利用 GenBank 中的系统发育软件自动生成系统发育树，以确定丝状真菌的种。结果rDNA-ITS 序列分析结合形态学分析，5株菌均可鉴定到种的水平，鉴定结果分别是：尖端赛多孢子菌、裂褶菌、短柄帚霉、匍枝根霉和茄病镰刀菌。结论传统形态学方法，极易受检验人员经验水平影响，对于罕见菌株甚至不能作出鉴定，利用真菌的 ITS 序列的特异性，可快速、准确将大部分丝状真菌鉴定到种水平。
-
一种高纯度原代神经元培养和高效率转染的方法
背景:神经元的培养和细胞转染技术是在体外研究神经元生长发育及生理病理机制的重要手段,但目前原代培养的皮质神经元往往纯度不高、转染效率不高.目的:建立一种简单、高效、稳定的原代神经元培养及转染方法.方法:无菌条件下分离新生1 d SD大鼠大脑皮质,经0.25％的胰蛋白酶消化后离心,制备成单细胞悬液,以5×109 L-1细胞浓度接种至含神经元专用培养基的24孔细胞培养板进行原代培养,并于倒置显微镜下观察神经元形态的变化,使用神经元特异性标志物Tuj1和MAP2对培养的细胞进行鉴定;利用人工脂质体转染神经元,观察神经元转染效率.结果与结论:①体外培养的原代神经元具有较高的纯度,在培养第7天神经元特征明显,突起相互接触形成神经元网络,并表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP2;利用人工脂质体转染神经元,转染效率较高;②采用该方法进行原代神经元培养,能够获得稳定的、高纯度的原代神经元;人工脂质体亦可高效率转染原代神经元.
-
CT三维成像技术研究中国东北地区成人颅骨的性别判定
人类学和法医学研究中都常以骨骼作为获取信息的来源对象，其中性别的鉴定是个体识别的首要步骤，骨骼的性别鉴定以形态学鉴定为好［1］，而颅骨和骨盆的形态学性别鉴定是较为可靠的［2］。国内外众多学者对颅骨的形态规律进行过研究和测量，但基于头部 CT 图像的测量数据记录是缺少的。国际人类学界也表示，人类骨骼形态学指标的测量数据及其推断公式需10-15年更新，进而达到刑事侦查的要求［3］。另外，地域差异、社会形态等的不同都将是对骨骼形态学产生差异的重要原因［4，5］。本研究针对东北地区国人颅骨的 CT 三维重建模型进行测量，其中部分指标显示男女性别的显著性差异。积累本研究地域的颅骨解剖形态学数据资料，并总结各指标测量数据的统计学规律，对法医学、考古学、刑事侦查、影像科学和临床3D 打印等性别鉴定和临床应用具有指导意义。
-
rDNA-ITS序列分析对临床少见丝状真菌鉴定作用的评估
目的 评价内转录间隔区(ITS)的多态性序列分析(rDNA-ITS序列分析)对临床少见丝状真菌的鉴定作用,以形态学鉴定方法加以补充验证.方法 将3株待检真菌通过聚合酶链反应(PCR)扩增和基因测序方法分析rDNA-ITS序列,从GenBank获取相似序列,使用BLAST工具对rDNA-ITS序列进行对比分析,利用GenBank 中的系统发育软件自动生成系统,构建系统发育树,根据系统发育树并结合对比指标确定距离与同源性均有较大鉴定意义的对比序列,并与真菌ITS1、ITS2、26S rDNA D1/D2片段的序列分析结果及形态学鉴定结果进行比较.结果 2株菌株能通过rDNA-ITS序列分析的方法鉴定到种,另1株由于相似序列较多,需要形态学方法加以配合鉴定.rDNA -ITS序列分析相对真菌ITS1、ITS2、26S rDNA D1/D2片段有更好的真菌鉴定作用.结论 相对于传统形态学方法,利用rDNA-ITS序列分析鉴定丝状真菌不受检验人员经验水平影响,较为客观,同时由于其包含的信息量相对丰富,因此,较其他靶序列具有更好的真菌鉴定作用.但该方法也存在一定局限,因此,仍需结合形态学方法进行鉴定.
-
人体感染少见寄生虫4例鉴定分析
寄生虫实验诊断,尤其是病原学诊断仍然依托传统的形态学方法(虫卵检查、幼虫检查、成虫检查)诊断.寄生虫病的诊断技术在很多方面相对落后于病原微生物学(细菌学和病毒学)的发展.其发展历程主要经历了形态学方法、免疫学方法和分子生物学方法3个阶段.如对弓形虫、隐孢子虫的诊断,除传统方法外,还可用免疫学与分子生物学的方法进行诊断.目前在常用的聚合酶链反应(PCR)方法的基础上发展起来的荧光定量PCR方法,也开始用于寄生虫病的检测和诊断.但昂贵的仪器设备和试剂限制了该方法的推广.在基层,常见寄生虫病实验诊断,尤其是病原学诊断仍然沿用传统的形态学方法诊断.
-
结膜吸吮线虫病1例
1 临床资料患者,男,4岁,四川人,目前随父母居住在无锡.2006年7月曾先后2次由其父母用棉签从患儿双下眼睑拨弄出7条白色能蠕动的纤维样虫体,即去无锡市儿童医院就诊,在医生建议下将虫体送江苏省寄生虫病防治研究所作虫体形态学鉴定.
-
16S rRNA/ITS基因序列分析与微生物分类鉴定及其在药品微生物质量控制中的应用
经典的微生物鉴定有赖于微生物的纯培养,其在一些难培养、生长缓慢或需要特殊营养的微生物鉴定方面有明显的局限性.全自动细菌鉴定及药敏分析系统和基质辅助激光解离飞行时间质谱对微生物鉴定属表型鉴定.严重依赖仪器生产厂商提供的数据库,对类型多样的环境微生物的鉴定分型有明显缺陷.基于遗传物质的分子生物学签定技术为微生物的准确鉴定及分型提供了新的思路.16S rRNA/ITS遗传信息具有相对稳定性和易变异的双重特点,不依赖于微生物的营养及生长状态,在微生物的鉴定、分型中得到广泛应用.微生物是影响药品质量的重要因素,而药品微生物控制是药品质量控制的重要方面.本文对16S rRNA/ITS序列与微生物鉴定、分型及其在药品微生物质量控制领域中的应用进行综述,为相关工作提供参考.
-
1起家庭误食曼陀罗食物中毒事件的调查
目的 通过本次事件细致规范的调查,为以后的工作提供借鉴.方法 对家庭中就餐及未就餐人员、可疑食品原料及食品加工流程等进行流行病学调查,采集剩余原材料、到可疑原材料种植地采集植株及图片进行形态学鉴别,采集病例血液、尿液标本进行实验室诊断.结果 该事件中毒及出现反应人员均食用了伴有可疑“青菜”的面食,就餐人数4人,中毒3人,轻微反应1人,未食用者不发病;食用多的发病早、病情重,存在剂量反应关系;潜伏期为30 min至3h,中位值50 min;临床症状、体征与曼陀罗中毒符合;实验室及形态学鉴定符合.结论 该起事件是由误食曼陀罗幼苗引起的食物中毒.
-
1起误食淡玫红鹅膏菌引起的中毒调查
[目的]了解本起毒蘑菇中毒发生情况,掌握导致中毒死亡的毒蘑菇类型,确定致死毒素,以预防类似事件的发生.[方法]采用现场流行病学调查、形态学鉴定和分子生物学鉴定法,对本起中毒情况进行调查.[结果]7人误食毒蘑菇,中毒7例,其中死亡3例.由淡玫红鹅膏菌导致中毒死亡,毒素主要为α-鹅膏毒肽,损害人体肝脏.[结论]淡玫红鹅膏菌是一种剧毒蘑菇,致死率极高.
-
1株产类胡萝卜素酵母菌种的鉴定
目的 对1株产类胡萝卜素的酵母SWJS-JM1进行菌种鉴定.方法 按照《酵母菌的特征与鉴定手册》对该酵母菌进行形态鉴定及生理生化特性测定,并利用引物V9D和LS266对其基因组DNA进行扩增得到ITS序列,将扩增片段测序并且提交到NCBI网站进行Blast序列比对,分析其序列从而进行分子鉴定.结果 该菌株在酵母膏-蛋白胨-葡萄糖琼脂培养基上形成粉红色至橙红色光滑菌落,无假菌丝、掷孢子及子囊孢子,可同化葡萄糖、蔗糖等多种碳源及NaNO3、NaNO2、盐酸乙胺、盐酸尸胺4种氮源,无乙醇发酵能力.测序得扩增片段长度为1 001 bp.结论 该酵母菌为黏红酵母(Rhodotorula glutinis).
关键词： 黏红酵母SWJS-JM1 菌种鉴定 形态学鉴定 生理生化特性 rDNA -
人芽囊原虫形态学的研究进展
人芽囊原虫（B ．h ．）是一种常见的人与动物肠道寄生虫。于1849年首次报告，1912年从人体粪便中发现，根据其形态特征归属于酵母菌，并命名为人体酵母菌，其后，在哺乳类、鸟类、爬虫类、两栖类及昆虫类都得到检出。B．h．一直被认为是一种对人体无害的酵母菌，1976年有学者进一步对形态特征进行了光镜与电镜区别。根据其性质、生理和形态体征发现， B．h．严格厌氧，采用培养细菌或真菌的培养基不能生长，营养类似原虫，室温培养3 d死亡，pH 7环境生长，无细胞壁，具有伪足和原虫线粒体等特点［1］。1996年以后进行分子生物学的研究，人体分离虫株间的遗传性显示了多形态特点。目前，确定B．h．分为9个遗传子类型，另在鸟类、哺乳类同样亦可检出，确定其为人畜共患病原菌［2］。为提高B ．h ．检出率，本研究重点就B．h．形态学鉴定、方法与B．h．病进行综述。
-
一起导致脏器损害的食品中毒毒蕈动物急性毒性研究
脏器损害型毒蘑菇属剧毒毒蕈,是导致严重人体健康危害的植物性食物中毒的主要因素之一,人体食用毒蕈后主要引起肝损伤,重者肝坏死、肝衰竭,转氨酶等提示肝脏损伤的特征性生化指标呈现的增高改变,病情凶险,死亡率高.贵州由于气候温和、湿度大,是适宜蘑菇生长的地区,加上当地群众有采食野生蘑菇的习惯,故每年剧毒毒蕈食物中毒的发生率在全国居于较高水平,由于脏器损害型毒蕈食物中毒有一定假愈期,发生中毒后导致中毒的样品(尤其是鲜品)不易获得,难以及时进行生物形态学鉴定,目前又无有效的方法进行毒素检测分析,故给脏器损害型剧毒毒蕈食物中毒的调查诊断和预防控制带来了一定困难.
-
红树根际土壤微生物的群落分析
从采集自中国高桥和东寨港的红海榄和木榄根际土壤中分离微生物,有3株细菌菌株DM1411,SS,SQ被分离纯化.形态学鉴定显示DM1411为革兰氏阴性梭菌,SS,SQ分别为革兰氏阳性杆菌和革兰氏阳性弧菌.这一系列的工作为下一阶段的研究奠定了基础.
