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胶体金法和免疫荧光法检测血浆肌钙蛋白I的比较
目的 通过两种方法检测结果的比较,对胶体金法(Colloidal Gold Assay)检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)进行方法学评价,并探讨其临床应用价值.方法 应用胶体金法测定20名健康人和20例急性心肌梗死(AMI)患者的血清cTnI水平,并与免疫荧光法(IFA)检测结果相比较,系统研究胶体金法测定cTnI的敏感性、特异性、可用度.结果 胶体金法(Y)与免疫荧光法(X)具有良好的相关性(Y=0.801X-0.174,r=0.980),结果差异无统计学意义(P＞0.05).诊断敏感度、特异度、可用度分别为85.0％、95.0％、80.3％,阳性和阴性似然比分别为17.0％和15.8％,阳性预测值和阴性预测值分别为94.4％、86.4％.结论 胶体金法操作简便、结果准确可靠、自动化程度高,且检测快速,具有较高的临床可用度；cTnI对诊断AMI有高度特异性和敏感性,且持续时间较长,适合在临床工作中推广应用.
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免疫透射比浊法在AU5800全自动生化分析仪检测降钙素原的方法学评价
目的：在AU5800全自动生化分析仪上用免疫透射比浊法检测降钙素原（PCT）的方法学评价。方法通过A U 5800全自动生化分析仪来检测PC T的精密度、线性、参考区间等指标，并与酶免疫荧光法试剂盒进行相关性比较，从而评价其性能。结果该方法批内和批间精密度分别小于8％和15％；0～80 ng／m L范围内线性良好（Y＝0．9941 X＋0．1245，R2＝0．999）；正常人群的参考范围为小于0．5 ng／m L ；与酶免疫荧光法的相关性良好（Y＝0．3574 X＋0．2842，R2＝0．9607）。结论本检测方法不仅实现了 PC T检测的快速、全自动化，而且化学性能优良、操作简单，降低了临床试剂成本，适合临床推广使用。
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化学发光法检测抗核抗体特定靶抗原/抗体的临床研究
目的 为了更好地指导临床对自身免疫性疾病(AID)的诊疗,分析化学发光法(CLIA )检测抗核抗体(A N A )特定靶抗原/抗体应用价值.方法 随机从2016年6月至2017年6月该院收集的标本中选取405份作为实验对象,所有标本均分别采用CLIA和免疫荧光法(IIF)进行抗核糖核蛋白抗体(PNP) 、抗史密斯抗体(Sm)、抗干燥综合征抗原A抗体(SSA)、抗干燥综合征抗原B抗体(SSB)、抗双链DNA抗体(dsDNA)、抗核小体抗体(Nuc)和抗核糖体P蛋白抗体(Rib-P)检测,对比两种检测方法在抗体检出率、检测特异性及检测符合率等方面的差异.结果 两种检测方法在ANA特定靶抗原/抗体检测中抗体检出率和特异性相当;而且两种方法检测过程中在抗RNP 、SSA 、SSB等抗体检测中一致性良好,抗Sm 、dsDNA 、Nuc 、Rib-P等和系统性红斑狼疮具有高度特异性的抗体一致性表现一般.结论 CLIA检测ANA特定靶抗原/抗体其抗体检出率和特异性与IIF相当,且在检测抗RNP 、SSA 、SSB等抗体过程中一致性良好.
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急性下呼吸道感染及哮喘发作住院患儿病原学检测分析
目的:分析小儿急性下呼吸道感染病原学特征并探讨其与哮喘发作的相关性.方法:选取我院儿科门诊收治的2 356例急性下呼吸道感染患儿作为研究对象,取鼻咽深部分泌物,利用直接免疫荧光法对分泌物进行检测.荧光免疫实验测定患儿血清特异性IgE水平,以lgE≥0.35 IU/mL作为特异性诊断标准;流式细胞仪检测患儿血液嗜酸粒细胞(TEC)的数量.结果:(1)2 356例急性呼吸道感染患儿中,阳性病毒检出371例(15.75％).不同性别间阳性病毒检出率比较差异无统计学意义(X2=12.365,P＞0.05);不同年龄段患儿阳性病毒检出率比较差异有统计学意义,1岁以内患儿病毒阳性检出率高,随着患儿年龄增大,病毒阳性检出率越低.(2)2 356例患儿鼻咽深部分泌物共检出5种常见病毒,分别为呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(AV)、流感病毒(IFV)、副流感病毒3型(PIV3)以及鼻病毒(RV),其中RSV阳性检出率高271例(73.05％),PIV3阳性检出率次之44例(11.86％).(3)AV感染易导致患儿肺炎的发作,IFV感染易导致患儿支气管炎的发作,RSV感染易导致患儿产生毛细支气管炎,RV和IFV感染则容易引起患儿哮喘发作.结论:小儿急性下呼吸道感染与哮喘发作密切相关;RV和IFV具有特异敏感性,是引起患儿哮喘发作的主要病因.
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呼吸道合胞病毒感染的快速诊断与临床特点
呼吸道合胞病毒(RSV)是婴幼儿急性下呼吸道感染的重要的病原之一.实验室快速的病毒抗原或特异性抗体诊断能够及时指导临床明确病原,较早地采取抗病原治疗.本文采用美国Chemicon公司生产并由WHO认可的免疫荧光法快速诊断试剂盒对300例急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物进行包括RSV在内的7种常见呼吸道病毒检测,同时采用固相酶联免疫吸附(ELISA)方法检测患儿血清RSV特异性抗体,将两种方法进行了比较.并且分析RSV感染的临床特征.
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单克隆抗体池免疫荧光法快速检测感染灶中脆弱类杆菌的初步研究
目的对感染灶中的脆弱类杆菌进行快速检测.方法首次使用抗脆弱类杆菌单克隆抗体池作为诊断试剂,采用免疫荧光法直接检测感染灶中的脆弱类杆菌.结果对临床82份感染标本的检测,用厌氧培养法检测阳性者,此法检测均为阳性,其一致性85.7%.厌氧培养法阳性率为48.7%,此法阳性率为57.3%,统计学处理二者差异显著(P<0.05).结论此法特异性强,敏感性高,快速简便,避免了因细菌表面抗原变异而致单一单克隆抗体效价降低甚至"失效"的问题.且标本中细菌的存活状态对本法无影响.
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尿足细胞数量及podocalyxin蛋白与IgA肾病的相关性
目的 探讨尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达与IgA肾病发病、发展的相关性,探索IgA肾病的诊断、病情和预后评估提供的新指标.方法 采用间接免疫荧光法检测陕西省第四人民医院体检的健康人群和150例IgA肾病患者尿足细胞数量及podocalyxin蛋白表达水平,观察健康人群和IgA肾病患者尿足细胞数量差异和不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达水平差异,分析不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达与肾小球滤过率、24 h尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮等临床指标的相关性.结果 健康人群组尿沉渣细胞涂片染色标本未见尿足细胞,而IgA肾病组尿沉渣细胞涂片染色标本尿足细胞数量为每20个高倍视野(12.54±2.89);不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者的尿足细胞数量、podocalyxin蛋白表达和24 h尿蛋白定量比较,差异有统计学意义(P＜0.05),且不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=0.835 3,P＜0.05),podocalyxin蛋白表达与24 h尿蛋白定量呈负相关(r =0.886 8,P＜0.05).结论 尿足细胞数量、podocalyxin蛋白表达与IgA肾病的发病、发展密切相关.
关键词： 尿足细胞 IgA肾病 Podocalyxin蛋白 免疫荧光法 相关性 -
检测淋病奈瑟氏菌四种方法的比较
对我院收治的100例泌尿、生殖系统感染疾病患者行分泌物淋球菌检查,分别采用试纸法、普通染色镜检法、免疫荧光法、培养法进行检测,并对检测验结果进行分析报道如下:
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河北省恙虫病的病原学研究
目的：通过病人、宿主和媒介标本的病原学分析，阐明河北省恙虫病疫源地。方法：采集疫源地内病人血标本、鼠和恙螨标本，采用昆明种小白鼠传代分离法，脏器涂片Giemsa染色和脏器速冻切片用免疫荧光法镜检恙虫病立克次体Rickettsia tsutsugamushi，Rt)，用PCR方法检测Rt核酸，用免疫荧光法检测特异性血清抗体和血清学分型。结果：捕捉鼠肝脾肿大率67.7%，血清抗体阳性率22.0%。96.9%的捕捉鼠肝脾标本、88.9%的病人血标本及小板纤恙螨标本引起实验鼠发病和死亡，实验鼠发病症状和体征符合恙虫病的感染，实验鼠脏器涂片和速冻切片均镜检到Rt，PCR方法检测到Rt核酸，病人血清分型为Rt Gilliam型。结论：从病原学进一步证实了河北省恙虫病疫源地的存在。
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狂犬疫苗免疫效果观察
本文采用免疫荧光法测定了自贡地区1997年3月～2001年3月553名犬伤者,经狂犬疫苗常规五针法接种后第45d时的狂犬病毒中和抗体水平.现将结果分析如下:1方法1.1疫苗为≥2.51U浓缩人用狂犬疫苗.
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荧光定量PCR与免疫荧光法定量定性检测牛血清中呼肠孤病毒
目的 采用TaqMan荧光探针定量PCR技术与免疫荧光技术定量定性检测牛血清中呼肠孤病毒.方法 以携带有Reovirus保守系列的重组质粒作为标准品,优化定量PCR体系,建立标准曲线,用Vero细胞培养不同病毒评价方法的特异性；用FITC标记的抗Reovirus病毒蛋白单克隆抗体对感染不同滴度Reovirus的Vero细胞培养物进行直接免疫荧光检测,用Vero细胞培养不同病毒评价方法的特异性.结果 Taq Man Real-time PCR方法检测灵敏度可达1.0 ×102拷贝/pl,线性范围为109～103;免疫荧光法对Reovirus检测具有很高的特异性.结论 以TaqMan荧光探针检测Reovirus荧光定量PCR方法,灵敏度高、特异性强,辅以免疫荧光定性检测方法,可以作为牛血清感染Reovirus的定量和定性检测.
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浙江苍南地区100例NGU病原体单克隆抗体荧光免疫法检测分析
我科采用单克隆抗体免疫荧光法，对可疑100例非淋球菌性尿道炎(NGN)患者进行检测，结果分析如下： 1 资料与方法 1．1 临床资料 100例NGN可疑患者中男51例，女49例，年龄14～52岁，病期半月至3年。 1．2 方法 先用消毒棉签将尿道口或宫颈口分泌物擦干净，再换一只棉签，男性在尿道2cm～4cm处，女性在宫颈管内2cm～3cm处旋转360度，停留片刻后取出，立即将采取的标本涂在玻片上各涂一边约0.5cm大小，等自然干燥后，加……
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免疫荧光法在小儿上呼吸道感染微生物快速检验中的应用
目的 观察免疫荧光法在小儿上呼吸道感染微生物快速检验中的应用效果.方法 选取2017年1月～2018年1月本院收治的110例上呼吸感染患儿,使用免疫荧光法对患儿的鼻咽分泌物进行快速检测,观察其病毒感染类型及年龄分布.结果 95例患儿呈病毒抗原阳性结果,阳性率86.36％,其中55例为呼吸道合胞病毒,11例为流感病毒A型,16为腺病毒,5例为副流感病毒3型,2例为副流感病毒2型,2例为流感病毒B型,4例为混合型,感染率分别为57.89％、11.57％、16.84％、5.26％、2.11％、2.11％和4.21％,其中1～6个月的患儿感染率明显高于其他年龄段儿童,数据对比有统计学意义(P＜0.05).结论 免疫荧光法在微生物快速检测中已暂露头角,并不断与其他先进技术相结合,逐渐得到完善,其具有的高效、快捷等优势使之在小儿上呼吸道感染微生物检测中应用价值极高,值得应用.
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慢性充血性心力衰竭患者血浆BNP含量与心脏结构和功能参数之间关系探讨
目的 探讨慢性充血性心力衰竭患者血浆BNP含量与超声心功能参数及心脏主要结构测量值之间的关系.方法 选择慢性充血性心力衰竭的住院患者178例,用免疫荧光定量法检测血浆BNP值,并检查心脏彩超,记录反映心功能的参数左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)、每搏量(SV)、左室重量(LVMI)和心脏结构的参数升主动脉根部内径(AAO)、左房内径(LAS)、左室舒张期内径(LVDD)、左室收缩期内径(LVSD)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPW)、主肺动脉内径(MPA)、升主动脉宽度、肺动脉压(PA)、右室流出道内径、右室舒张末期内径、右房内径、右肺动脉内径.分析BNP与心脏各超声参数之间的相关性.结果 患者BNP平均水平为236.12±376.51 pg/ml.BNP与LVEF,FS,SV呈负相关(相关系数r依次为-0.559,-0.567,-0.206,P值均<0.01).与LVDD,LVSD,LAS,LVPW,IVSD,MPA和PAP呈正相关(相关系数r依次为0.338,0.494,0.371,0.194,0.215,0.381,0.400;P值≤0.01).结论 慢性充血性心力衰竭患者血浆BNP含量与某些心功能参数呈负相关,与心脏某些结构参数呈正相关.
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抗内皮细胞抗体的检测及临床应用
目的建立可以常规应用的免疫荧光法检测血清中抗内皮细胞抗体(AECA).方法对试验条件进行研究并与ELISA法对比,检测冠心病、脑梗死、肺疾患及脑血管障碍患者310例,青年健康组50例,老年健康组30例.结果两法检测阳性率无显著差异(P＞0.05),符合率89.7%;试验表明,用两种方法检测冠心病组、脑梗死组的AECA阳性率均明显高于健康组(P＜0.01),肺疾患组与脑血管障碍组也高于健康组(P＜0.05),内皮素检测证实AECA阳性者与内皮素升高明显正相关.结论自身免疫形成的AECA在促进内皮细胞损伤中具有重要意义;免疫荧光法快速、简便,适用于临床应用.
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胶体金法、免疫荧光法检测血清肌钙蛋白I的比较
目的:通过两种方法检测结果的比较,对胶体金法(Colloidal Gold Assay)检测血清心肌肌钙蛋白I(cT-nI)进行方法学评价,并探讨其临床应用价值.材料与方法:应用胶体金法测定20名正常人和20例急性心肌梗死(AMI)患者的血清cTnl水平,并与免疫荧光法(IFA)检测结果相比较,系统研究胶体金法测定cTnI的敏感性、特异性、可用度.结果:胶体金法(Y)与免疫荧光法(X)具有良好的相关性(Y =0.801X-.174,r=0.980),卡方检验P ＞0.05,两种方法结果无显著性差异.诊断敏感度、特异度、可用度分别为85％、95％、80.3％,阳性和阴性似然比分别为17和0.158,阳性预测值和阴性预测值分别为94.4％、86.4％.结论:胶体金法操作简便、结果准确可靠、自动化程度高,且检测快速,具有较高的临床可用度；cTnI对诊断AMI有高度特异性和敏感性,且持续时间较长,适合在临床工作中推广应用.
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TNF-α对根尖乳头干细胞与牙周膜干细胞增殖活性影响的比较研究
目的：体外培养鼠根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞，比较研究肿瘤坏死因子α（TNF-α）对两者增殖活性的影响，以期得出在炎症状态下两者用于牙本质再生的可能性。方法：取幼鼠根尖尚未发育完全的健康下颌牙，用酶消化法获得根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞；免疫荧光法鉴定干细胞表面标志物；将含有TNF-α浓度为0、5、10、50 ng/ml 的培养液加入两者的第3代细胞中，使用MTT法检测以比较其对两种细胞增殖活性的影响；采用SPSS 11.0软件包对实验组和对照组数据进行单因素方差分析。结果：SCAP与PDLSCs 均呈长梭形，形似成纤维细胞；SCAP与PDLSCs均表达干细胞特性；SCAP较PDLSCs 具有更强的增殖活性；在10ng/ml 和50ng/ml 浓度时，TNF-α能促进2种细胞的增殖。结论：与PDLSCs比较, SCAP增殖活性更强，在炎性环境下亦是如此，根尖乳头干细胞可能在年轻恒牙根尖周炎症经适当治疗后牙根继续发育中起到重要作用。
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人蛛网膜细胞体外培养及其生物学特性的初步研究
目的 建立人蛛网膜细胞的体外培养方法,观察其体外生长的生物学特性.方法 应用组织培养的方法,对人蛛网膜细胞进行体外原代和传代培养.观察培养的蛛网膜细胞体外生长的特征.并对培养细胞进行形态学和超微结构的检查和鉴定.结果 人蛛网膜细胞可以在体外成功培养传代.原代培养细胞大多48h贴壁,8d后旺盛生长,15d形成单层.传代培养细胞次日贴壁,10d形成单层.培养细胞呈扁平多角形,细胞表面具有丰富的微绒毛.蛛网膜细胞胞质染色质丰富,分布均匀,胞浆中线粒体、粗面内质网中等发达,可观察到丰富的高尔基体、核糖体和少量溶酶体,中间丝和微丝形成细胞骨架.cytokeratin 8及18、人类白细胞抗原DR位点(HLA-DR)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)单克隆抗体免疫荧光染色阳性.结论 应用组织培养的方法可以成功获得原代和传代培养的人蛛网膜细胞,培养的细胞具有上皮细胞及神经胶质细胞的生物学特性.
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小鼠胚胎神经干细胞在猫全脑缺血再灌注损伤模型中的存活、迁移及分化
目的 观察小鼠神经干细胞在猫全脑缺血再灌注损伤模型中的存活、迁移及分化.方法 参照四血管阻塞法建立猫全脑缺血再灌注损伤模型,将原代培养的小鼠神经干细胞移植入模型动物脑中.一个月后,以免疫荧光技术检测移植干细胞的存活、迁移及分化情况.结果 缺血再灌注损伤模型制作成功7例,成功率70%;免疫荧光法检测小鼠神经干细胞移植到猫前脑后一个月仍有大量存活,部分细胞分化为神经元或神经胶质细胞,并向脑组织中迁移.结论 小鼠神经干细胞在猫全脑缺血再灌注损伤模型中能够存活、迁移并分化.
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阿奇霉素治疗非淋菌性尿道炎疗效观察
我科自1999年1月～2000年1月,应用注射用阿奇霉素(商品名瑞奇,湖北瑞康制药有限公司生产)治疗解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)引起的非淋菌性尿道炎60例,现将观察结果报告如下.1资料与方法1.1临床资料122例均为我科门诊的非淋菌性尿道炎患者,年龄17～60岁,病程2周～8月,所有患者患病前均有不洁性生活史.临床症状典型,且衣原体、支原体(男性取自尿道口内2～4cm,女性取自宫颈口1～2cm)均用单克隆免疫荧光法(试剂由军事医学科学院微生物检验中心提供)和金标免疫斑点法(试剂由福建三明市蓝波生物研究所提供)检测阳性确定.
