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免疫荧光法检测细菌性阴道炎临床分析
目的评价免疫荧光法检测细菌性阴道炎的临床价值。方法80例疑似细菌性阴道炎患者取宫颈口分泌物3份标本,并标记为A、B和C。A标本均采用线索细胞检查法检测,B标本均采用免疫荧光法检测,C标本采用细菌培养法检测。A和B检测结果均参考C标本检测结果进行评价。结果线索细胞法的特异度和准确度均显著低于免疫荧光法(P均<0.05),两种检测方法的灵敏度差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用免疫荧光法检测细菌性阴道炎具有更高的检测价值,而且检测方法简单快速,有利于提高医院竞争力,值得检验临床考虑。
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抗核抗体诊断系统性红斑狼疮的临床应用评价
免疫荧光法测定病人血清中的抗核抗体(ANA)同Frious等人于1957年道德报道,临床上用于对各类核成分抗体的检测,是诊断多种自身免疫性疾病,尤其是诊断系统性红斑狼疮(SLE)的重要指标.但对用该指标诊断SLE宣的分析尚未见报道.本文旨在按诊断性试验的研究设计对用ANA诊断SEL的价值进行定量评价与分析.资料与方法1.临床资料 (1)金标准:以1982年美国风湿病学会修订的SLE诊断标准作为金标准. (2)病例级:根据金标准诊断SLE患者35例.
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骨髓间充质干细胞防护肾脏衰老的作用及其机制
背景:骨髓间充质干细胞具有分化成肾小管上皮细胞的功能,故推测,间充质干细胞可能具有治疗慢性肾功能减退的作用。
目的:研究骨髓来源的大鼠间充质干细胞防护肾脏衰老的作用及其可能的机制。
方法:实验建立衰老大鼠模型,尾静脉移植骨髓来源的大鼠间充质干细胞,应用荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记体外培养大鼠骨髓来源的间充质干细胞,将其回输肾脏衰老大鼠体内,应用荧光显微镜下观察间充质干细胞是否能够归巢于肾脏;全自动生化仪测定各组大鼠血清中尿素氮及肌酐水平变化;采用免疫荧光法,利用计算机图像叠加技术,观察蓝色荧光4’,6-二脒基-2-苯基吲哚分别与红色荧光的肾小管上皮细胞特异性蛋白-角蛋白的叠加情况。
结果与结论:骨髓来源的大鼠间充质干细胞能够归巢到衰老大鼠的肾脏。与衰老大鼠模型组相比,经过间充质干细胞生物治疗后的衰老大鼠血清中尿素氮及肌酐水平显著降低(P <0.05),肾脏组织可见少量4’,6-二脒基-2-苯基吲哚及异硫氰酸荧光素标记的角蛋白双染阳性细胞。结果显示,骨髓来源的大鼠间充质干细胞通过向肾小管上皮分化,这可能是其改善衰老大鼠肾脏的机制之一。 -
脂肪源性干细胞的体外分离培养与鉴定
背景:脂肪间充质干细胞来源丰富、取材方便、体外有较强增殖能力并具有多向分化的潜能,有望成为组织工程的种子细胞。
目的:体外分离培养SD大鼠脂肪干细胞并进行鉴定。
方法:取SD大鼠腹股沟区皮下脂肪组织,0.075%I型胶原酶消化分离、培养脂肪源性干细胞,倒置相差显微镜下观察脂肪源性干细胞的细胞形态和增殖特征。取第3代细胞用 MTT 比色法描绘生长曲线,免疫荧光法鉴定干细胞标志物CD44,含有体积分数10%胎牛血清、地塞米松和胰岛素的 DMEM/F12定向诱导成脂分化,油红“O”染色成脂分化鉴定。免疫组化法鉴定向神经细胞诱导分化的结果。
结果与结论:分离出的大鼠脂肪源性干细胞生长曲线呈“S”形,强烈表达干细胞标志物CD44。成脂诱导分化经油红“O”染色呈橘红色。向神经细胞诱导分化后表达神经元标志物神经元特异性烯醇化酶。说明SD大鼠脂肪源性干细胞在体外具有易于分离培养和扩增,表达间充质干细胞相关表型,特定条件下可诱导分化的特点。 -
利用载有角质细胞生长因子微囊的组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损
背景:组织工程皮肤作为一项新兴技术拥有良好的应用前景。有研究表明,角质细胞生长因子可以促进表皮细胞增殖。目的:观察荷载角质细胞生长因子纳米微囊的新型组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损的效果和特点。方法:构建荷载角质细胞生长因子的脱细胞真皮基质复合物;将人表皮干细胞群和成纤维细胞分离、培养,并且进行鉴定;将表皮干细胞群接种于复合物之上,观察其生长状况;将荷载角质细胞生长因子纳米微囊的组织工程皮肤移植于裸鼠皮肤缺损处,将无角质细胞生长因子纳米微囊的组织工程皮肤作为空白组,将其自体皮肤移植修复缺损组作为对照组,于移植后2,4,6周时观察皮片挛缩及组织学愈合情况,并应用抗人角蛋白10及β1-整合素免疫荧光检测修复区表皮和真皮层细胞来源、分化及生长情况。结果与结论:表皮干细胞在复合物表面生长良好,黏贴紧密,可见有连接成片趋势的小圆形的表皮干细胞及多角形的终末表皮细胞,部分形成克隆团块。移植后第2,4,6周,荷载角质细胞生长因子纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损的结果均优于空白组及对照组,移植的皮肤边缘与邻近皮肤完全融合,但存在一定程度的挛缩。修复区组织工程皮肤的表皮细胞分层良好并能产生角质层,同时,移植后8,10周,组织工程皮肤切片免疫荧光染色可以鉴别出少量β1-整合素阳性细胞,均为表皮干细胞或短暂扩充细胞。结果证实,荷载角质细胞生长因子纳米胶囊的新型组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损的效果较好,优于普通组织工程皮肤及自体全厚皮片移植修复。
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肺炎衣原体感染与急性心肌梗死关系的试验研究及初探
目的:检测血清肺炎衣原体(TWAR)和白细胞介素-6 (IL-6)对急性心肌梗死(AMI)的诊断价值及血清脂质谱的变化,以期了解我国AMI患者TWAR的感染状况以及相关因子变化的临床意义.方法:采用间接显微免疫荧光法检测53例急性心肌梗死病人和50例健康体验者血清肺炎衣原体IgG和IgM滴度,用ELISA法分别检测其血清白细胞介素-6(IL-6)的含量,同时检测两组血清脂质谱的含量.结果:急性心肌梗死组肺炎衣原体既往感染率(73.6%)明显高于对照组(14%)(P <0.01),两组肺炎衣原体急性感染率差异无显著性(P>0.05);两组血清中IL-6 含量超过正常上限值的阳性率差异有显著性,即对照组明显低于急性心肌梗死组(P<0.0 1).发现急性心肌梗死组肺炎衣原体感染阳性者,其危险的血清脂质谱较对照组有明显的增加.结论:肺炎衣原体感染与冠心病和急性心肌梗死的发生、疾病发展过程有密切关系.
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血浆肌钙蛋白I胶体金法与免疫荧光法检测的临床比较
目的:对比和分析血浆肌钙蛋白I采用胶体金法与免疫荧光法检测的临床价值。方法收集2014年11月至2015年12月入住本院的急性心肌梗死病患30例和同期进行体检的30例健康体检者的血清肌钙蛋白I,分别进行胶体金法与免疫荧光法检测,比较两种方法的检测结果。结果两种方法检测结果比较比较无统计学差异(P>0.05);免疫荧光法灵敏性、特异性、符合率、误诊率分别为92.86%、87.50%、93.33%、6.67%,胶体金法为86.67%、93.33%、96.67%、3.33%,两者之间的总一致性为90.00%;免疫荧光法( A)及胶体金法( B)具有较好的相关性,回归方程为A=0.801B-0.174(R=0.980)。结论胶体金法与免疫荧光法均具有操作简单、检测结果准确可靠、检测迅速等特点,均可作为检测血浆肌钙蛋白的有效手段。
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自身免疫性肝炎中调节性T细胞与治疗反应有关并可被现有治疗耗竭
【据《J Hepatol》2014年6月报道】题:自身免疫性肝炎中调节性T细胞与治疗反应有关并可被现有治疗耗竭(作者Taubert R等)
自身免疫性肝炎是一种通常需要终生免疫抑制治疗的慢性自身免疫性肝病,其发病机制及慢性化原因在很大程度上是未知的。近关于血液中调节性T细胞的不足在其中发挥的作用被讨论。目前对未治疗的自身免疫性肝炎患者靶器官上的研究被单参数分析所局限。来自德国汉诺威医学院的Taubert R等进行了一项回顾性研究,分析了1型自身免疫性肝炎患者治疗前(45例)和治疗中(31例)应用同时多色免疫荧光法所得的定量的肝脏浸润性T细胞、B细胞及调节性T细胞的模式。结果显示,对于自身免疫性肝炎患者,诊断时肝内CD4+细胞远超过CD8+细胞,但是随着疾病活动度的增加,CD4+/CD8+比值接近于1,尽管血液中调节性T细胞无明显变化,但在未经治疗的1型自身免疫型肝炎患者肝内,效应性T细胞丰富了调节性T细胞,同时调节性T细胞与效应性T细胞有恒定的比率,更重要的是,主要应用类固醇及硫唑嘌呤达到免疫抑制的患者会导致肝内调节性T细胞不相称的损失,到达生化缓解的患者相对于没有达到生化缓解的患者有更高的调节性T细胞/效应性T细胞及调节性T细胞/B细胞比率,调节性T细胞的体外增殖相对于效应性T细胞的扩增似乎被强的松抑制的程度更明显,进一步的说,门静脉B细胞与血清IgG水平关联提示了肝内内源性IgG产量。此项研究表明在未治疗的1型自身免疫性肝炎患者中,肝内调节性T细胞是相当丰富的,而不是缺乏,治疗中肝内调节性T细胞不相称的减少可能解释了不连续的免疫抑制后的高复发率,因此将来治疗增加肝内免疫调节可能更适合自身免疫性肝炎的长期控制。 -
结直肠癌患者血清M2-PK、CEA和CA199表达水平的检测及其临床意义
1资料与方法1.1一般资料选择2011年5月-2012年5月于本院采取手术治疗的结直肠癌患者45例,患者术前均未进行放化疗或免疫治疗,术后经病理确诊并排除了转移性肿瘤及原发性非上皮源性肿瘤.其中男性27例,女性18例,年龄43~64岁,平均年龄(54.2±8.3)岁;Dukes A期8例,Dukes B期10例,Dukes C期16例,Dukes D期11例.选择同期于本院进行健康体检的30名健康者作为对照,其中男性20例,女性10例;年龄45~65岁,平均年龄(55.6±8.8)岁.1.2检测方法 以上入选者均在清晨空腹下取静脉血5 mL,抗凝后在3 000 r·min-1离心机内连续离心5 min后取上清液,分别采用夹心ELISA法与微粒子免疫荧光法检测血清M2丙酮酸激酶(M2-PK)、癌胚抗原(CEA)和糖类抗原199(CA199)水平.其正常范围分别为:血清M2-PK为0~15 U· mL-1,血清CEA为0~5 mg·L-1,血清CA199为0~37 U·L-1.1.3统计学分析采用SPSS 16.5统计学软件进行统计分析,血清M2-PK、CEA和CA199表达水平以x±s表示,组间比较采用单因素方差分析;三者与病变程度的相关性采用Spearman等级相关性分析.
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心力衰竭患者血浆BNP水平变化与临床观察分析
目的:探讨心力衰竭(HF)患者血浆B型尿钠肽(BNP)改变及其临床意义.方法:采用快速免疫荧光法分别测定1 08例HF(NYHAⅡ、Ⅲ、Ⅳ)患者和78例健康对照组的血浆BNP水平,并进行对照分析.结果:HF组总体血浆BNP水平明显高于对照组(P0.01),NYHAⅡ级心功能时血浆BNP明显高于对照组(P0.01),且Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组间血浆BNP依次递增(P0.01).HF在控制后明显低于HF在控制前(P0.01).结论:血浆BNP的水平对HF的诊断、严重程度和预后评价有重要价值.
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大面积烧伤患者红细胞免疫功能与T淋巴细胞亚群变化的相关性研究
大面积烧伤会引起红细胞免疫功能的改变.采用酵母多糖法[1],试验对烧伤患者及健康对照组的红细胞免疫功能进行检测,同时用免疫荧光法对T淋巴细胞亚群进行测定.旨在探讨大面积烧伤红细胞免疫功能与T淋巴细胞亚群的相关关系,为临床治疗提供帮助.
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原代人脐带血来源间充质干细胞生物学特性的鉴定
目的 利用Ficoll-Hypague法从人脐带血中分离、培养及扩增人脐带血来源间充质干细胞;鉴定hUCBMSCs的生物学特性.方法 利用倒置显微镜观察不同代次hUCBMSCs的形态特点;采用免疫荧光法检测hUCBMSCs免疫学表型;台盼蓝拒染法检测hUCBMSCs细胞活力;hUCBMSCs生长曲线的绘制及其细胞群体倍增时间的测定.结果 体外分离、培养出高度同源性的hUCBMSCs;免疫荧光可见hUCBMSCs具有间充质干细胞独特的免疫学表型,即CD44、CD105阳性;P10代内细胞活力均在98%以上;hUCBMSCs具有高效增殖的特点,细胞群体倍增时间为62.3h.结论 本方法获得的hUCBMSCs具有典型的间充质干细胞的生物学特点,能够很好的满足细胞移植和组织工程需要.
关键词: 人脐带血来源间充质干细胞 生物学特性 免疫荧光法 -
临床应用免疫荧光法诊断细菌性阴道炎的效果观察
目的:评价分析应用免疫荧光法对于细菌性阴道炎患者进行诊断的具体临床效果。方法:选取2012年3月-2013年8月笔者所在医院收治的160例细菌性阴道炎患者作为研究对象,并按照随机数字表法进行分组,均采集阴道分泌物涂片,观察组采用免疫荧光法进行病原菌检测,对照组采用常规线索细胞检测法对病原菌进行检测,每份标本各涂片三张并进行三次检查,将两组研究对象的临床诊断符合率、诊断结果进行对比分析。结果:观察组检测结果敏感度为90.0%,显著高于对照组的77.5%;观察组检测结果与临床诊断的符合率为90.0%,显著高于对照组的77.5%,上述组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:应用免疫荧光法对细菌性阴道炎患者进行涂片检查,与常规线索细胞检查法相比,其准确性更高,可以为对症治疗提供有效依据,具有极大的推广应用价值。
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肾综合征出血热快速检测方法的临床评价
肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是一种病死率较高的急性传染病.在临床诊疗过程中,早期明确诊断直接关系到患者的预后.现有的诊断方法,在基层单位应用有条件限制.一种简便快速的早期诊断方法--免疫滴金法(colloidal gold immundot assay,CGIDA)[1]能同时检测 HFRS特异性免疫球蛋白 M(抗-HFRSIgM)和G(抗-HFRSIgG),并在 5~10 min内得出结果.为了解该方法的特异性与敏感性,1999~2002年,我们将该方法应用于临床急性典型HFRS病人446例,与酶联免疫吸附试验(ELISA)作比较检测抗-HFRSIgM,与免疫荧光法(IFAT )作比较检测抗-HFRSIgG,同时检测HFRS病人病后与健康人群血清抗-HFRS IgM、IgG,现将检测结果报道如下:
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溴脱氧尿嘧啶核苷免疫荧光法标记海马脑片齿状回新增殖神经元的方法
由于溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)是DNA 成分胸腺嘧啶核苷类似物,故细胞可以摄取 BrdU 来代替胸腺嘧啶核苷,并复制新的 DNA 单链;同时,BrdU 的大分子特征使它具有抗原性.
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133用抗哺乳动物中间纤维的单克隆抗体对蠕虫中间纤维的免疫荧光法的定位作用
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消化系疾病的实验室诊断新方法
胃肠疾病若干相关自身抗体的检测一、乳糜泻(CD)CD又称麸质敏感性肠病、非热带口炎性腹泻,是因对麸质不耐受所致的小肠粘膜损害,在欧洲、北美洲和澳州较常见,而在亚洲和非洲相对少见.目前用于诊断CD的实验室检查包括以下几项. 1.抗肌内膜自身抗体(IgA-EmA):通常采用免疫荧光法进行测定,人脐带成分或猴食管常被用作测定基质.IgAEmA是协助诊断CD的经典检测指标,特异性一般>95%.因此,IgA-EmA阳性者常需作小肠活检以明确诊断. CD患者经严格去麸质饮食后,其IgA-EmA滴度可恢复正常.因此,IgA-EmA滴度测定也可用于检测去麸素饮食的临床疗效.值得注意的是,CD患者常伴有选择性IgA缺乏症,对这些患者应同时测定IgG-EmA,以免漏诊.
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严重急性呼吸综合征患者血清中抗-SARS-CoV IgG、病毒RNA和N蛋白的动态变化
目前严重急性呼吸综合征(SARS)诊断主要是用免疫荧光法(IF)、酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白印迹法(WB)检测SARS-CoV特异性抗体和/或用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测SARS-CoV RNA.虽然RT-PCR对早期诊断SARS是可靠的,但其检出率较低,仅为37.5%~50%[1,2].IF、ELISA和WB检测SARS特异性抗体的检出率虽可高达90%以上,但一般在发病后2~3周才能检测到[3-6].因此,其对SARS的早期诊断意义不大,只可用于SARS的回顾性诊断.
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干式免疫荧光法检测血清AFP含量的实验评价
AFP是一种临床上经常进行检测分析的肿瘤标志物,主要用于肝癌诊断和治疗的效果观察.临床上定量检测AFP主要有磁免疫发光法和ELISA,这二种方法适应标本量大的医院,对每天仅有几只样本单位使用快速干式免疫荧光法或金标法更适合.旨在了解干式免疫荧光法可靠性,对其临床应用进行评价.
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不同处置时间对免疫荧光法快速CRP测定结果的影响
本文分别观察CRP检测缓冲液加入血清后放置8个不同时间点和检测板放置8个不同时间点对结果的影响,并分析如下.1 材料和方法1.1 标本 收集本院门急诊患者的新鲜全血加入美国BD5ml凝胶试管,立即离心取上层血清备用.