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稳可信治疗老年下呼吸道MRSA感染的安全性
目的:评价稳可信治疗老年下呼吸道MRSA感染的安全性.方法:应用回顾性调查方法对36例稳可信治疗的老年MRSA感染的患者进行分析.结果:稳可信用药不良反应发生率为33.3(12/36),无严重毒副反应发生.临床有效率为63.9%,细菌清除率为47.2%,临床有效率和细菌清除率偏低,与患者自身因素造成治疗难度大有关.结论:稳可信是老年MRSA感染的安全首选药物,无严重毒副反应发生.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多位点序列分析
目的 对2000年和2005年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)进行多位点序列分析(multilocus sequencing typing,MLST),初步了解MRSA的分子分型特征.方法 采用基因测序的方法 分别对29株MRSA和2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)的7个等位基因进行序列分析,同时进行网上数据库比对,得到每个菌株相应的等位基因号.结果 2000年选取的12株MRSA均为序列型(sequence type,ST)239,2005年的17株MRSA中10株仍为ST239(58.82%,10/17),同时也出现了新的型别ST5(41.18%,7/17).在选取菌株范围内ST239为主要多位点序列分析型别(75.86%,22/29),其次为ST5(24.14%,7/29).2株MSSA分型结果分别为ST6和ST630.结论 ST239和ST5为本次研究的优势型别,MRSA与MSSA在多位点序列分析上存在极大的差异.
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耐甲氧西林葡萄球菌对抗菌药物的敏感性分析
对我院耐甲氧西林葡萄球菌对抗菌药物的敏感性分析如下.1 对象和方法1.1 菌株收集自我院住院及门诊患者分离出的MRS 246株,其中金黄色葡萄球菌(MRSA)108株,溶血葡萄球菌(MRSH)45株,表皮葡萄球菌(MRSE)68株,其他凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)58株.
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散发耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染18例的护理
目的:探讨医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的相关因素和预防护理措施.方法:回顾性分析18例医院感染MRSA的住院患者进行侵入性操作、抗菌药物使用及耐药性、感染部位等医院感染相关因素.结果:通过实施相应的护理措施阻止了其在医院的暴发流行.结论:对于MRSA感染者,清除来源,加强环境清洁、手卫生与消毒隔离,可有效控制MRSA的暴发流行.
关键词： 甲氧西林抗药性 葡萄球菌 金黄色/药物作用 交叉感染/预防和控制 -
大学生社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎并喀血1例分析
本文在基层医院诊疗过程中发现1例社区获得性肺炎,经喹诺酮治疗4d,三代头孢治疗3d效果差,后因合并大喀血转诊到三级医院,经多次痰培养检出MRSA感染,经盐酸万古霉素和头孢哌酮舒巴坦治疗治愈.报告如下.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制研究进展
金黄色葡萄菌是l临床常见的致病菌之一,在临床致病菌中分离率位居前列,其中以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MR-SA)尤为重要,由于其多重耐药性和易造成医院内感染的暴发流利,已成为临床抗感染治疗的难点[1].
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的名与买
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌可以引起人类的感染,对有效治疗也构成了威胁,日益成为临床[1]、实验室、感染控制[2]和卫生政策决策领域[3]关注的焦点.
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医院内耐甲氧西林葡萄球菌感染检测分析
为了解我院葡萄球菌感染的临床分布及耐药情况,我们对2006-01-2010-12从临床各类标本中分离的286株葡萄球菌进行了鉴定分析及耐药性检测,为临床治疗用药提供依据.1 资料与方法1.1 菌株来源选择从门诊、住院临床感染患者各种标本中分离出葡萄球菌286株.其中从痰液分离出229株,尿液分离出43株,脓液分离出8株,脑脊液分离出4株,关节腔积液中分离出2株.
关键词： 甲氧西林抗药性 葡萄球菌属/药物作用 葡萄球菌感染 -
ICU耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的消毒隔离防控措施
目的 分析医院ICU患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)交叉感染的原因,并探讨消毒隔离防控措施.方法 对2011-02-01- 2011-06-30 ICU感染MRSA的2例患者进行病原学检查及环境卫生学监测.结果 从ICU义务人员手、床头桌、中心吸氧装置、负压吸引装置开关旋钮、吸痰用氯化钠溶液等均检出MRSA,分离率为37.5％、20.0％、37.5％、54.5％、87.5％.结论 ICU患者易感染MRSA,该细菌耐药性强,治疗困难,可通过合理用药,严格无菌操作、加强消毒隔离防控措施杜绝交叉感染.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌三种检测方法的评价
金黄色葡萄球菌是引起化脓性感染的主要致病菌.随着抗菌药物的广泛应用,金黄色葡萄球菌的耐药性逐渐增加,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)呈多重耐药性,引起严重感染的发生率越来越高,其传播途径广泛,易造成医院内暴发流行,成为临床抗感染治疗的一大难题.因此,快速、准确检测MRSA,对于合理使用抗生素、有效控制MRSA的传播有重要的临床意义.本研究对98株金黄色葡萄球菌用头孢西丁和苯唑西林纸片法检测MRSA,采用PCR法检测mecA基因作为金标准,对两种方法的敏感性和特异性进行比较,评价其可靠性和临床应用价值.现将结果报道如下.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染危险因素分析
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对β-内酰胺类抗菌药物及其衍生物表现为多重耐药[1],是卫生部医院感染监测规范中要求特殊监测的细菌.我院2010-01-2010-12对MRSA感染部位、危险因素进行监测,对MRSA感染者按照标准预防原则进行严密的隔离,在各项诊疗和护理中,大限度地控制MRSA感染的危险因素,合理应用抗生素,降低了MRSA耐药率,使感染病例呈下降趋势.
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湖北地区异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的流行性及检测方法研究
目的 了解湖北地区临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)标本中异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)的分离率,并探讨一种可用于本实验室筛选hVISA的简便易行的方法.方法 采用琼脂稀释法检测214株临床MRSA菌株的苯唑西林、头孢西丁、万古霉素、替考拉宁的MIC,并分别用含有5 mg/L替考拉宁的M-H琼脂(MHA5T),宏量E-test法(MET)及菌群分析曲线(PAP/AUC)法检测hVISA.以PAP/AUC法作为金标准,比较MHA5T和MET法的敏感度及特异度.采用Triton X-100诱导自溶的方法检测hVISA和万古霉素敏感金黄色葡萄球菌(VSSA)菌株的自溶性,并用SPSS18.0软件分析其差异性.结果 PAP/AUC、MET、MHA5T三种方法检测hVISA的阳性率分别为17.8％ (38/214)、20.6％ (44/214)、45.8％ (98/214).以PAP/AUC作为金标准,MET和MHA5T的敏感度、特异度分别为82％ (31/38)、93％ (163/176)和90％(34/38)、64％ (112/176).hVISA 4 h后自溶性降至52％,VSSA 4 h后自溶性降至28％,与VSSA相比,hVISA的自溶性明显下降(x2=18.3486,P=0.024).结论 湖北地区hVISA检出率为17.8％,应引起临床高度重视.MHA5T可作为hVISA的初筛方法,以减少PAP/AUC的繁琐工作量及E-test的使用.
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血流感染MRSA中的ST239克隆株快速检测与分析
目的 评价多重PCR法对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) ST239克隆株的快速检测及合肥地区血流感染MRSA的分子流行现状.方法 收集2008年至2013年安徽医科大学第一附属医院及第二附属医院临床分离的血流感染金黄色葡萄球菌的106株MRSA进行相关耐药性分析,并采用多重PCR技术对ST239型克隆株进行快速检测,同时运用多位点序列分型(MLST)加以确认及葡萄球菌染色体mec基因盒(SCCmec)分型分析.结果 106株血流感染金黄色葡萄球菌中MRSA有51株,占48.1％,MRSA均为多耐药菌,对红霉素、氨基糖苷类和喹诺酮类耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),MRSA和MSSA对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的敏感率分别为86.3％和 94.5％;51株MRSA中有47株为ST239快速检测阳性,阳性率高达92.2％;随机选取20株ST239初筛阳性的MRSA经MLST验证和SCCmec分型后确认为MRSA-ST239-SCCmecⅢ型.结论 合肥地区血流感染MRSA近半数为多重耐药克隆MRSA-ST239-SCCmecⅢ型,运用多重PCR技术能够快速检测ST239克隆株.
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靶向mecA基因纳米胶体金探针快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的建立
目的 用以纳米胶体金颗粒为载体的DNA探针杂交技术,建立快速、简便和特异的检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法.方法 以直径60 nm的胶体金纳米颗粒与巯基修饰的2条mecA基因特异性寡核苷酸探针共价结合,制备成纳米胶体金探针.直接提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA,经超声破碎后与纳米胶体金探针进行液相杂交.杂交产物经高速离心后再用反向色谱反应盘检测有无胶体金颗粒沉淀产生.用该法和PCR扩增试验同时检测临床分离株的mecA基因,以PCR法为金标准,评价纳米胶体金探针液相杂交法的准确性.结果 在95株临床试验菌株中PCR法共检出71株MRSA,24株MSSA.在71株MRSA中,纳米胶体金探针杂交试验有69株为阳性,敏感度为97.2%,低检测限为4.72 fmol/L.而在24株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)中,纳米胶体金探针杂交试验无一株阳性,特异度为100%.95株临床试验菌株中纳米胶体金探针杂交试验正确检出93株,准确度97.9%.结论 纳米胶体金探针杂交试验与PCR检测MRSA具有很好的一致性.应用胶体金探针杂交技术检测MRSA具有快速、简便、准确的特点,有望成为MRSA的快速诊断的新方法.
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上海地区五所医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学调查
目的 了解上海地区甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及分子流行病学特点.方法 从上海5所医院收集140株MRSA,采用琼脂稀释法和肉汤稀释法检测其耐药性;利用PCR方法检测MRSA的PVL基因和SCCmec型别;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对MRSA做同源性分析并且将主要流行型别的39株MRSA进行spa分型.结果 140株MRSA对庆大霉素、磺胺甲嚼唑和克林霉素的耐药率分别为98.6%(138/140)、98.6%(138/140)和97.9%(137/140);对红霉素、环丙沙星和四环素的耐药率均在80%以上,对利福平的耐药率为10.7%(15/140);未发现对达托霉素、替考拉宁和万古霉素耐药的菌株.菌株MRSA PvL均为阴性,以SCCmecⅢ为主,达45.7%(64/140);其他型别依次为SCCmecⅢ a 25.0%(35/140)、SCCmecⅢb 14.3%(20/140)、SCCmecⅢ10.7%(15/140).SCCmecⅣ少,占4.3%(6/140).PFGE图谱有16种类型(A～P型),以C型[30.7%(43/140)]、B型[13.6%(191140)]和Ⅰ型[10.7%(15/140)]为主;对主要流行克隆的39株MRSA进行spa分型,共得到t002[33.33%(13/39)]、t030[12.82%(5/39)]、t037[51.28%(20/39)]、t459[2.57%(1/39)]4种类型.结论 上海地区5所医院MRSA共有16种流行克隆株和4种spa型,其中PVL阴性、SCCmecⅢ对红霉素、环丙沙星、克林霉素、四环素、庆大霉素、磺胺甲唑耐药的MRSA克隆可能是上海地区HA-MRSA主要流行克隆株,是医院感染控制的重点,因此临床医生在治疗HA-MRSA感染患者时,要谨慎使用抗菌药物.
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调节高致病力CA-MRSA α-毒素表达的基因筛选及功能研究
目的 从CA-MILSA全基因组水平筛选出除域值感知(quorum sensing)基因系统以外对α-毒素表达有明显调节作用的基因,并研究其调节机制.方法 使用本实验室构建并已申请国家专利的真核转座酶为基础的转座系统构建CA-MKSA转座子,并随机插入突变文库.通过用5%羊血平板筛选出与野生株相比溶血明显改变的克隆,接着用定量RT-PCR以及WB等实验筛选出α-毒素表达明显下降的突变菌株,运用随机引物反向PCB和测序等方法鉴定出突变基因.通过基因互补表达实验、小鼠菌血症与皮肤脓肿模型实验以及荧光定量RT-PCR等方法对目标基因以及其编码蛋白的功能进行研究.结果 在CA-MRSA中建立了一个库容量约为104个克隆的转座子随机插入突变库,终筛选出25株α-毒素表达明显下降的突变菌株.CA-MRSA野生株溶血直径平均为212 mm,而其中AraC转录调节子突变株(AraC-)几乎无溶血,当将AraC基因互补回突变株(AraC-pT181araC)后,其溶血直径平均为197 mm,部分恢复到野生株溶血水平.荧光定量RT-PCR结果显示,与CA-MRSA野生株(PSMα为257.30±37.33,agr为115.60±0.81,α-毒素为3.23±0.21)相比,在AraC-中α-毒素、PSMα以及agr表达均明显下调(α-毒素1.09±0.01:t=10.18,P<0.01;PSMα 34.85±2.15:t=5.95,P<0.05;agr 35.19±1.72:t=42.33,P<0.01).小鼠菌血症模型实验结果为CA-MRSA野生株与AraC-((x)±5)差异具有统计学意义(χ2=21.34,P<0.01).AraC-p1F181araC中PSMα、agr、α-毒素(hla)表达(分别为PSMα:180.10±15.29,agr:101.50±8.96,α-毒素:2.59±0.26)均部分恢复到野生株表达水平,与CA-MRSA野生株相比,差异无统计学意义(PSMα:t=1.914,P>0.05;agr:t=1.563,P>0.05;α-毒素:t=1.923,P>0.05).CIpP在MaC-(0.21±0.01)和AraC-pT181araC(0.17±0.03)中的表达与CA-MRSA野生株(0.20±0.01)相比,差异无统计学意义(t=0.555,P>0.05和t=0.851,P>0.05).小鼠皮肤脓肿模型结果显示,CA-MRSA野生株接种的小鼠皮肤表面脓肿面积为(136.5±21.45)mm2,AraC-接种的小鼠皮肤表面脓肿面积(55.69±13.81)mm2,CA-MRSA野生株与AraC-小鼠皮肤脓肿模型实验存在显著差异(t=3.169,P<0.05).结论 AraC转录调节子在CA-MRSA中通过调节重要的毒力因子如PSMα、agr以及α-毒素的表达来调节CA-MRSA的毒力,从而影响其致病力.
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甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌的RAPD分型研究
目的建立随机扩增多态性DNA技术(RAPD)对甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌(MRSH)的分型方法.方法收集本院2002年4月至2003年4月临床分离的MRSH 81株.共设计了5组引物进行RAPD,电泳条带采用SPSS 13.0软件分析,根据树状图分型.结果除引物H12和M13组无法扩增出条带外,其余的4种引物均可以将81株MRSH进行分型.其中引物ERIC2将其分为13型,而引物ERIC1R将其分为8型.两种引物均可以辨别出主要流行株.结论 RAPD技术采用引物ERIC2对MRSH分型具有快速、敏感、稳定性高等特点.在有适合引物的条件下,RAPD可以作为判断MRSH医院感染流行的初筛工具.
关键词： 甲氧西林抗药性 随机扩增多态DNA技术 葡萄球菌属 -
应用MRSA ID产色琼脂培养基等四种方法检测和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
目的 比较MRSA ID产色琼脂培养基及其他3种方法检测和鉴定甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA).方法 选择临床118株葡萄球菌用(118株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌108株,凝固酶阴性葡萄球菌10株)细菌鉴定仪鉴定到种,用MRSA ID琼脂筛选法、苯唑西林平板筛选法、头孢西丁纸片法比较MRSA的检测情况,同时检测金黄色葡萄球菌的mecA基因作为金标准,同时用大肠埃希菌ATCC25922,金黄色葡萄球菌ATCC25923,铜绿假单胞菌ATCC27853和粪肠球菌ATCC29212做干扰试验.结果 金黄色葡萄球菌用PCR检测其mecA基因,共检测到80株阳性菌株;用MRSA ID琼脂筛选法符合率为100%,苯唑西林平板筛选法符合率为97.5%,头孢西丁纸片法符合率为100%;有1株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和1株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对MRSA ID琼脂的显色有干扰,出现了浅绿色的细小菌落.用标准菌株做对照均没有生长.结论 MRSA ID琼脂平板可以对MRSA进行主动快速监测.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多重耐药基因检测
目的了解金黄色葡萄球菌(金葡菌)β内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类抗生素耐药基因的分布特点,评估耐药性基因型与表型测定法的相关性.方法聚合酶链反应(PCR)测定本地分离100株金葡菌的β内酰胺类耐药基因mecA、氨基糖苷修饰酶基因aac(6')/aph(2'')、aph(3')-III、ant(4',4'')、大环内酯类23s rRNA甲基化酶基因erm 、四环素类核糖体保护蛋白基因tetM的发生率,纸片扩散法测定苯唑西林、庆大霉素、红霉素、四环素的耐药性.结果100株受试菌中mecA阳性66株(MRSA),常见的耐药基因是erm+tetM,存在于89.4%的MRSA中,少见的是ant(4',4''),存在于4.5%的MRSA中,MRSA 的aac(6′)/aph(2'')、aph(3')-III、erm、tetM检出率分别为97.0%、72.7%、100%、89.4%,明显高于MSSA的11.8%、2.9%、44.1%、8.8%;66株MRSA中, 43株(65.2%)同时检出aac(6')/aph(2'')、aph(3') -III 、erm、tetM 4种基因,58株(87.9%)同时检出aac(6')/aph(2'')、 erm、tetM 3种基因,34株MSSA中,仅2株(5.9%)同时检出aac(6')/aph(2'')、 erm、tetM 3种基因;苯唑西林、庆大霉素、红霉素、四环素与其相应的耐药基因mecA、aac(6')/aph(2'')、erm、tetM的符合率分别为96%、99%、96%、84%,81株红霉素表型耐药菌中79株(97.5%)为大环内酯-林可霉素-链霉菌素B(MLSB)结构型耐药.结论耐药基因在金葡菌中均可检出,金葡菌对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类抗生素耐药与苯唑西林耐药紧密相关,大环内酯类主要是结构型耐药,基因型与表型测定有较高的符合率.
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等温扩增检测耐药基因mecA方法的建立及其临床应用
目的建立环介导的等温扩增快速检测葡萄球菌耐药基因mecA的方法.方法利用包被有SPA单克隆抗体的磁珠富集样品中的金黄色葡萄球菌,快速提取其DNA, 用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增金黄色葡萄球菌耐药基因mecA,扩增条件为65°C 保温1 h.在反应过程中,荧光探针与mecA基因的扩增产物互补序列结合,产生荧光,通过检测反应管中的荧光值来判定结果.结果该方法的低检测限为10 CFU/ml,与M-H培养基苯唑西林药敏试验结果相比较,灵敏性99%,特异性90.9%;而与PCR方法比较,灵敏性100%,特异性100%;试验时间缩短为1 h.结论该方法具有灵敏度高,特异性强,操作简便快速,适用于检测临床标本中的MRSA.
