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生物材料的细胞生物相容性评价方法的研究进展
细胞生物相容性评价是生物材料临床应用前必须检测的项目,目前的评价方法主要以细胞毒性试验法为主,国内外标准就细胞毒性试验已有具体的试验原则和试验方法.随着现代细胞生物学和分子生物学技术的进步,细胞毒性评价出现了一些国内外标准尚未收录的新的评价指标和评价方法,本文主要综合常用的评价指标和评价方法及其发展现状作一综述.
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小肠黏膜下层组织与雪旺细胞生物相容性的体外研究
运用组织工程技术研究可替代自体神经移植的人工神经是近年研究的热点.小肠黏膜下层(small intestinal submucosa, SIS)作为支架材料在修复组织缺损的实验研究中已取得令人满意的效果,具有非常良好的应用前景[1].
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纯钛阳极氧化-植酸-载铜膜层的细胞相容性与抗菌性研究
目的:针对钛种植体植入后组织感染问题,在纯钛阳极氧化-植酸处理工艺基础上,引入具有抗菌性的铜元素,探究不同镀铜含量涂层的细胞相容性以及对抗菌性能的影响.方法:纯钛表面两步法阳极氧化、植酸及化学镀铜制备涂层,通过SEM及元素分析,激光共聚焦显微镜和CCK-8实验检测各组涂层成骨细胞的细胞活性,采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双重荧光染色法检测抗菌性.结果:随着镀铜时间的增加铜含量增多,涂层微孔孔隙变小变少,涂层表面愈加致密.各组均有利于成骨细胞生长,无细胞毒性,载铜后各组试件表面细胞伸展均较好,其中镀铜时间6min的Cu3组细胞整体伸展好;载铜后涂层具有抗菌性,随着镀铜含量的增加,其中Cu3组抗菌率达86%,明显优于其他组.结论:纯钛阳极氧化-植酸-低载铜复合膜层具有良好的细胞相容性,抗菌能力随着铜含量的增多而增强,涂层表面含铜量为1.2wt%,具有较强抗菌能力.
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补体调节蛋白CD59基因表达及转化生长因子β1在血液透析中的变化及其意义
尿毒症患者的免疫功能存在缺陷,其发生机制尚不完全清楚[1].转化生长因子β1(TGF-β1)是一种多效的免疫调控介质,其血浆浓度增高可通过双向调节多种细胞因子或免疫调节物质的活性,加重免疫功能紊乱[2].近年来,补体调节蛋白CD59在各种异常补体激活导致的免疫功能损伤中的作用已引起人们的重视,已有研究表明TGF-β1可上调CD59基因表达[3],但目前对补体调节蛋白CD59基因表达及TGF-β1在血液透析中(HD)的变化及其意义尚不清楚.本研究采用流式细胞术和酶联免疫吸附法分别观察血透时CD59基因表达和TGF-β1水平变化,探讨人工肾脏对免疫细胞生物相容性的影响以及不同透析膜的干预作用.
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胶原蛋白-几丁聚糖三维骨架构建组织工程血管的可行性
目的研究胶原蛋白-几丁聚糖构建的三维支架在血管组织工程研究中的可行性.方法以I型胶原蛋白和几丁聚糖为生物材料,体外预构具有三维结构的支架,观察支架的空间立体结构;将培养的种子细胞(人平滑肌细胞和纤维细胞)种植于支架,观察材料与细胞的生物相容性和抗收缩性,并测定材料中DNA含量和胶原蛋白含量.结果应用相分离技术制备的支架,具有均匀的三维结构和丰富的交通孔,种植种子细胞后可以形成良好的细胞黏附和生长,且选用的支架材料可以抵抗细胞收缩引起的材料变形;培养2、4、6周的材料中,DNA含量和胶原蛋白含量随培养时间延长而明显增加.结论构建的胶原蛋白-几丁聚糖三维支架具有结构均匀、细胞生物相容性好的特点,并具有一定的物理强度,可以应用于血管组织工程研究.
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几种医用材料的细胞生物相容性评价的实验研究
目的:通过2种体外细胞毒性试验研究,评价几种生物材料的细胞生物相容性.方法:依据ISO 10993-1.1997及GB/T 16886.1-1997,应用琼脂覆盖法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法对聚丙烯酰胺水凝胶、壳聚糖和类金刚石等5种生物材料的细胞毒性进行评价.通过建立MTT比色法的L929细胞生长代谢标准曲线,确定了96孔板适宜的细胞接种数.结果:5种生物材料MTT试验中毒性级均为0级,琼脂覆盖法中材料周围及脱色区内细胞溶解评价(Z/L值)均为0/0.结论:5种生物材料具有良好的细胞生物相容性.
关键词: 医用生物材料 细胞生物相容性 琼脂覆盖法 四甲基偶氮唑盐比色法 -
壳聚糖温敏凝胶引导组织再生膜的制备及其细胞生物相容性
目的 制备壳聚糖/β-甘油磷酸钠(CS/β-GP)膜,通过体外细胞培养评价新型引导组织再生膜的细胞生物相容性.方法 利用CS/β-GP体系的温敏相转变特性,通过分子自组装技术合成温敏凝胶膜,采用红外光谱分析、扫描电镜、拉伸强度实验进行结构和力学测试.通过MTT比色法对体外培养的小鼠成纤维细胞L929生长及增殖情况进行初步评价,共分3组进行对比研究:实验A组(2%CS+0.5 gβ-GP)、实验B组(2%CS+1.0 gβ-GP)及空白对照组.结果 红外光谱分析提示,壳聚糖与β-甘油磷酸钠分子间存在静电作用和化学键结合,形成新的化合物;扫描电镜观察,壳聚糖/β-甘油磷酸钠膜具有多孔的表面结构和内部结构;L929细胞体外培养第3、4、5天,实验组与空白对照组吸光度(A)值组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶具有良好的成膜性,能促进成纤维细胞的体外增殖,是一种有应用前景的新型引导组织再生膜材料.
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马来酸酐改性聚乳酸对成骨细胞黏附、增殖和分化的研究
通过研究马来酸酐改性聚乳酸(MPLA)和聚乳酸(PDLLA)材料表面对MC3T3-E1成骨细胞形态、黏附、增殖、细胞总蛋白含量、碱性磷酸酶活性及细胞分泌无机钙含量的影响,评价MPLA和PDLLA材料的细胞相容性.结果显示:与PDLLA相比,MPLA材料上的成骨细胞完全黏附和充分铺展;MPLA材料上细胞的增殖速率、细胞总蛋白含量、细胞碱性磷酸酶活性及细胞分泌的无机钙含量都显著高于PDLLA(P<0.01).这些结果说明,MPLA材料能促进MC3T3-E1成骨细胞的黏附、铺展、增殖及蛋白质的合成,并能促进成骨细胞的分化和矿化,与PDLLA材料相比具有更好的细胞相容性.
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壳聚糖复合材料及其细胞生物相容性的研究进展
壳聚糖(chitosan,CTS)作为甲壳素脱乙酞氨基后的一种产物,又称为脱乙酞甲壳素,是纤维素以外第二大丰富的天然高分子化合物[1].壳聚糖具有抗微生物、调节血脂、增强机体免疫能力以及抑制肿瘤等生物活性.由于壳聚糖与机体内的氨基葡萄糖类具有相似结构,类似于人体骨胶原组织,而且具有无毒害、良好的生物相容性等特点,在骨组织工程的应用和研究中发展迅速,现针对壳聚糖及其衍生物的生物相容性综述如下.