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儿科Panton-Valentine杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征及Panton-Valentine杀白细胞素基因多态性和耐药特征
目的 研究儿童感染Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株分子特征、PVL基因序列变异情况及耐药特征.方法 对PVL阳性MRSA感染患儿临床资料进行回顾性调查,分析病例临床特征;采用PCR联合测序对MRSA临床分离株进行多位点序列分型(MLST);并应用分段PCR扩增PVL基因,拼接序列与日本ST30 CAMRSA菌株NN1的PVL序列进行比对,分析序列变异与STs分型之间的关系,构建系统树对PVL基因的系统发生多样性进行分析;采用琼脂稀释法进行,16种抗生素的体外药物敏感试验.结果 在73例PVL阳性MRSA感染病例中:皮肤软组织感染35例(47.9%),肺炎27例(37.0%),其他严重感染及健康儿童分离株中也检测到PVL基因;社区感染55例(75.3%).感染菌株MLST分型共有9种,常见的3种为ST59、ST910、ST338,分别占53.4%、17.8%、9.6%.PVL序列检测及比对结果:共发现9个核苷酸位点变异,其中3个为非同义突变(16 C→A,62 C→T,527 A→G),其余均为同义突变;有9种不同的单体型序列,各STs分型在9种序列中呈散在分布;所研究的MRSA 71株为H型,仅2株R型.PVL阳性MRSA菌株对红霉素、克林霉素、头孢呋辛耐药率高达94.5%、86.3%和82.2%.结论 PVL阳性MRSA分离株来源广泛,以皮肤软组织感染和肺炎为主;分子分型以5T59型为常见;lukSF-PV序列高度保守,序列变异主要为H型,R型罕见.
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临床分离的葡萄球菌中mecA基因的检测
目的 了解临床分离的葡萄球菌中mecA基因的产生情况. 方法 收集临床分离的葡萄球菌154株,采用聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因并进行DNA测序,头孢西丁药敏试验采用Kirby-bauer(KB)法. 结果 mecA基因在葡萄球菌中的阳性检出率为67.53%,药敏法MRS的阳性率为58.44%. 结论 在本院分离的葡萄球菌中mecA基因携带率较高.
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葡萄球菌及其耐药性研究
葡萄球菌是主要化脓性病原菌,可致人和动物多种器官化脓性疾病.由于抗生素的广泛应用,产生了大量难治的耐药菌群.自1951年发现了灭活青霉素的金黄色葡萄球菌以来,葡萄球菌的耐药菌株,尤其是多重耐药菌株普遍出现.有重要临床意义的多重耐药葡萄球菌包括甲氧西林耐药金黄色葡萄球(MRSA)、甲氧西林耐药表皮葡萄球菌(MRSE)和甲氧西林耐药溶血葡萄球菌(MRSH).特别是MRSA更是院内感染的重要病原菌之一,由于其感染发生率及耐药性快速增长,MRSA感染已日益成为抗感染治疗的难题.
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引物标记技术的应用与葡萄球菌多重耐药基因检测法的建立
目的 基于多重基因遗传信息表达分析系统(GeXP)技术平台,应用CY5(荧光染料)标记的特异引物代替通用引物,建立一种高通量的葡萄球菌多重耐药基因检测法.方法 设计细菌16S rDNA、耐甲氧西林相关基因(mecA、MecA LGA251)与耐大环内酯类相关基因(ermA、ermB、ermC、sat4、msrA、ereA、ereB、mefA/E)的引物,经“PCR+琼脂糖电泳”筛查2014年1月-2016年12月中山大学附属第八医院129株耐甲氧西林或者耐红霉素葡萄球菌基因,同时优化PCR.用CY5标记上游引物5'端,制作GeXP多重PCR引物.应用多重PCR扩增多重耐药基因核酸,产物经琼脂糖电泳与GeXP毛细管电泳,分析电泳图优化PCR.应用优化后的GeXP多重PCR扩增43株葡萄球菌,验证应用效果.结果 129株葡萄球菌筛出7种基因(16S rDNA、mecA、ermA、ermB、ermC、sat4和msrA).16S rDNA、mecA、ermA、ermB、ermC和msrA引物特异性好,但不同核酸的sat4基因能扩增出两种不同大小片段.建立的GeXP多重PCR能同时检出所有靶基因.43株葡萄球菌的检测结果与表型检测(VITEKⅡCompact System)相符;与“PCR+琼脂糖电泳”相比:sat4符合率为97.67%(42/43),无统计学差异(P>0.05);msrA符合率为95.35%(41/43),无统计学差异(P>0.05);ermA、mecA、16S rDNA、ermB和ermC符合率均为100%(43/43).结论 采用CY5标记特异引物应用于GeXP系统检测葡萄球菌多重耐药基因的方法可行,其特异性与敏感性高,若采用更多引物,其检测通量可进一步提高.
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MRSA感染33例临床分析
甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(methici llinresistant staphylococcus aureus,MRSA)是引起医院获得性感染的主要病因,在第一个耐青霉素霉的β内酰胺酶类抗生素甲氧西林用于临床不久,便在英国发现了世界上首例MRSA[1].目前,MRSA已成为医院获得性感染的常见致病菌之一,且常为多重耐药菌[2],治疗较为困难.本文对我院重症医学科(ICU)检出的33株MRSA进行临床分析,旨在为ICU患者MRSA感染的防治提供参考依据.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染与抗菌药物选择
新近,美国传染病专家艾伦(Allan)博士指出,近10~20年细菌感染的病原学发生了重大变化,尽管G-菌仍然是主要病原菌,但是G+菌的感染率明显增多了,突出的是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染已构成了全球性问题[1].据国内(1994)医院调查34%~51%的金黄色葡萄球菌株对甲氧西林耐药,因此,如何选药和制定合理有效的抗菌方案非常重要.
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复合溶葡萄球菌酶治疗烧伤创面甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌感染
甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)是医院感染的重要病原菌之一,在烧伤后期各种创面感染中,MRSA占多数[1].由于MRSA呈多重耐药性,菌株的增加已成为医院感染控制的难题[2].在烧伤治疗中,残余创面一旦发生MRSA感染,其治疗难度较大.
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太原市中心医院细菌耐药性情况的调查分析
近年来,细菌耐药趋势日趋严峻,成为医学界备受关注的问题.具有重要临床意义的耐药菌如:甲氧西林耐药的葡萄球菌(MRS)、万古霉素耐药的肠球菌(VRE)、β-内酰胺类抗生素耐药的革兰阴性杆菌,常为多重耐药菌,且呈逐年增多的趋势,致使这些细菌所致感染的治疗成为临床上的难题,对感染患者的生命构成了威胁.因此,WHO和世界各国政府的卫生部门制定了大量的政策和规范,但随地域、人群、病种、用药频率变化,病原菌的特点及分布而有很大不同,有必要对病原菌尤其是多重耐药菌的耐药情况进行全面的监测,使临床医生熟知病原菌耐药水平变化的规律及趋势,为治疗感染性疾病用药提供依据.