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甲苯二异氰酸酯职业暴露对血清中基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制剂-1水平的影响及其与肺功能的相关性分析
目的 探讨甲苯二异氰酸酯(TDI)职业暴露对血清中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂-1 (TIMP-1)水平的影响及其与肺功能的相关性.方法 采用横断面研究设计,于2014年10月,以整群抽样方法选择我国西部地区某TDI生产厂的作业工人为暴露组,共61名,纳入工种包括装桶工、巡检工、制造工.根据各工种外暴露浓度的不同,将装桶工归为高暴露组,巡检工和操作工归为低暴露组.另根据年龄、性别匹配原则,选择该工厂内与暴露组工人工作强度相似但不接触TDI及其他致敏物质的企业管理人员作为对照组,共计58名.通过问卷调查获取调查对象性别、年龄、工龄、吸烟及饮酒情况、个人及家族过敏史、职业史及近期患病情况.用8h加权平均浓度(8h-TWA)表示TDI空气中外暴露水平.采用ELISA检测血清中MMP-9和TIMP-1的水平,采用便携式肺功能仪测定用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气容积(FEV1.0).采用Spearman相关分析法分析MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1与FVC、FEV1.0及工龄的关系.结果 暴露组调查对象作业场所空气中TDI 8h-TWA的平均值为0.39 mg/m3,其中,装桶工为0.76 mg/m3,操作工和巡检工均为0.25 mg/m3.对照组、低暴露组及高暴露组血清中MMP-9的水平分别为(807.21±347.70)、(586.91±317.50)、(388.94±312.01)ng/ml(x2=16.69,P＜0.001);MMP-9/TIMP-1的P50(P25～P75)分别为4.67(2.87～6.68)、2.3(1.44～3.48)、1.11(0.59～1.48) (x2=39.42,P＜0.001);TIMP-1分别为(173.44±72.67)、(236.12±51.98)、(302.81±44.39) ng/ml(F=20.09,P＜0.001).暴露组中肺功能FVC、FEV1.0和FEV 1.0/FVC的P50(P25～P75)分别为92.8％(86.0％～101.8％)、85.5％(76.7％～92.8％)和112.5(108.2～118.5),均低于对照组[124.3％(107.9％～144.2％)、142.7％(119.1％～155.7％)和129.2(123.5 ～ 134.0)](Z值分别为7.70、8.97、8.62,P值均＜0.001).Spearman相关分析结果显示,MMP-9水平与肺功能指标FEV1.0、FEV 1.0/FVC均存在正相关关系(r值分别为0.27、0.25,P值均＜0.05);TIMP-1水平与FVC、FEV1.0和FEV 1.0/FVC均存在相关关系(r值分别为-0.33,-0.39,-0.39,P值均＜0.05);MMP-9水平与暴露时间呈负相关关系(r=-0.26,P=0.040);MMP-9/TIMP-1比值分别与FVC、FEV 1.0、FEV 1.0/FVC呈正相关(r值分别为0.34,0.44,0.40,P值均＜0.05).结论 TDI职业暴露可以引起MMP-9和MMP-9/TIMP-1降低,且与肺功能存在相关关系,在一定程度上反映了TDI职业暴露所导致的呼吸系统炎性损伤.
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益气解毒软肝汤治疗乙型肝炎后肝硬化38例
目的:探讨益气解毒软肝汤治疗乙型肝炎后肝硬化(代偿期)的临床疗效及作用机制.方法:将76例患者随机按数字法分为观察组和对照组各38例.两组采用保肝、抗病毒等常规治疗,对照组采用扶正化瘀胶囊,1.5g/次,3次/d,口服.观察组益气解毒软肝汤,l剂/d,常规水煎分2次服用.疗程24周.检测治疗前后丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、计算白蛋白与球蛋白比值(A/G)等肝功能指标,检测治疗前后血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及血清Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)等肝纤维化指标,采用彩超测定脾脏厚度和门静脉、脾静脉内径(DPV、DSV)和流速(VPV,VSV),检测治疗前后血清金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板源性生长因子(PDGF)水平.结果:治疗后观察组总体疗效为81.57％,优于对照组的60.52％ (P＜0.01);治疗后观察组ALT,AST,TBIL均较治疗前下降,并低于对照组(P＜0.01);治疗后两组ALB和A/G均上升,观察组高于对照组(P ＜0.05或P＜0.01);观察组血清HA,LN,PCⅢ及Ⅳ-C水平均低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组DPV,DSV,VPV,VSV及脾厚改善均优于对照组(P＜0.05或P＜0.01);治疗后观察组血清TIMP-1,TGF-β1,PDGF水平均明显下降,并低于对照组(P＜0.01).结论:益气解毒软肝汤具有护肝降酶、抗纤维化和肝硬化作用,作用机制可能与其降低血清IMP-1,TGF-β1,PDGF水平有关.
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MMP-9和TIMP-1在类风湿性关节炎发病机制中作用的探讨
目的 观察基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue metalloproteinase inhibitor-1,TIMP-1)在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜组织及滑膜下组织的阳性表达,探讨其在RA发病中的相互作用.方法 应用免疫组织化学ABC法检测MMP-9和TIMP-1在65例RA患者组织中的表达情况,比较其在滑膜和滑膜下组织中的分布特点.结果 RA组MMP-9,TIMP-1表达的阳性率(60.00％和73.85％)高于骨性关节炎(osteoarthritis,OA)组(10.00％和30.00％)及大致正常滑膜组(0.00％和0.00％)(均P＜ 0.05).MMP-9以及TIMP-1在RA的滑膜被覆细胞中表达的阳性率(69.23％和60.00％)高于滑膜下组织(53.85％和35.38％)(均P＜ 0.05).镜下可见MMP-9及TI MP-1阳性细胞表达产物呈棕色细颗粒状,位于细胞浆及细胞膜.且MMP-9与TIMP-1之间表达有显著的相关性(rδ=0.783,P=- 0.001).结论 MMP-9和TIMP-1在RA组织中的表达均明显升高,且两者表达的阳性率具有显著相关性,从而证实其在RA的发病机制中有一定的关联作用.
关键词： 关节炎 类风湿 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶1组织抑制剂 免疫组织化学 -
MMP-9及其抑制剂TIMP-1与多发性硬化活动相关性研究
目的探讨血清和脑脊液中基质金属蛋白酶（ MMP）-9及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂（ TIMP）-1与多发性硬化发病及疾病活动的相关性。方法本实验共分四组：多发性硬化组、神经系统炎性疾病（OIND）组、神经系统非炎性疾病（NIND）组和健康人群组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清MMP-9、血清和脑脊液中TIMP-1的表达水平；采用酶谱法检测脑脊液中MMP-9水平；以MRI检查为多发性硬化疾病活动性判断标准，分析比较多发性硬化活动组和非活动组MMP-9及TIMP-1水平。结果多发性硬化组血清MMP-9水平显著高于NIND组（ P＜0.05）和健康人群组（ P＜0.001），血清TIMP-1水平显著低于OIND组（ P＜0.001）、NIND组（ P＜0.001）和健康人群组（ P＜0.001）；多发性硬化组脑脊液中MMP-9水平高于NIND组（ P＜0.05），脑脊液中TIMP-1水平显著低于OIND组（ P＜0.05）；多发性硬化活动期患者血清MMP-9水平、MMP-9/TIMP-1比值分别显著高于非活动期（ P均＜0.05），活动期血清TIMP-1水平与非活动期无统计学差异。结论检测血清和脑脊液中MMP-9及TIMP-1水平对多发性硬化疾病活动性的监测有一定参考价值。
关键词： 多发性硬化 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶1组织抑制剂 -
慢性阻塞性肺疾病患者肺血管重建与MMP-9及TIMP-1表达的关系
目的：探讨慢性阻塞性肺疾病患者肺血管中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的表达与肺血管重建的关系及临床意义。方法取60例因肺鳞癌行肺叶切除的癌旁组织标本，其中慢性阻塞性肺疾病组30例和对照组30例，图像分析系统测定肺动脉管壁面积/管总面积（WA%）、管壁厚度/血管外径（WT%）。免疫组化法测定肺血管平滑肌细胞MMP-9、TIMP及平滑肌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）表达，并分析其与血管重建相关性。结果（1）慢性阻塞性肺疾病组肺血管炎症程度、WA%、WT%显著高于对照组（P＜0.01）。（2）肺血管平滑肌细胞PCNA、MMP-9、TIMP-1的表达水平与对照组相比明显升高（P＜0.01）。（3）相关分析：慢性阻塞性肺疾病组MMP-9、TIMP-1表达水平与血管炎症程度、WA%、WT%及PCNA呈显著正相关（P＜0.01），多重线性回归分析显示MMP-9、TIMP-1表达水平的上调是影响肺血管重建（WA%、WT%）的主要因素（P＜0.01）。结论 MMP-9、TIMP-1表达增强引起细胞外基质异常降解，诱导平滑肌增殖，促进炎症细胞迁移，在肺血管重塑过程中起到了重要作用。
关键词： 肺疾病 慢性阻塞性 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶1组织抑制剂 血管重建 -
霉酚酸酯对实验性大鼠IgA肾病的MMP-9、TIMP-1的影响
目的：观察霉酚酸酯（MMF）对实验性IgA肾病（IgAN）大鼠肾组织基质金属蛋白酶（MMP-9）及其组织抑制剂（TIMP-1）表达的影响，探讨 MMF 对 IgAN 的治疗作用以及其可能的作用机制。方法将24只（6周龄）雄性Wistar大鼠随机分为3组（每组各8只），分别为模型组、MMF组、对照组。模型组、MMF组均采用灌服牛血清白蛋白（BSA）和尾静脉注射脂多糖（LPS）的方法建立IgAN模型，共8周，于第9周起MMF组给MMF每日灌胃1次，按10 mg·kg-1·d-1，对照组和模型组给予等量蒸馏水灌胃，持续至12周末。三组均每4周检测1次尿红细胞计数、24 h尿蛋白定量；于12周末测定血生化指标，并观察肾脏病理改变和免疫复合物沉积情况，免疫组织化学方法检测肾组织中MMP-9、TIMP-1的表达。结果前4周，各组尿红细胞计数、尿蛋白定量比较差异无统计学意义（P＞0.05）；第6周至8周末，模型组与 MMF组尿红细胞及尿蛋白定量明显升高，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；第10～12周末，MMF 组尿红细胞及尿蛋白定量较模型组明显减少，差异有统计学意义（P＜0.05）；血生化指标各组间无统计学差异（P＞0.05）。与对照组相比，模型组肾小球系膜区增宽，系膜细胞、系膜基质增生，伴有强IgA荧光及较多电子致密物沉积，MMP-9、TIMP-1均明显升高（P＜0.05），其中MMF组上述病理改变均明显轻于模型组，MMP-9及TIMP-1表达均明显低于模型组（P＜0.05）。结论 MMF可降低尿蛋白，减少免疫复合物在肾组织中的沉积，推测其治疗IgAN的病理机制可能是通过调节MMP-9、TIMP-1的表达延缓肾脏纤维化。
关键词： 肾小球肾炎 IgA 基质金属蛋白酶类 金属蛋白酶1组织抑制剂 霉酚酸酯 -
不同来源TIMP-1基因表达对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为影响的研究
目的 研究不同来源金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与转移特性的影响.方法 分别构建内源性和外源性TIMP-1表达乳腺癌细胞模型,检测MDA-MB-231细胞、MDA-MB-231(TIMP-1)细胞和MDA-MB-231(AdTIMP-1)细胞在体外增殖速度、克隆形成、重组基底膜侵袭抑制试验、细胞移动试验和SCID免疫缺陷小鼠移植瘤形成试验进行体内外研究.结果 通过细胞体外增殖速度检测显示,内源性TIMP-1的表达有可能促进肿瘤细胞的生长;外源性TIMP-1的表达有可能抑制肿瘤细胞的生长.无论是内源性还是外源性的TIMP-1表达均不影响肿瘤克隆形成能力和肿瘤形成能力.内源性TIMP-1的表达有可能促使肿瘤细胞的移动能力增强;外源性TIMP-1表达不影响肿瘤细胞的移动能力.内、外源性TIMP-1对MDA-MB-231的侵袭能力均有抑制作用,但外源性TIMP-1的抑制作用更大.通过体内致瘤实验显示,内源性TIMP-1的表达可显著促进肿瘤生长;外源性TIMP-1的表达可显著抑制肿瘤生长.结论 不同来源的TIMP-1对MDA-MB-231细胞的生物学行为有不同影响.
关键词： 乳腺肿瘤 金属蛋白酶1组织抑制剂 肿瘤形成过程 -
荧光定量聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶组织抑制因子-1方法的建立
目的构建含有金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的重组质粒并以其为模板建立荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测TIMP-1的标准曲线,为荧光定量PCR准确检测TIMP-1奠定基础.方法提取大鼠星状细胞系HSC-T6的mRNA,经RT-PCR扩增TIMP-1基因后与pGMT-Vector 连接,转化到大肠杆菌DH5α,以筛选得到的阳性克隆质粒作为标准品进行梯度稀释,分别用Taqman荧光探针技术和SYBR Green I荧光染料技术进行荧光定量PCR检测,建立标准曲线,并对两者结果进行了对比.同时进行普通PCR检测,与荧光定量PCR方法检测结果进行比较.结果重组质粒经PCR扩增及序列测定,表明pGMT-TIMP-1基因已成功克隆.以不同稀释水平的标准品质粒进行荧光定量PCR扩增, 应用Taqman荧光探针技术建立的标准曲线的线性检测范围为7×104～7×108拷贝,检测灵敏度为7×104拷贝;应用SYBR Green I荧光染料技术的线性检测范围为7×106～7×108拷贝,检测灵敏度为7×106拷贝,且熔解曲线显示出现非特异性扩增;两种技术相对于普通PCR技术均具有定量功能.结论所构建的pGMT-TIMP-1基因荧光定量PCR检测标准品应用Taqman荧光探针技术建立的标准曲线线性关系好, 灵敏度和特异性高,准确可靠,此方法可作为荧光定量PCR检测TIMP-1基因的标准方法.
关键词： 金属蛋白酶1组织抑制剂 聚合酶链反应 荧光染料 -
金属蛋白酶-2和金属蛋白酶组织抑制物-1与糖尿病肾病关系的实验研究
目的观察链脲佐菌素(STZ)实验性糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)蛋白的表达及功能、形态学改变,探讨MMP-2、TIMP-1在糖尿病肾病(DN)发生机制中的意义. 方法 20只雄性Wistar大鼠随机分为糖尿病组和正常对照组,分别于第1、2、4、6、8周测定尿白蛋白排泄率(UAER),第9周用Western印迹方法检测MMP-2、TIMP-1蛋白表达水平,电镜观察肾小球基底膜厚度(GBMT). 结果糖尿病组较正常组TIMP-1蛋白表达明显增加,MMP-2蛋白表达显著降低(P＜0.01).4、6、8周UAER显著增加,GBMT明显增厚(P＜0.01).电镜发现糖尿病组肾小球基底膜弥慢性增厚,局部有系膜细胞插入和双轨征. 结论持续高血糖可使大鼠肾脏MMP-2下降,TIMP-1增加.导致肾小球基底膜增厚,UAER增加.MMP-2、TIMP-1失衡可能对糖尿病肾病功能和形态学改变有重要意义.
关键词： 糖尿病肾病 基质金属蛋白酶 金属蛋白酶1组织抑制剂 -
脐带间充质干细胞对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预机制初探
目的 观察脐带间充质干细胞(UC-MSC)对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的干预作用.方法 体外分离、培养新生儿UC-MSC.将88只6～8周C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法分为4组,对照组(20只)气管内注入磷酸盐缓冲液(PBS),3d后尾静脉注射生理盐水；干细胞组(20只)气管内注入PBS,3d后尾静脉注射UC-MSC；博来霉素组(24只)气管内注入博来霉素,3d后尾静脉注射生理盐水；博来霉素+干细胞组(24只)气管内注入博来霉素,3d后尾静脉注射UC-MSC,于实验第21天处死各组小鼠,取小鼠肺组织,行HE、Masson和免疫组织化学染色检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达.结果 (1)肺组织病理:博来霉素+干细胞组肺泡炎、纤维化程度及胶原蛋白沉积较博来霉素组明显减轻(分别为1.55 ±0.51和2.16 ±0.77;1.45±0.60和2.32±0.82,均P＜0.05),对照组和干细胞组差异无统计学意义(分别为0.35 ±0.49和0.37 ±0.50;0.45 ±0.69和0.32±0.58,均P＞0.05).(2) MMP-2表达含量:博来霉素+干细胞组MMP-2的表达明显低于博来霉素组(分别为1.59 ±0.59和2.37 ±0.68,P＜0.05),对照组和干细胞组差异无统计学意义(分别为0.80±0.69和0.84±0.77,P＞0.05).(3) TIMP-1表达含量:博来霉素+干细胞组TIMP-1的表达明显高于博来霉素组(分别为1.95 ±0.58和0.79 ±0.71,P＜0.05),对照组和干细胞组差异无统计学意义(分别为1.10±0.72和1.32±0.58,P＞0.05).结论 UC-MSC植入可以减轻博来霉素导致的小鼠肺纤维化程度,可能是通过影响MMP-2和TIMP-1的表达而发挥作用；UC-MSC对正常肺组织无影响.
关键词： 肺纤维化 博来霉素 间质干细胞 基质金属蛋白酶类 金属蛋白酶1组织抑制剂 -
基质金属蛋白酶9及其抑制剂与老年高血压患者颈动脉粥样硬化程度的相关性
目的 探讨基质金属蛋白酶9( metalloproteinase-9,MMP 9)及组织基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP 1)与老年高血压患者颈动脉粥样硬化程度的相关性.方法 选择老年高血压患者330例,应用高分辨超声测量颈动脉内膜中层厚度(IMT)及斑块情况,特患者分为4组:IMT正常组(26例)、IMT增厚组(80例)、稳定性斑块组(135例)和不稳定性斑块组(89例),测定血清生化指标、MMP 9、TIMP-1水平,进行组间比较.结果 IMT正常组、IMT增厚组、稳定性斑块组和不稳定性斑块组血清MMP-9、TIMP-1水平逐渐增高,不稳定性斑块组MMP-9/TIMP-1比值明显高于其他3组,差异有统计学意义(P＜0.01).取所有高血压患者进行多元线性逐步回归分析,颈动脉IMT与年龄、收缩压、LDL-C、空腹(一)糖相关(P＜0.05,P＜0.01)；logistic回归分析显示,颈动脉是否存在斑块与体重指数、收缩压、LDL-C、logMMP-9相关(P＜0.05,P＜0.01).取颈动脉斑块患者进行logistic回归分析,斑块是否稳定与收缩压、LDL-C、logMMP 9(模型1,P＜0.05,P＜0.01)或收缩压、LDL-C、logMMP-9/TIMP-1比值(模型2,P＜0.05)相关.结论 老年高血压患者血清MMP-9水平、MMP-9/TIMP-1比值与颈动脉是否存在斑块及其稳定性密切相关.
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血清基质金属蛋白酶9和组织基质金属蛋白酶抑制剂1与急性脑梗死的临床关系
目的 探讨脑梗死患者血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的动态变化及对临床预后的影响.方法 选择急性脑梗死患者60例,按照TOAST分型方法将脑梗死患者分为3组,心源性脑栓塞(CE)组,大动脉粥样硬化性卒中(LAA)组,腔隙性脑梗死(SA)组,每组20例;另选健康体检者20例作为对照组,分别测定急性脑梗死患者发病24 h内,第5、10天的血清MMP-9、TIMP-1含量,记录患者入院时的美国国立卫生研究所脑卒中量表(NIHSS)评分;记录发病1、6个月时的Barthal指数(BI)采评价预后.结果 发病后24 h内,脑梗死各组患者血清MMP-9、TIMP-1舍量较对照组均明显升高(P＜0.05),其中,CE组和LAA组MMP-9、TIMP-1含量持续至第5天仍未下降,而SA组已逐渐降至正常水平.发病后24 h内血清MMP-9含量与相应时间段NIHSS评分呈正相关.近期预后较好患者发病24 h内血清MMP-9含量明显低于预后较差患者(P＜0.05).结论 MMP-9与病情的严重程度有关.脑梗死后24 h内的血清MMP-9含量是预后的独立预测因素.
关键词： 基质金属蛋白酶9 金属蛋白酶1组织抑制剂 脑梗塞 预后 -
CT联合血清指标评价脑梗死患者颈动脉粥样硬化的临床价值
目的 探讨16层螺旋CT联合基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)用于老年脑梗死患者颈动脉粥样硬化的临床价值.方法 选择我院神经内科收治的186例脑梗死患者作为A组,依据超声检查将患者分为不稳定斑块组(A-1组,107例)、稳定斑块组(A-2组,43例)和无斑块组(A-3组,36例);同期收治1 90例无症状颈动脉粥样硬化患者作为B组,依据超声检查分为不稳定斑块组(B-1组,33例)、稳定斑块组(B-2组,55例)和无斑块组(B-3组,102例),同期体检的90例健康者作为对照组,所有研究对象入院后接受多层螺旋CT血管成像(MSCTA)、多普勒超声检查,并取血测定血清MMP-9、TIMP-1水平.比较各组颈动脉狭窄情况、斑块检出情况,并分析MMP-9、TIMP-1诊断脑梗死患者不稳定斑块的效果.结果 MSCTA颈动脉狭窄检出A组轻度狭窄率显著低于B组(23.1％ vs 48.9％,P=0.000),重度狭窄率显著高于B组(48.4％ vs 16.8％,P=0.000);MSCTA检出A组、B组的斑块稳定性情况与超声检查一致率分别为81.7％和83.2％;MSCTA检出A组稳定斑块与不稳定斑块[(147±71)HU vs (11±20)HU]、B组稳定斑块与不稳定斑块[(155±81)HU vs(9±21)HU]的CT测量值比较差异有统计学意义(P=0.000);与对照组比较,A-1组、A2组、B-1组血清MMP-9、TIMP-1水平显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01).MMP-9、TIMP-1诊断脑梗死患者不稳定斑块的ROC曲线下面积分别为0.891、0.814.结论 MSCTA能够准确检测老年脑梗死患者颈动脉粥样硬化狭窄,但容易误判斑块性质,血清MMP-9、TIMP-1可有效诊断老年脑梗死患者不稳定斑块,可作为MSCTA的重要补充.
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辛伐他汀对兔粥样硬化髂动脉基质金属蛋白酶组织抑制物-1表达的影响
目的研究辛伐他汀对动脉粥样硬化兔髂动脉基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响.方法 18只家兔分为正常对照组(正常饮食,5只)、基础对照组(球囊和高脂饮食,7只)和辛伐他汀治疗组(球囊、高脂饮食和辛伐他汀,6只).球囊损伤后4周处死,取一侧病变髂动脉做病理切片,取另一侧病变髂动脉抽提总RNA和总蛋白,分别应用半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western蛋白印迹法(Western blot)测定TIMP-1mRNA和蛋白质的表达. 结果辛伐他汀可以显著降低家兔血浆总胆固醇,抑制动脉粥样硬化的形成;增加动脉粥样硬化兔髂动脉组织TIMP-1的表达, 正常对照组、基础对照组、辛伐他汀治疗组动脉壁TIMP-1mRNA的相对值分别为1.57±0.11, 2.72±0.10, 3.33±0.28, 相互间有统计学差异(P<0.05);正常对照组、基础对照组、辛伐他汀治疗组Western blot检测结果分别为2.72±1.16, 7.51±1.44, 16.90±1.45, 相互间有显著性差异(P< 0.000 1);免疫组化观察结果也提示TIMP-1的表达增加.结论辛伐他汀可以显著增加动脉粥样硬化兔血管组织TIMP-1的表达,抑制动脉粥样硬化的形成.
关键词： 辛伐他汀 动脉粥样硬化 金属蛋白酶1组织抑制剂 -
人金属蛋白酶1组织抑制剂基因表达对大鼠心肌梗死后炎症反应的影响及机制
目的 探讨携带人金属蛋白酶1组织抑制剂(hTIMP-1)的重组腺病毒(Ad-hTIMP-1)对大鼠心肌梗死后炎症反应的影响及机制.方法 将Wistar雄性大鼠按照随机数字表法分为假手术组、生理盐水组、Ad-Track组和Ad-hTIMP-1组(每组各8只大鼠).除假手术组外,其余各组大鼠均通过结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型.生理盐水组、Ad-Track组和Ad-hTIMP-1组分别在心肌梗死部位注射生理盐水、空载体重组腺病毒(Ad-Track)和Ad-hTIMP-1.4周后以超声心动图检测各组大鼠的心功能指标,然后处死大鼠并留取心脏组织.以苏木精-伊红(HE)和Masson染色法观察各组大鼠的心肌组织形态,实时荧光定量PCR检测各组心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-d)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和C反应蛋白(CRP)的mRNA表达水平,免疫组织化学法检测各组IL-6和CRP的蛋白表达水平.结果 (1)超声心动图显示,假手术组、生理盐水组、Ad-Track组和Ad-hTIMP-1组的左心室收缩末期内径分别为(4.25±0.46)、(5.10±0.72)、(4.88±0.64)和(4.13±0.35)mm,生理盐水组和Ad-Track组均高于假手术组和Ad-hTIMP-1组(P均＜0.05);假手术组、生理盐水组、Ad-Track组和Ad-hTIMP-1组的左心室射血分数分别为(72.46±5.74)％、(64.27±8.52)％、(64.65±3.90)％和(71.55±6.95)％,短轴缩短率分别为(36.90±4.97)％、(29.03±3.40)％、(30.95±2.51)％和(36.31±5.68)％,生理盐水组和Ad-Track组的左心室射血分数和短轴缩短率均低于假手术组和Ad-hTIMP-1组(P均＜0.05).(2)HE和Masson染色显示,Ad-hTIMP-1组无心肌细胞坏死,有少量炎性细胞浸润和间质纤维化.(3)实时荧光定量PCR显示,Ad-hTIMP-1组的TNF-α、IL-6、IL-10和CRP mRNA表达水平均低于生理盐水组(P均＜0.05);Ad-hTIMP-1组的TNF-cα、IL-10和CRPmRNA表达水平均低于Ad-Track组(P均＜0.05).(4)免疫组织化学法检测显示,生理盐水组和Ad-Track组的IL-6和CRP的蛋白表达水平均高于Ad-hTIMP-1组(P均＜0.05).结论 重组腺病毒Ad-hTIMP-1可改善大鼠心肌梗死后心功能,其机制可能与hTIMP-1抑制炎症反应,减少炎性细胞因子TNF-α、IL-6和CRP的表达有关.
关键词： 心肌梗死 炎症 金属蛋白酶1组织抑制剂 -
金属蛋白酶1组织抑制因子在大鼠自体移植静脉中的表达研究
目的 研究金属蛋白酶1组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)在大鼠自体移植静脉血管平滑肌细胞中的表达和动态变化的意义.方法 建立大鼠自体血管移植模型,移植后不同时间分别切取移植静脉,应用HE染色、免疫组织化学和原位杂交方法动态观察TIMP-1的表达和变化情况.结果 移植血管组织病理学改变:血管移植后1周可见内膜增生(intimal hyperplasia:IH),2～4周达到高峰.原位杂交结果:TIMP-1mRNA在移植后24 h出现细胞阳性表达,72 h阳性表达明显增多,1-2周时表达达到高峰,与移植后1 d相比,差异有统计学意义(P<0.01).免疫组织化学染色:静脉移植后72 h出现TIMP-1的表达,1周时增加明显,2周时表达强,与移植后1 d相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 在自体移植静脉中存在TIMP-1的激活.自体静脉移植于动脉后,内源性TIMP-1的分泌增加不足以抑制内膜增生.
关键词： 移植 金属蛋白酶1组织抑制剂 内膜增生 静脉移植 -
阴道壁结缔组织中基质金属蛋白酶及其组织抑制物的表达
目的 探讨女性压力性尿失禁(SUI)患者阴道壁结缔组织中基质金属蛋白酶(MMP)9及其组织抑制物(TIMP)1的mRNA表达变化及其与SUI发病的关系.方法 收集24例有完整随访资料的女性SUI患者的阴道壁结缔组织标本作为研究组,根据年龄不同分为＞60岁和≤60岁两类,每组12例;另选7例非SUI妇女作为对照组,应用RT-PCR法检测MMP-9和TIMP-1 mRNA表达量.以MMP-9、TIMP-1与内参照3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的扫描灰度,计算曲线下峰面积作为PCR产物含量.结果 (1)研究组中＞60岁和≤60岁者MMP-9 mRNA的表达量分别为0.56±0.20和0.56±0.19,均高于对照组的0.37±0.18,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);＞60岁和≤60岁者MMP-9 mRNA的表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)研究组中＞60岁和≤60岁者TIMP-1 mRNA的表达量分别为0.23±0.11和0.31±0.12,均低于对照组的0.41±0.13,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),TIMP-1 mRNA的表达量在＞60岁和≤60岁者间比较,差异也有统计学意义(P＜0.05). (3)MMP-9/TIMP-1比值,研究组中＞60岁和≤60岁者及对照组分别为2.49±1.82、1.82±1.58、0.90±1.38,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 SUI患者MMP-9的高表达和TIMP-1的低表达,导致MMP/TIMP比值升高,年龄越大,MMP/TIMP比值升高越显著;MMP与TIMP比例失衡,在SUI的发病过程中可能起重要作用.
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妊娠合并心脏病患者孕晚期左心室结构及功能与基质金属蛋白酶1及其组织抑制物1水平变化的相关性
目的 探讨妊娠合并心脏病患者左心室结构及功能与血清基质金属蛋白酶1(MMP-1)及其组织抑制物1(TIMP-1)水平的相关性,评价MMP-1及TIMP-1在妊娠合并心脏病患者心脏重新构建过程中的临床价值.方法 收集2007年10月至2008年7月上海交通大学医学院附属仁济医院产科收治的孕晚期妊娠合并心脏病孕妇58例,根据左心室肥大和肺动脉高压情况分为:A组:有心慌、胸闷等临床症状,但无左心室肥大者17例;B组:有心慌、胸闷等临床症状及左心室肥大,但无肺动脉高压者15例;C组:有心慌、胸闷等临床症状及左心室肥大,且有肺动脉高压者26例,其中C组患者根据肺动脉压情况又分为轻度[肺动脉压30～49 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)]11例,中度(肺动脉压50-79 mm Hg)9例,重度(肺动脉压≥80 mm Hg)6例.另选同期正常妊娠妇女15例作为对照组.采用多普勒彩色超声心动仪分别测定各组孕妇妊娠晚期的左心室结构和功能指标,包括左心窒重量指数(LVMI)、舒张未期内径(LVEDd)、左心室射血分数(EF)、二尖瓣舒张早期充盈峰(E峰)、舒张晚期充盈峰(A峰)及其比值(E/A);采用酶联免疫法测定各组孕妇血清MMP-1和TIMP-1水平.结果 (1)C组孕妇LVMI为(148±7)g/m~2、LVEDd为(58.9±3.5)mm,E峰为(50±10)cm/s,明显高于对照组及A组、B组(P＜0.01);EF为(51.0±4.4)%,E/A比值为(0.6±0.3),与对照组及A组、B组比较,均显著降低(P＜0.01).(2)C组重度肺动脉高压孕妇LVMI为(150±7)g/m~2、LVEDd为(69.7±3.4)mm,均明显高于轻度及中度孕妇(P＜0.01),A峰[(86±8)cm/s]升高(P＜0.05);E峰[(44±9)cm/s]下降(P＜0.05),EF为(45.6±2.6)%,E/A比值为(0.52±0.17),均明显低于轻度及中度孕妇(P＜0.01).(3)C组孕妇血清MMP-1[(41±10)μg/L]及TIMP-1[(393±37)μg/L]水平与对照组、A组和B组比较,显著升高(P均＜0.01).(4)C组重度肺动脉高压孕妇血清MMP-1[(42±27)μg点/L]及TIMP-1[(411±31)μg又/L]水平较轻度孕妇显著升高(P＜0.01).(5)相关性分析显示,A组、B组及C组孕妇血清MMP-1水平与TIMP-1呈正相关(r=0.587,P＜0.01);MMP-1水平与LVMI、LVEDd呈正相关(r=0.782,P＜0.01;,=0.648,P＜0.01);与EF旱负相关(r=-0.587,P＜0.01).(6)C组重度肺动脉高压孕妇中有3例发生心功能衰竭,其血清MMP-1水平均＞50μg/L,血清TIMP-1水平均＞450μg/L.结论 (1)妊娠合并心脏病孕妇妊娠晚期存在心脏重新构建的特点,并且随着左心室肥大和肺动脉高压严重程度的加重而明显化.(2)血清MMP-1和TIMP-1水平变化与妊娠合并心脏病孕妇的左心室结构、功能及临床症状的严重程度密切相关,并对妊娠合并心脏病孕妇心功能衰竭发生可能有预测价值.
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基质金属蛋白酶9及其组织抑制剂1在子宫内膜异位症组织中的表达
目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其组织抑制剂1(TTMP-1)在子宫内膜异位症(内异症)患者异位内膜及在位内膜中的表达,及其在内异症发病中的作用.方法选取38例根据美国生育学会修订的内异症分期法,诊断为内异症患者的卵巢内膜异位囊肿标本38份、腹膜红色病变标本16份及同期在位内膜35份组织作为研究组,以及非内异症患者的子宫内膜标本20份作为对照组.采用RT-PCR半定量技术,检测上述不同组织中MMP-9 mRNA及TIMP-1mRNA的表达率及表达强度.结果两组所有标本均有TIMP-1mRNA表达,部分标本有MMP-9 mRNA表达.研究组中,卵巢异位囊肿及腹膜红色病变组织MMP-9 mRNA表达率分别为45%及56%,表达强度分别为0.46±0.22及0.33±0.12;同期在位内膜MMP-9 mRNA表达率为57%,表达强度为0.49±0.28.卵巢异位囊肿、腹膜红色病变及同期在位内膜组织 TIMP-1mRNA表达强度分别为1.67±0.79、1.45±0.68及2.31±1.21,前两者与后者比较,差异有统计学意义(P<0.05).研究组在位内膜及对照组MMP-9的表达率分别为57%及45%;表达强度分别为0.49±0.28及0.29±0.12,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).研究组在位内膜及对照组TIMP-1mRNA的表达强度分别为2.31±1.21及2.40±0.89.结论内异症患者在位内膜MMP-9 mRNA的表达增强,促进了内膜的异位种植.异位内膜TIMP-1mRNA的表达减弱,可促使内异症病变的发展.
关键词： 子宫内膜异位症 明胶酶B 金属蛋白酶1组织抑制剂 -
原因不明性不孕患者子宫内膜基质金属蛋白酶-9 mRNA的表达及其性激素调节
目的检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP-1)mRNA在原因不明性不孕患者黄体中期子宫内膜中的表达,及与性激素的相关性.方法采用原位杂交、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对38例原因不明不孕患者(研究组)和20例正常生育期妇女志愿者或男方因素不孕患者(对组照)的黄体中期子宫内膜行MMP-9、TIMP-1 mRNA检测,同期放射免疫法测定雌二醇(E2)、孕酮(P)水平.结果子宫内膜腺上皮、间质细胞胞浆、胞核均有MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达,研究组较对照组表达少,研究组黄体中期子宫内膜MMP-9 mRNA表达水平为0.42±0.19,显著低于对照组的0.57±0.19(P<0.05);研究组TIMP-1 mRNA表达水平为0.59±0.19,显著低于对照组的0.81±0.20(P<0.01).研究组黄体中期血清P水平为(34±15)nmol/L,显著低于对照组的(53±17)nmol/L(P<0.01),而血清E2水平与对照组比较,差异无显著性(P>0.05).对照组P水平与MMP-9 mRNA表达呈正相关(r=0.722,P<0.01),而研究组无相关性(P>0.05);两组P水平与TIMP-1 mRNA,E2与MMP-9、TIMP-1 mRNA均无相关性(P>0.05).结论原因不明不孕患者黄体中期P水平影响MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达并致活性下降,可能与不孕有关.
