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安徽省281名一般人群外周血淋巴细胞核分裂指数
目的 研究安徽省一般人群外周血淋巴细胞核分裂指数(NDI)的参考值范围,并分析可能的影响因素.方法 2010-2011年在安徽地区招募无职业性遗传毒物接触史及慢性疾病史的一般人群281名.采用调查问卷的方式收集调查对象的年龄、性别、地区、职业暴露史、BMI、吸烟和饮酒状况等信息,采集被调查者外周血,通过胞质分裂阻滞法微核组学计算NDI,分析影响因素,并以NDI为因变量,年龄、性别等因素为自变量采用多重逐步线性回归法进行分析.结果 安徽省调查人群的NDI数据为正态分布,NDI为1.71±0.22,小值为1.10,大值为2.36.男性人群的NDI值(1.67±0.20)低于女性人群(1.76±0.24),差异有统计学意义(t=-3.65,P<0.001);吸烟人群的NDI(1.66±0.18)低于非吸烟人群(1.73±0.24),差异有统计学意义(t=3.06,P=0.002);饮酒人群的NDI(1.66±0.20)低于非吸烟人群(1.74±0.23),差异有统计学意义(t=3.15,P=0.002).采用多重逐步线性回归对相关因素进行分析后发现,性别是NDI的独立影响因素,且女性高于男性(β=0.098,s(x)=0.027,t=3.66,P<0.001).结论 调查地区的一般人群NDI的参考值范围,可以为同类研究提供参考,可用于评估有害因素对机体的细胞增殖能力的影响.
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砷暴露对人淋巴细胞双核微核及核分裂的影响
目的 观察亚砷酸钠(NaAsO2)对人淋巴细胞双核微核及核分裂的影响.方法 体外培养正常人外周血淋巴细胞,用不同浓度的亚砷酸钠进行染毒,砷终浓度分别为50、100、200、400μg/L,另设阴性对照组.采用胞质分裂阻滞微核(CBMN)试验,收获细胞和制片,光学显微镜下观察双核淋巴细胞中的微核及淋巴细胞核分裂情况.结果 染毒72 h后,砷终浓度为200、400μg/L组双核微核率、核分裂指数分别为(10.4±2.5)‰和(20.2±6.0)‰、(1.322±0.449)和(1.078±0.031),与阴性对照组[(3.6±1.5)‰、(1.500±0.016)]比较,差异有统计学意义(P<0.05).淋巴细胞双核微核率和核分裂指数与砷暴露浓度均呈剂量-反应关系.结论 在该研究剂量下,亚砷酸钠导致淋巴细胞双核微核率增加,核分裂指数降低.
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大肠癌p53蛋白表达与核分裂指数及浸润程度的关系
目的探讨p53蛋白表达在大肠癌进展中的意义.方法对42例大肠癌组织采用免疫组织化学方法及标准核分裂计数法分别测定p53蛋白表达情况及核分裂指数(MI).结果 42例大肠癌组织中p53蛋白阳性率为50.0%,p53蛋白表达与MI及大肠癌浸润深度呈明显正相关,而与组织学分级、淋巴结转移等无密切相关.结论 p53蛋白表达对大肠癌的进展具有重要影响,可与MI结合作为大肠癌的预后指标.
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Bcl-2基因转染人白血病细胞系(K562)的生物学特性的观察
目的:我们在慢性粒细胞白血病(CML)急变研究中发现CML急变细胞bcl-2基因表达明显高于慢性期,甚至高于其他急性粒细胞白血病(中华血液学杂志,1999,20:27);而CML急变时化疗反应甚差,是目前白血病治疗难题之一.为了进一步阐明Bcl-2基因在CML急变中的作用,我们将bcl-2基因转染人CML细胞系--K562,建立了一株bcl-2基因高表达的细胞株--K562/bcl-2,并对它的生物学特性,特别对抗肿瘤药物的反应进行了研究.方法:Bcl-2cDNA逆转录病毒载体质粒由中国医学科学院肿瘤研究所吴教授惠赠,按常规转染PA317细胞,经筛选、克隆获高病毒滴度细胞--D3.将成对数生长的K562细胞直接加在呈贴壁生长的D3细胞上进行转染,然后取出悬浮细胞在含G418培基中筛选出抗性细胞,即K562/bcl-2细胞.结果:1.BCL-2蛋白表达:K562/bcl-2细胞明显高于未转染的K562细胞,阳性率和阳性指数分别为71%和38%,95和41. 2.细胞形态学:K562/bcl-2细胞有明显聚集成丛现象,核分裂指数低于K562细胞,分别为0.8%和1.4%.3.细胞生长:细胞凋亡率和K562细胞的增殖速度接近,倍增时分别为22 h和22.7 h. 4.FACS检测:K562/bcl-2细胞凋亡率稍低于K562,分别为2.1%和4.8%,细胞周期两者无明显差别.5.核型:均为Ph阳性.6.细胞耐药性观察:通过Ara-C、高三杉脂碱(HHT)和柔红霉素(DNR)对比观察,发现K562/bcl-2细胞对Ara-C和HHT的耐受性明显高于K562细胞,对DNR的耐受性也有所增高.结论:Bcl-2基因转染使K562细胞发生聚集(提示细胞接触性抑制减低),对化疗药物耐受性增加,进一步证明Bcl-2基因高表达与CML急变治疗反应差和预后不良有关,而与细胞增殖周期无明显关系,这就为CML急变的治疗提供了线索.
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口腔鳞癌核DNA量及其核分裂指数变化与术前化疗的效果
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乌三颗粒抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠造血功能的影响
目的探讨乌三颗粒抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠造血功能的影响,以寻找一种安全有效的新型抗肿瘤药物.方法采用小鼠体内S180移植性肿瘤为模型,测定荷瘤小鼠抑瘤率,以判断其抗肿瘤作用;以荷瘤小鼠血象、骨髓细胞核分裂指数,体外造血干细胞集落形成为指标,观察该药对荷瘤小鼠造血功能的影响.结果①乌三颗粒体内抑瘤率达38%~50%;②乌三颗粒组红细胞(RBC)计数、血红蛋白(HGB)含量均高于模型肿瘤组(P<0.05);③乌三颗粒组白细胞(WBC)计数、骨髓细胞核分裂指数、造血干细胞集落形成数,均高于西药化疗组(P<0.05).结论乌三颗粒有一定的抗肿瘤作用,同时对荷瘤小鼠的造血功能有一定改善作用,且无降低白细胞的副作用,说明该药具有安全有效的优势.
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胞质分裂阻滞法分析细胞组学研究指标在公共卫生领域的应用现状
近年来利用胞质分裂阻滞法分析微核、核质桥、核芽、核分裂指数、细胞凋亡和细胞坏死等细胞组学指标,成为公共卫生领域探讨不同人群结构、环境、职业暴露等因素对基因组不稳定性、染色体断裂、丢失和细胞增殖能力的影响的常用方法.现将利用胞质分裂阻滞法分析多种细胞组学指标在公共卫生领域的应用现状做以综述.