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血清中游离型双酚A的固相萃取-同位素内标-高效液相色谱串联质谱测定法
目的 建立的测定孕妇血清中游离型双酚A的浓度同相萃取-同位素内标-高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法.方法 采用Oasis HLB固相萃取柱进行同相萃取,液相色谱的分离采用C18色谱柱,使用乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱.质谱运用负离子喷雾模式电离,多反应离子监测方式检测.结果 该方法检测双酚A的线性范围为0.2～50 ng/ml,r=0.999 9,低检测限为0.15 ng/ml,定量限为0.4 ng/ml.0.5、2、10、50 ng/ml 4个浓度的加标回收率分别为114.8％,108.1％,100.8％,97.2％;日内RSD分别为15.9％,9.3％,4.6％,3.5％;日间RSD分别为10.5％,15.1％,5.3％,5.1％.结论 该方法测定孕妇血清中游离型双酚A具有较高的灵敏度、特异度和精确性,适用于血清样本中痕量双酚A的检测.
关键词： 双酚A 血清 固相萃取 高效液相色谱-串联质谱 -
化妆品中双酚A的超高效液相色谱测定法
目的 建立化妆品中双酚A的超高效液相色谱测定法.方法 样品经甲醇提取后,用超高效液相色谱带PDA检测器进行检测,色谱柱为Waters ACQUITY(@) BEH苯基柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm).定量检测波长为275 nm.结果 双酚A线性范围为2～100 μg/ml,回归方程为y=2 390x-846,r=0.999 6,检出限为5 μg/g.低浓度加标平均回收率为97.6％～ 101.4％,高浓度加标平均回收率为92.4％～100.1％;相对标准偏差(RSD)小于5％.结论 该方法操作简单、快速,适用于化妆品中双酚A的日常检测.
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双酚A的健康影响以及各国对其在塑料制品中的限量要求
双酚A被广泛应用于塑料制品中,近年来的研究成果表明低剂量下双酚A对动物和人体会产生多方面的影响,包括生殖系统、神经系统、胚胎发育、免疫系统等,并与肥胖、糖尿病、癌症等的发病相关.2008年以来已有多个国家出台了限制使用双酚A的政策.该文就双酚A对机体健康的影响加以重点介绍,并概述了各国对塑料制品中双酚A的限量要求及禁用政策.
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双酚A对雄性生殖功能影响的研究进展
近年来,有关环境类雌激素样物质双酚A(BPA)对生殖功能影响的研究成为了热点.该文综述了BPA对雄性生殖器官形态、生殖内分泌功能和男性生殖功能的影响及其毒性作用机制的新进展和观点,并结合众多的研究现状提出了BPA雄性生殖毒性研究未来的发展方向.
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低剂量双酚A暴露与代谢综合征相关性的研究进展
双酚A(BPA)是一种典型的环境内分泌干扰物,广泛应用于饮用水容器、食品包装材料以及多种日常生活用品的生产,对环境造成严重污染,对人类健康造成极大威胁.流行病学资料和动物实验表明,低剂量BPA暴露与代谢综合征存在一定的关联.因此确定低剂量BPA致代谢综合征的作用并明确其机制,对代谢综合征的防治具有十分重要的现实意义.该文综述了低剂量双酚A暴露与代谢综合征相关性的研究进展.
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双酚A雄性生殖毒性研究进展
目前,对环境雌激素双酚A(BPA)是否诱发雄性生殖毒性仍有争议.笔者就国内外关于BPA雄性生殖毒性的研究进行了综述.文献报道表明,BPA虽然胚胎毒性不明显,但对雄性动物具有生殖毒性,而且睾丸和前列腺为主要靶器官,即使低剂量暴露BPA亦可出现毒性效应.
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环境中双酚A的污染及降解去除的研究进展
近10年来随着科学与社会的发展,环境雌激素污染日益引起人们的关注.双酚A是环境雌激素的一种,用途广泛,但具有多方面的毒性.对其毒理、污染及降解去除的研究已经成为国际上的研究热点.该文拟对上述几方面的研究进展情况作一简要介绍.
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潍坊市水源水及自来水中双酚A污染状况调查
目的 了解潍坊市水源水和自来水中双酚A (BPA)的污染状况.方法 采用超声波辅助-分散液液微萃取-高效液相色谱法对潍坊市水源水和自来水中BPA进行检测.结果 枯水期时,潍坊市11处水源水中均检出BPA,检出浓度分别为0.271～0.943 μg/L;丰水期时,11处水源地中检出9处,检出率为81.8％,检出浓度为0.035～0.132μg/L,其浓度大小与其接纳工业废水和生活污水的多少有关,也受其生物降解的影响.自来水中也有检出BPA,枯水期和丰水期BPA的检出率分别为65.0％和25.0％,检出浓度分别为0.028～0.460μg/L和0.011～0.176μg/L,其浓度大小与水源污染和管网BPA的溶出有关.结论 潍坊市水源水和自来水中均检出BPA,应当在今后水质监测中引起足够的重视.
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双酚A对大鼠睾丸支持细胞N-钙黏蛋白和波形蛋白及卵泡刺激素受体表达的影响
目的 研究双酚A(BPA)对离体培养青春前期大鼠睾丸支持细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和卵泡刺激素受体(FSHR)表达的影响.方法 取3只健康18~21日龄SPF级SD雄性大鼠进行睾丸支持细胞原代培养,48 h后分别暴露于含终浓度为0(溶剂对照)、30、50、70μmol/L BPA的培养基中染毒24 h.采用MTT法检测支持细胞的细胞活性,分别采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)法和Western blotting法检测支持细胞N-cadherin、Vimentin及FSHR mRNA和蛋白的表达水平.结果 与溶剂对照组相比,50、70μmol/L BPA染毒组睾丸支持细胞的存活率均下降,差异有统计学意义(P<0.05);且随着BPA染毒剂量的升高,睾丸支持细胞的存活率呈逐渐下降的趋势.与溶剂对照组相比,各剂量BPA染毒组睾丸支持细胞FSHR mRNA的表达水平均较高,而Vimentin mRNA的表达水平均较低,仅30μmol/L BPA染毒组睾丸支持细胞N-cadherin mRNA的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与溶剂对照组比较,各剂量BPA染毒组睾丸支持细胞Vimentin蛋白及50、70μmol/L BPA染毒组睾丸支持细胞FSHR蛋白的表达水平均较低,仅50μmol/L BPA染毒组睾丸支持细胞N-cadherin蛋白的表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 BPA通过干扰支持细胞内N-cadherin、Vimentin和FSHR蛋白的表达来影响正常的精子发生,从而产生睾丸毒性.
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工作场所空气中双酚A的高效液相色谱测定法
目的 建立工作场所空气中双酚A(BPA)的高效液相色谱测定方法.方法 通过玻璃纤维滤纸采集空气中气溶胶态的双酚A,乙腈洗脱后,高效液相色谱-荧光检测器测定.结果 该方法在0.01～10.00μg/ml范围中呈线性关系,检出限为0.005 μg/ml,低检出浓度为3.3×10-5 mg/m3(以采集300 L空气样品计),平均加标回收率为97.5％～107.0％,相对标准偏差为2.5％～5.5％,洗脱效率为95.0％～101.9％,采样效率为99.6％,样品在室温下至少可保存7d.结论 方法各项指标均符合GBZ/T 210.4-2008《工作场所空气中化学物质测定方法》的要求,适用于工作场所空气中双酚A的检测.
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双酚A对男性职业接触工人生殖功能的影响
目的 对具有较高双酚A(BPA)外暴露剂量的职业接触人群调查分析,试图阐明男性工人内外暴露的特征以及对生殖功能健康的效应.方法 使用专门调查表对每个研究对象进行调查.同时进行体检和实验室检查,并按临床医学检验操作规程采集精液进行分析.结果 接触组与对照组在快速向前运动、慢速向前运动、精子密度、精子存活率这4项参数方面的差异无统计学意义(P＞0.05);而2组的正常形态精子率的差异具有统计学意义(P＜0.05).接触组尿蛋白阳性检出率为4.67%,对照组尿蛋白阳性检出率为1.27%.经检验,接触组尿蛋白阳性明显高于对照组(x2=6.130,P＜0.05).结论 BPA暴露可能影响精子形态,并可能对男性职工肾功能有影响.
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双酚A与儿童性早熟的研究进展
工业技术的发展导致双酚A广泛应用，使人们暴露的机会大大增加。由于其具有雌激素，会干扰机体的内分泌代谢。儿童易感性较高，可能影响更大。通过文献复习，从三方面概述双酚A暴露于儿童性早熟的关系。（1）双酚A的应用、理化性质及儿童暴露途径。（2）双酚A通过受体依赖性途径及非受体依赖性途径影响生殖发育系统的机制。（3）一些双酚A暴露的实验动物结果及流行病学调查结果。
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邻苯二甲酸二乙己酯及双酚A联合染毒对大鼠肝脏的影响
目的 研究邻苯二甲酸二乙基己酯(Di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)和双酚A(Bisphenol A,BPA)联合暴露对大鼠肝脏的影响.方法 将Wistar大鼠随机分4组,分别灌胃1 500mg/kg DEHP、200mg/kg BPA及750mg/kg DEHP+100mg/kg BPA染毒6周.染毒终点测定血清中碱性磷酸酶(ALP)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)及镁离子(Mg2+)含量;检测肝匀浆中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量.结果 与对照组比较,DEHP明显升高血清ALP、CHO及Mg2+含量,而BPA明显增加肝中MDA含量(均P＜0.05).与对照组比较,DEHP+BPA联合染毒除明显增加肝脏脏器系数外,对大鼠体重、肝MDA、血脂及血清Mg2+和ALP含量均无明显影响.与DEHP+ BPA联合染毒组比较,BPA显著升高肝脏MDA含量;DEHP增加血清Mg2+含量差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 DEHP和BPA单独染毒均可产生肝损伤,其联合暴露产生交互作用.
关键词： 邻苯二甲酸二乙基己酯 双酚A 联合暴露 肝脏 -
双酚A、4-壬基酚影响胚胎着床的作用机制探讨
目的 探讨双酚A、4-壬基酚影响胚胎着床的作用机制.方法 待测物质双酚A、4-壬基酚在不同浓度下干预细胞培养48h,以雌激素物质17β-雌二醇、乙烯雌酚作为阳性对照,RT-qPCR法检测各物质干预下细胞中孕激素受体(PR)mRNA表达的情况,且建立"S函数"量效曲线.WesternBlotting检测各组PR蛋白分泌的情况.结果 双酚A、4-壬基酚干预下PRmRNA呈现上调性表达,并能建立与17β-雌二醇、乙烯雌酚作用近似的"S函数"量效曲线.双酚A、4-壬基酚与17β-雌二醇、乙烯雌酚分别干预下PR蛋白分泌均增加.结论 双酚A、4-壬基酚可能通过影响PR的表达进而影响胚胎着床.
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双酚A抗孕激素样作用的体外观察
目的 观察双酚A在人类子宫内膜Ishikawa细胞中的抗孕激素样作用.方法 不同浓度孕酮、双酚A/米非司酮+孕酮混合分别干预细胞48h,RT-qPCR法检测各干预组细胞中PRmRNA表达的情况,且建立S函数量效曲线.Western Blotting检测各组PR蛋白分泌的情况.结果 孕酮单独干预下PRmRNA呈下调性表达,孕酮下调PRmRNA的表达受到双酚A、米非司酮浓度依赖性的拮抗,相同现象在蛋白水平上得到确认.结论 双酚A能产生与米非司酮近似的抗孕激素样作用.
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双酚A对SD大鼠睾酮含量及P450 scc和3β-HSD蛋白表达的影响
目的 研究双酚A对雄性大鼠睾丸间质细胞内睾酮含量及睾酮合成关键酶P450scc和3β-HSD表达的影响,探讨双酚A对睾酮的作用机制.方法 选择成年雄性SD大鼠48只,随机分为4组:对照组及染毒低剂量组(2 mg·kg-1·d-1)、中剂量组(20 mg·kg-1·d-1)、高剂量组(200 mg·kg-1·d-1).连续灌胃8周.测定不同剂量组大鼠的血清睾酮含量,免疫组化方法检测睾丸间质细胞上P450scc和3β-HSD蛋白的表达.结果 染毒中剂量组和高剂量组睾酮含量明显低于对照组(P<0.05),并有随染毒剂量增加而睾酮含量降低趋势;免疫组化图像分析结果显示:P450scc和3βΗSD在各染毒组平均吸光度值均数皆小于对照组,中剂量组和高剂量组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 双酚A可以抑制睾丸间质细胞合成睾酮,并抑制睾酮合成关键酶P450scc和3βHSD在睾丸间质细胞的表达.
关键词： 双酚A 睾酮 3β-羟基类固醇脱氢酶 P450胆固醇侧链裂解酶 -
双酚A对子宫肌瘤细胞体外增殖的研究
目的 探讨环境雌激素双酚A(BPA)对人离体子宫肌瘤细胞增殖的影响及相关机制.方法 进行人子宫肌瘤细胞原代、传代培养及鉴定.采用噻唑蓝(MTT)法测定用3种剂量的BPA(25×10-7,50×10-7、100×10-7 mol/L)分别干预24、48、72 h及溶剂对照组细胞的增殖情况:采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定雌激素受体(ER)mRNA,胰岛素样生长因子(IGF)-1mRNA,血管内皮细胞生长因子(VEGF)-1mRNA的表达.结果 100×10-7mol/L BPA作用于子宫肌瘤细胞24、48、72 h,及50×10-7mol/L BPA作用48、72 h可促进子宫肌瘤细胞增殖,并使ER mRNA、IGF mRNA、VEGF mRNA的表达呈上升趋势,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 BPA引起细胞增殖可能是通过ER使IGF、VEGF表达增加而引起的,且BPA的促增殖作用存在时间和剂量依赖关系.
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壬基酚和双酚A对小鼠生育力的联合作用
目的 研究双酚A(bisphenol A,BPA)、壬基酚(nonylphenol,NP)对小鼠生育力影响的联合作用类型,为正确评价BPA,NP在环境中共存时对机体产生的损害效应提供毒理学依据.方法 选择健康、性成熟、体重22～24 g清洁级昆明种小鼠400只,雌雄各半,随机分为BPA低、中、高剂量染毒组(48,120,240 mg/kg),NP低、中、高剂量染毒组(24,60,120 mg/kg)和(NP+BPA)低、中、高剂量混合染毒组(NP12mg/kg+BPA 24 mg/kg,NP 30 mg/kg+BPA 60 mg/kg,NP 60 mg/kg+BPA 120 mg/kg).按美国FDA推荐方法进行生育力研究,并应用金正均法对混合染毒BPA和NP对生育力影响的联合作用进行评价.结果 活精率、交配率、着床率在混合染毒的低、中剂量组中,其联合作用均为相加作用,在高剂量组为拮抗作用;妊娠率在低剂量组为相加作用,在中、高剂量组为拮抗作用,精子形态正常率在低、中、高各剂量组均为相加作用;生育力、活胎率、死胎率在低、中、高剂量组均为拮抗作用.结论 BPA和NP对小鼠生育力影响的联合作用类型,在低剂量组为相加作用,在中剂量组既有相加作用,又有拮抗作用,在高剂量组主要为拮抗作用.
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孕期暴露双酚A对子代雌性大鼠卵巢类固醇激素合成的影响
目的 研究孕期双酚A(BPA)暴露对子代雌性大鼠卵巢类固醇激素合成的影响.方法 选择SPF级3月龄的健康成年SD大鼠,按雌雄比为2∶1同笼配种.取妊娠大鼠20只,随机分成4组,于妊娠第5天～第20天,分别按0,10,50,250 mg/(kg·d)BPA进行灌胃染毒.母鼠正常分娩,观察雌性仔鼠生长发育变化至10周龄,确定发情间期后处死动物.ELISA法测定血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)及睾酮(T)水平;实时PCR测定卵巢中类固醇激素急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、细胞色素P450-17α羟化酶(P450-17α)、17β-羟类固醇脱氢酶(17β-HSD)、芳香化酶(P450arom) mRNA的基因表达.结果 出生28～36 d期间,50和250 mg/kg组体质量与对照组比较明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05);各剂量组与对照组相比,T水平明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05); 50和250mg/kg组与对照组相比,LH、FSH、E2水平明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05));各剂量组卵巢中17β-HSD mRNA的基因表达与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05); 50和250mg/kg组P450arom mRNA的基因表达与对照组比较明显降低(P＜0.05),差异有统计学意义.结论 孕期暴露BPA对子代雌性大鼠卵巢中类固醇激素合成酶的基因表达有一定的影响,可能影响类固醇激素合成,进而影响下丘脑—垂体—卵巢轴的正常调节.
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双酚A与壬基酚混合染毒对小鼠生精功能的影响
目的研究双酚A(BPA)与壬基酚(NP)混合染毒对小鼠生精功能的影响.方法选择健康性成熟的雄性昆明种小鼠60只,按随机区组分为阴性对照组、阳性对照组(环磷酰胺,CP)和低剂量组(82 mg/kg BPA+50 mg/kg NP)、中剂量组(163 mg/kg BPA+100 mg/kg NP)和高剂量组(325 mg/kg BPA+200 mg/kg NP), 连续灌胃染毒5 d,分别于首次染毒后第14天和第35天,每组随机处死5只小鼠,检测睾丸、附睾、精囊腺重量和脏器系数、精子数、精子活动度、活精率、精子畸形率和初级精母细胞染色体畸变率.结果精子数、直线运动精子数和活精率随染毒剂量增加而减少,静止不动精子数、精子畸形率和初级精母细胞染色体畸变率均随染毒剂量增加而升高.中、高剂量组的上述结果与阴性对照组比较,差异均有显著性(P＜0.05,P＜0.01), 均存在明确的剂量-反应关系,相关系数依次为:-0.987,-0.895,-0.981,0.981,0.958和0.962(均P＜0.05).结论 BPA、NP及其代谢产物能损伤小鼠的生精功能,由于BPA、NP在环境中往往共存,所以在评价BPA、NP生殖功能的损伤作用时,必须考虑两化学物间的相互作用.
关键词： 双酚A 壬基酚 小鼠 生精功能 初级精母细胞染色体畸变
