首页 > 文献资料
-
卵泡刺激素受体研究进展
卵泡刺激素(FSH)是哺乳动物重要的生殖激素,其生理作用是通过其受体(FSHR)介导的.FSHR属于G蛋白偶联受体超家族中的糖蛋白亚家族成员,它的细胞外域具有FSH特异性结合位点,细胞外域有3或4个潜在的糖基化位点,这些糖基对受体的折叠及转运激素至膜表面是必须的;其跨膜域参与蛋白激酶A(PKA)介导的信号转导,启动受体活化后的胞内事件;受体的脱敏可导致受体解偶联和受体数量下调.大多数哺乳动物FSHR cDNA开放阅读框由2 085个核苷酸构成,人和大鼠FSHR基因为单拷贝基因,它包含10个外显子和9个内含子,其5'侧翼区缺乏规则的TAT或CCAAT启动子元件,在3'末端非翻译区含有2个推断的多聚腺苷酸信号.FSHR存在活性突变和非活性突变,FSHR不足可导致原发性不育.
-
卵巢早衰小鼠中抗苗勒管激素与卵泡刺激素受体相关性的研究
目的 探讨卵巢早衰(POF)小鼠中抗苗勒管激素(AMH)与卵泡刺激素受体(FSHR)的关系. 方法 以小鼠透明带3(ZP3)的第330～342个氨基酸序列所合成的透明带多肽为免疫原,免疫SPF级Balb/c雌性小鼠,皮下多点注射建立POF模型.放射免疫法测定模型组及对照组小鼠外周血FSH、雌二醇(E2)的水平,酶联免疫法测定外周血AMH、抗透明带抗体(AzpAb)的水平,HE染色观察卵巢组织的变化,并用免疫组化方法分析卵巢颗粒细胞中FSHR的表达. 结果 POF小鼠较正常小鼠外周血的FSH升高,E2值降低,AMH值降低,AzpAb值升高.POF小鼠卵巢的HE染色病理切片见卵泡闭锁,正常发育的卵泡甚少.免疫组化分析,FSHR仅在颗粒细胞上表达,且POF小鼠卵巢上FSHR的表达明显少于正常组.结论 FSHR仅在颗粒细胞上表达,POF小鼠中各级卵泡的FSHR表达均降低,POF小鼠伴低浓度AMH,且FSHR的表达随AMH降低亦降低.
-
护卵汤对慢性应激超排卵小鼠卵巢TGF-β/Smads信号通路蛋白的影响
目的:观察护卵汤对慢性应激超排卵小鼠卵巢转化生长因子β(TGF-β) /Smads信号通路相关蛋白表达的影响.方法:建立慢性应激小鼠模型,将模型小鼠随机分为中药(护卵汤)组、西药(生长激素+阿司匹林)组和模型组,并设正常组.模型组和正常组给予0.9％氯化钠溶液,治疗组给予相应的药物.在超排卵后第3天处死小鼠10只;注射绒毛膜促性腺激素(HCG)24h后处死余下小鼠取卵巢.Western Blot检测卵巢TGF-β 1、P-Smad3及卵泡刺激素受体(FSHR)蛋白表达.结果:模型组卵巢TGF-β 1、P-Smad3及FSHR蛋白表达较正常组同期均显著降低(P＜0.05).与模型组同期比较,中药组和西药组卵巢TGF-β 1、P-Smad3及FSHR蛋白表达均明显升高(P＜0.05);且中药组与西药组同期比较升高更明显(P＜0.05).结论:护卵汤可促进慢性应激小鼠卵巢功能的恢复,其机制可能与调控TGF-β/Smads信号通路相关蛋白表达有关.
-
补肾调冲方对卵巢早衰大鼠卵泡发育的影响
目的 从卵泡发育调控的旁分泌途径研究补肾调冲方的作用机制.方法 将60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,补肾调冲方高、中、低剂量组及西药组,每组10只,采用雷公藤多苷灌胃(50mg/kg,14天)建立卵巢早衰模型,分别使用高(1ml/100g)、中(0.5m1/100g)、低(0.25ml/100g)剂量补肾调冲方及倍美力(0.075ml/100g)进行干预,时间为35天,观察各组大鼠各级卵泡及黄体计数和卵巢超微结构改变,检测卵巢卵泡刺激素受体(FSHR)、表皮生长因子(EGF)及缝隙连接蛋白43(Cx43)的mRNA表达.结果 模型组各级卵泡数、黄体数明显减少,卵巢超微结构受损,EGF,Cx43 mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01),补肾调冲方中、低剂量组及西药组大、中卵泡数及黄体数明显增加,卵巢超微结构明显改善,EGF及Cx43的mRNA表达显著增高(P<0.05或P<0.01).结论 补肾调冲方可改善雷公藤多苷所致的卵泡发育障碍,其作用机制可能是通过促进卵巢EGF,Cx43 mRNA表达这一旁分泌调控途径实现.
-
逍遥丸含药血清对人卵巢颗粒细胞内分泌功能的影响
目的 探讨逍遥丸对卵巢颗粒细胞内分泌功能影响可能的分子机制.方法 12只Wistar大鼠随机分为逍遥丸低、中、高剂量组(每日灌服逍遥丸混悬液1 ml/100g、2ml/100g、3ml/100g)和对照组(每日灌服生理盐水2ml/100g),连续4天,于末次灌胃后1h大鼠股动脉采血制备低、中、高剂量逍遥丸大鼠含药血清及正常大鼠血清.收集行体外受精-胚胎移植患者卵泡液,提取颗粒细胞原代细胞培养24h,以低、中、高剂量逍遥丸大鼠含药血清以及正常大鼠血清分别与体外培养的人卵巢颗粒细胞共同孵育48h,分为逍遥丸低、中、高剂量组以及对照组.采用放射免疫方法测定培养液中雌二醇(E2)、孕酮(P)、环磷酸腺苷(cAMP)的水平,采用蛋白印迹法和实时定量荧光PCR法分别检测促卵泡素受体(FSHR)蛋白和FSHR mRNA、P450芳香化酶mRNA、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)mRNA在卵巢颗粒细胞的表达.结果 与对照组比较,逍遥丸中、高剂量组培养液中E2、cAMP水平明显升高,逍遥丸低、中、高剂量组FSHR蛋白表达明显升高,逍遥丸高剂量组FSHR、P450芳香化酶mRNA表达明显升高,逍遥丸中剂量组PPAR γmRNA表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01).与逍遥丸低剂量组比较,逍遥丸高剂量组E2、cAMP、FSHR蛋白及mRNA水平明显升高(P＜0.01).结论 逍遥丸可能通过增加卵巢颗粒细胞FSHR蛋白及其mRNA的表达,使FSH更好发挥促进卵泡发育、排卵的作用,并通过调节FSHR、cAMP、P450芳香化酶、E2水平促进卵巢颗粒细胞的内分泌功能.
-
大鼠FasL+Sertoli细胞的分离与鉴定
为了将睾丸Sertoli细胞应用于细胞治疗,应用胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶消化制备睾丸Sertoli细胞,并对其做生活观察、透射电镜检查,了解其功能状态.SABC法标记Fas配体和卵泡刺激素受体的表达情况,对睾丸Sertoli细胞加以鉴定.培养的睾丸Sertoli细胞,形态完整,细胞器和细胞核保持良好,有丰富的线粒体、内质网、高尔基复合体和溶酶体,功能状态良好.且高度表达Fas配体和卵泡刺激素受体,出现优势生长现象.Fas配体阳性的睾丸Sertoli细胞可以作为联合移植的供体,发挥其免疫赦免作用.
-
雄激素受体和卵泡刺激素受体在成年大鼠睾丸中的期依赖性表达
目的确定雄激素受体(AR)和卵泡刺激素受体(FSHR)在大鼠睾丸中的细胞定位和表达变化. 方法利用地高辛标记的cRNA探针,在成年大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交;同时利用透光显微切割技术将成年大鼠曲细精管分为Ⅱ～Ⅵ、Ⅶ～Ⅷ、Ⅸ～Ⅻ、ⅩⅢ～Ⅰ4个阶段,提取总RNA,用α-32P标记的cDNA探针进行斑点杂交,观察A R和FSHR mRNA表达的细胞定位和期依赖性变化.利用图像分析系统,对阳性杂交信号单位面积平均辉度进行定量分析. 结果 AR mRNA阳性杂交信号位于支持细胞和间质细胞,于Ⅶ～Ⅷ期强 ,Ⅸ～Ⅰ期弱;FSHR mRNA阳性杂交信号位于支持细胞,于ⅩⅢ～Ⅰ期强, Ⅶ～Ⅷ期弱.各阶段之间具有非常显著性差异(P<0.01). 结论 AR和FSHR期依赖性表达的不同规律提示T(睾酮)和FSH(卵泡刺激素 )作用于精子发生的不同阶段,说明睾酮和卵泡刺激素协同作用调节成年大鼠的精子发生. 这一结论将为人类生育调控和不孕症的治疗提供新思路.
-
卵泡刺激素及其受体在大鼠胰腺的共定位观察
目的观察卵泡刺激素(FSH)及其受体(FSHR)在大鼠胰腺中的共存关系,以了解FSH对胰腺的功能意义.方法应用免疫荧光组织化学双标记染色技术,在激光共聚焦扫描显微镜下观察染色结果.结果部分外分泌腺细胞、导管上皮细胞及部分胰岛细胞呈FSH反应阳性,呈强绿色荧光.小血管内皮细胞也呈FSH反应弱阳性,呈弱的绿色荧光.部分胰岛细胞呈FSHR反应阳性,呈强红色荧光.一些外分泌腺上皮细胞呈FSHR反应弱阳性,呈淡红色荧光.有一些胰岛细胞呈FSH和FSHR双阳性反应,呈黄色荧光或红、绿相间荧光. 结论FSH及其受体均存在于大鼠胰腺中,胰岛中的部分细胞共同存在FSH及其受体,FSH可能通过旁分泌或自分泌的途径对胰腺的功能起调节作用.
-
卵泡刺激素受体在山羊颈胸神经节的分布
目的 探讨卵泡刺激素(FSH)是否影响心肺功能活动的自主神经调节.方法 取雄性和雌性成年山羊的颈胸神经节各5对,经免疫组织化学SP法染色后,观察FSH受体在山羊颈胸神经节的分布特点.结果 在颈胸神经节内,FSH受体免疫阳性产物主要存在于神经元的细胞质和细胞膜,为强阳性或中等阳性染色,而细胞核呈空泡状,不着色.此外,在神经节内的支持细胞、过路纤维、施万细胞以及血管内皮细胞中FSH受体呈弱阳性染色,有少量分布.图像分析表明,该神经节内神经元胞体的FSH受体相对表达量极显著高于其他非神经元胞体结构(P＜0.01).结论 颈胸神经节中神经元细胞是FSH作用的主要靶细胞,提示FSH可能通过影响该神经节的神经元活动,从而影响其发出的交感节后神经而调节心肺功能活动.
-
建立卵泡刺激素受体单位点基因突变体的卵巢癌SKOV3细胞和裸鼠模型
目的 建立转染卵泡刺激素受体(FSHR) 307和680位点突变的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系和裸鼠动物模型.方法 将人卵巢颗粒细胞(来自体外受精取卵时废弃的颗粒细胞),行原代培养后用于FSHR RNA提取;FSHR和FSHR307、680位点突变重组蛋白构建;将FSHR和FSHR307、680位点突变蛋白转染SKOV3细胞株;将处理后的3组SKOV3细胞接种到裸鼠皮下,8周后处死裸鼠,并取瘤组织验证.结果 建立了307和680位点突变的FSH受体高表达的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系和裸鼠动物模型.结论 成功地建立了307和680位点突变的FSH受体高表达的SKOV3上皮性卵巢癌细胞系和裸鼠移植瘤模型,为FSH在上皮性卵巢癌中的作用和治疗提供了一种新的细胞模型和动物模型.
-
大鼠下颌下腺卵泡刺激素及其受体的原位杂交及核心片段的序列分析
目的：探讨大鼠下颌下腺组织中是否表达卵泡刺激素（FSH）及其受体（FSHR），为进一步研究FSH对下颌下腺的功能调节提供理论依据。方法正常SD大鼠20只，体质量（200±20）g，腹腔麻醉后切取下颌下腺，采用原位杂交方法对FSH及FSHR进行细胞定位，探讨大鼠下颌下腺是否存在FSH及其受体mRNA，从下颌下腺组织中分别提取总RNA，运用RT-PCR获得FSH及其受体基因的cDNA核心序列，并对其序列进行分析。结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞含有 FSH和FSHR mRNA杂交信号，信号物质分布于胞质内，胞核呈阴性反应。从大鼠下颌下腺组织中扩增的FSH及FSHR基因的特异性条带分别为193bp和413bp。结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞能合成卵泡刺激素及其受体，进一步说明下颌下腺是FSH作用的靶器官。
-
体外受精-胚胎移植患者卵巢颗粒细胞卵泡刺激素受体启动子突变与卵巢反应不良的关系
目的 探讨卵巢颗粒细胞卵泡刺激素受体(FSHR)启动子突变与卵巢反应不良发生的分子机制.方法 对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中70例卵巢反应不良患者与88例卵巢正常反应患者FSHR 5'端起始位点的前263 bp DNA片段进行测序,研究卵巢颗粒细胞FSHR启动子突变与卵巢反应性的关系.结果 158例IVF患者中有63例发生-29位点G→A突变,发生率为40.0%;其中,卵巢反应不良组中该位点突变发生率[60.0%(42/70)]明显高于卵巢正常反应组[23.9%(21/88),χ2=21.450,P<0.01];而不同基因型组的基础卵泡刺激素值(bFSH)差异无统计学意义[G/G基因型组为(7.2±2.3)U/L,G/A和A/A基因型组为(7.1±2.0)U/L,t=0.457,P0.05];G/G基因型组的窦状卵泡数目[(14.2±1.3)个]明显高于G/A和A/A基因型组[(4.5±0.8)个,t=35.81,P<0.05];G/G基因型组采卵数[(14.0±1.2)个]明显高于G/A＆A/A基因型组[(4.5±1.1)个,t=40.35,P<0.05];G/G基因型组雌二醇峰值[(2 865±557)pmol/L]明显高于G/A＆A/A基因型[(880±211)pmol/L,t=25.80,P<0.05];G/G基因型组成熟卵子数[(13.6±1.2)个]明显高于G/A&A/A基因型组[(4.3±0.9)个,t=40.22,P<0.05].结论 FSHR启动子-29位点对PSHR启动子活性有显著影响,G→A突变可减弱启动子活性,使卵巢颗粒细胞对PSH反应不良.
-
卵巢颗粒细胞中卵泡刺激素受体基因突变与其启动子活性的关系
卵巢颗粒细胞中卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)基因突变是否影响其启动子活性,不同的学者报道尚不统一~([1-2]).报告基因法常用来研究某段DNA序列是否具有转录启动功能及其转录活性,该方法已被众多实验证实是有效的.
-
中医"肾应冬"的受体机制研究
目的通过观察睾丸卵泡刺激素(FSH)受体的季节性变化,揭示"肾应冬"的调控机制.方法采用放射性配基饱和法,测定雄性SD大鼠睾丸FSH受体的大结合量(Bmax)和解离常数(Kd值)的冬夏变化.结果连续2年冬夏正常组SD大鼠睾丸FSH受体Bmax均呈现明显的夏高冬低,2001年P＜0.05,2002年P＜0.01;冬夏正常组SD大鼠睾丸FSH受体Kd值也呈现明显的夏高冬低,2001年P＜0.05,2002年P＜0.01.在松果腺摘除的情况下,手术组与正常组相比,冬至组睾丸FSH受体的Bmax(P＜0.01)和Kd值(P＜0.01)均显著升高.冬夏睾丸FSH受体原本存在的明显季节差异消失.结论 "肾应冬"调控机制与松果腺对生殖激素受体的季节性高位调节密切相关.
-
精索静脉曲张对青春期大鼠性激素以及其睾丸受体的影响
目的:探讨精索静脉曲张(VC)对青春期大鼠睾丸组织中睾酮浓度(ITC)、血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及其睾丸雄激素受体(AR)、卵泡刺激素受体(FSHR)和黄体生成素(LHR)的影响.方法:通过部分结扎左肾静脉方法制作左侧精索静脉曲张模型(EV),雄性Wistar大鼠36只,随机分为6组.EV持续2、4、8周组和相应接受假手术的对照组,每组各6只.于造模成功后2、4、8周取实验组及对照组下腔静脉血及左侧睾丸.放射免疫法检测ITC及血清T、FSH、LH浓度,并用免疫组化方法检测其受体AR、FSHR、LHR在睾丸组织中的表达.用TUNEL法检测细胞凋亡并计算生精细胞的凋亡指数(AI).结果:VC后2周时,各激素平均灰度值未见明显变化,实验组LHR(138.77±741)明显上升(P<0.05);4周时实验组ITC(7.11±1.74)nmol/L较对照组(951±150)nmol/L及实验组2周组(9.01±0.98)nmol/L下降(P<0.05),8周时实验组血清T(0.38±0.11)nmol/L及ITC(4.46±1.24)nlnol/L较实验组2周组[T(1.01±0.26)nmol/L、ITC(9.01±0.98)nmol/L]、4周组[T(0.93±0.17)nmol/L,TTC(7.11±1.74)nmol/L]均有明显差异(P<0.05).实验组AI[(8.74±1.79)%、(19.08±231)%、(30.61±1.77)%]均明显高于对照组[(5.97±0.90)%、(535±195)%、(628±0.89%)],各EV组生精小管的超微结构损伤也随着精索静脉曲张持续时间的增加而逐渐严重.结论:VC可降低EV大鼠ITC、血清T浓度以及其受体AR的表达,使生精细胞AI增加并影响血清FSH、LH浓度及其睾丸受体的表达.
-
卵泡刺激素受体及酪氨酸羟化酶基因多态性与子痫前期的关系
目的 探讨卵泡刺激素受体基因(FSHR)rs1394205多态性和酪氨酸羟化酶基因(TH)rs2070762多态性与子痫前期(PE)发病的关系.方法 采用TaqMan探针法,对105例PE患者和103例正常妊娠妇女的FSHR rs1394205多态性和TH rs2070762多态性位点进行基因型分析.结果 PE组FSHR rs1394205的基因型频率CC、CT、TT分别为23.8%、50.5%、25.7%,等位基因频率C、T分别为49.0%,51.0%.对照组基因型频率CC、CT、TT分别为23.3%、52.4%、24.3%,等位基因频率C、T分别为49.5%,50.5%,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05);PE组TH基因rs2070762基因型频率CC、CT、TT分别为18.1%、56.2%、25.7%,等位基因频率C、T分别为46.2%,53.8%.对照组基因型频率CC、CT、TT分别为14.6%、42.7%、42.7%,等位基因频率C、T分别为35.9%、64.1%,两组比较PE组TT基因型频率和等位基因T频率明显低于对照组(P＜0.05).rs1394205和rs2070762均与PE疾病严重程度差异不明显.结论 TH基因rs2070762多态性(基因型,TT和等位基因T)可能是PE的保护性因素,FSHR基因rs1394205多态性与PE发病无关,2个SNP位点与PE的发病程度均无关.
-
卵泡刺激素受体基因与卵巢功能的研究进展
卵泡刺激素(FSH)在人类生殖过程中发挥着重要作用,其对卵巢的作用主要是通过与卵巢颗粒细胞膜表面的特异性受体即卵泡刺激素受体(FSHR)结合来发挥的.FSHR基因结构的正常与否直接影响着卵巢的生殖和内分泌功能,FSHR启动子激活后能启动FSHR基因转录,并进一步引起FSHR基因转录后水平的变化,从而引起卵巢功能的改变.FSHR基因点突变既可以导致卵巢功能活化(如反复自发性卵巢过度刺激综合征),又可以引起卵巢功能失活(如女性卵巢早衰).对FSHR基因的正常结构与卵巢功能的关系及FSHR基因点突变与卵巢功能改变的关系综述如下.
-
卵泡刺激素受体基因多态性的研究进展
卵泡刺激素是人类重要的生殖激素,通过其受体介导生理功能.目前在卵泡刺激素受体基因中发现大量单核苷酸多态性,特别是Asn 680Ser,可能影响受体活性,引起卵巢功能差异,并与辅助生殖技术中的卵巢刺激反应有一定联系.为即将进行卵巢刺激的患者测定基因多态性,以此定做个体化的卵巢刺激方案具有临床意义.其可以优化不孕症的治疗,减少医源性疾病的产生.但仍需要更多的临床实验检验其有效性.
-
卵泡刺激素受体基因突变的研究
卵泡刺激素(FSH)是调节性腺功能的关键激素,其生理功能是通过靶细胞膜上的卵泡刺激素受体(FSHR)介导的.近年来分子遗传学的研究发现FSHR基因突变是造成性腺功能异常的原因之一.目前已确定9处功能失活突变和4处功能活化突变.突变对性腺功能的影响在两性存在差异,女性正常的卵巢功能有赖于FSH的效能,而男性在FSH低下甚至缺乏时仍保持生殖功能.
-
p,p'-DDE和β-六氯化苯对青春期大鼠睾丸组织波形蛋白和N-钙粘蛋白及卵泡刺激素受体mRNA和蛋白表达的影响
目的 研究p,p’-DDE、β-六氯化苯(β-benzene hexachloride,β-BHC)联合染毒对青春期大鼠睾丸组织波形蛋白(Vimentin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)和卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)mRNA和蛋白表达的影响.方法 将20只50日龄清洁级雄性SD大鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和p,p’-DDE ( 100 mg/kg)单独染毒组、β-BHC( 100 mg/kg)单独染毒组、p,p’-DDE( 100 mg/kg)+β-BHC( 100 mg/kg)联合染毒组,每组5只.采用腹腔注射方式进行染毒,注射容积为10 ml/kg,隔天1次,连续进行10d.采用Real-time PCR检测大鼠睾丸组织Vimentin、N-cadherin、FSHR mRNA的表达;采用Western Blot法检测Vimentin、N-cadherin、FSHR蛋白的表达.结果 与对照组相比,β-BHC单独染毒组和p,p’-DDE+β-BHC联合染毒组大鼠睾丸组织Vimentin、FSHR mRNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P＜0.05).与p,p’-DDE+β-BHC联合染毒组相比,p,p’-DDE和β-BHC单独染毒组大鼠睾丸组织Vimentin mRNA的表达水平均较高,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,p,p’-DDE和β-BHC单独和联合染毒组大鼠睾丸组织Vimentin、N-cadherin、FSHR蛋白的表达水平均下降,差异有统计学意义(P＜0.05).而p,p’-DDE 和β-BHC单独和联合染毒组大鼠睾丸组织Vimentin、N-cadherin、FSHR mRNA和蛋白的表达水平间比较,差异均无统计学意义.结论 p,p’-DDE、β-BHC暴露可降低青春期大鼠睾丸组织中Vimentin、N-cadherin、FSHR的表达水平.
