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四溴双酚A对HepG2细胞线粒体膜电位及凋亡的影响
目的 研究不同浓度四溴双酚A(TBBPA)暴露对人肝癌(HepG2)细胞凋亡的影响.方法 以不同浓度TBBPA染毒HepG2细胞,采用MTS法检测细胞存活率,JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位变化,以AnnexinV与PI联合标记并使用流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 HepG2细胞存活率随着TBBPA暴露浓度升高相应降低;与对照组相比,20和30μmol/L TBBPA暴露组HepG2细胞线粒体膜电位显著下降(P ＜0.01);HepG2凋亡细胞随TBBPA暴露浓度升高有增加趋势,其中30 μmol/L TBBPA暴露组与对照组相比差异显著(P＜0.01).结论 TBBPA可能通过降低线粒体膜电位引起细胞凋亡.
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四溴双酚A对HepG2细胞的毒性作用及其剂量—反应关系评估
目的 研究不同剂量四溴双酚A对HepG2细胞的毒性并评估其剂量—反应关系.方法 以不同质量浓度的TBBPA染毒HepG2细胞,采用光学显微镜观察细胞形态,MTS法检测细胞存活率,LDH检测试剂盒检测细胞LDH漏出率,NOAEL和BMD法评估其剂量—反应关系.结果 TBBPA能引起HepG2细胞形态变化和存活率降低,24 h TBBPA处理的HepG2细胞形态随TBBPA质量浓度升高,逐渐萎缩变圆;HepG2细胞存活率与TBBPA处理呈质量浓度—效应关系和时间—效应关系,其12、24和48 h的IC50分别为33.82、27.36和17.73 μmol/L;TBBPA能导致HepG2细胞的细胞膜损伤,12、24和48 h TBBPA处理的HepG2细胞LDH漏出率与TBBPA有质量浓度—效应关系;选择TBBPA暴露24 h对HepG2细胞的抑制率为健康效应终点,其NOAEL、LOAEL、BMDL10和BMD10分别为10、15、9.45和10.34 μmol/L.结论 TBBPA对HepG2细胞具有明显的细胞毒性,其基准剂量值为9.45μmol/L.
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四溴双酚A对环青春期雄性大鼠的毒性研究
目的 初步探讨四溴双酚A对环青春期雄性大鼠的毒性影响.方法 基于环青春期雄性SD大鼠模型,将19 d龄雄性大鼠随机分为4组:对照、低、中和高剂量组,四溴双酚A掺入饲料给予,染毒剂量分别为0、2、6和18 mg/kg·bw,每组15只,连续暴露31d,实验期间观察并记录大鼠包皮分离时间,实验结束后测各项血液学、临床生化指标以及激素水平,进行脏器称重以及病理组织学检查.结果 受试物各剂量组大鼠体质量、包皮分离时间,以及激素水平与对照组比较,差异无统计学意义;高剂量组提肛肌-球海绵体肌系数、脾脏重量和脾脏系数,以及各剂量组甲状腺系数较对照组明显下降(P＜0.05);血常规检测结果显示低、高剂量组白细胞计数和淋巴细胞计数,高剂量组嗜碱性粒细胞比率、单核细胞计数和嗜碱性粒细胞计数,以及各剂量组未成熟网织红细胞指数较对照组明显下降(P＜0.05);血生化检测结果显示中、高剂量组间接胆红素较对照组明显升高(P＜0.05),各剂量组总胆汁酸较对照组明显下降(P＜0.05),上述差异均有统计学意义.肝、肾、脾、睾丸和甲状腺病理指标未显示有受试物引起的异常改变.结论 四溴双酚A对环青春期雄性大鼠肝脏、脾脏、造血系统和甲状腺有影响.
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溴阻燃剂对Jurkat淋巴细胞毒性作用
目的 研究十溴联苯醚(BDE-209)和四溴双酚A(TBBPA)对人淋巴Jurkat细胞增殖作用的影响.方法 采用CCK-8法检测不同剂量(10、20和40μmol/L)的BDE-209和TBBPA对Jurkat细胞存活率和细胞活性抑制率的影响.结果 BDE-209和TBBPA在0～ 40 μmol/L的剂量范围内均抑制Jurkat细胞的增殖作用；且BDE-209在剂量为10、20和40 μmol/L时差异均有统计学意义(P＜0.05),TBBPA在剂量为20和40μmol/L时差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 BDE-209和TBBPA均对人体的免疫细胞增殖产生不利的影响.
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四溴双酚A对环青春期雌性大鼠的毒性研究
目的 初步探讨四溴双酚A对环青春期雌性大鼠的内分泌干扰作用.方法 将19日龄雌性大鼠随机分为4组:对照组和低、中、高剂量组,每组15只,四溴双酚A掺入饲料给予,染毒剂量分别为0、2、6和18 mg/kg BW,连续暴露21 d,试验期间观察并记录大鼠阴道开口时间和动情周期,试验结束后测定各项血液学、临床生化指标以及激素水平,进行脏器称重以及组织病理学检查.结果 受试物各剂量组大鼠体质量、阴道开口时间和开口时体质量、动情周期,以及激素水平与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);各剂量组大鼠肝脏的脏体系数,以及高剂量组甲状腺的脏体系数和低、高剂量组甲状腺的脏脑系数与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);血常规检测结果显示中剂量组大鼠血小板计数和血小板压积与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);血生化检测结果显示中、高剂量组大鼠胆固醇和血糖含量,以及各剂量组高密度脂蛋白含量与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);卵巢、子宫、肾脏、肝脏和甲状腺病理指标未显示有受试物引起的异常改变.结论 四溴双酚A对环青春期雌性大鼠肝脏、甲状腺和血糖有影响.
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四溴双酚A和镉联合暴露对蚯蚓和斑马鱼毒性作用特征研究
目的 探讨四溴双酚A(TBBPA)、镉(Cd)联合暴露对不同生物体(赤子爱胜蚓、斑马鱼)的毒性作用特征.方法 将蚯蚓、斑马鱼置入设定的TBBPA、Cd单独、联合暴露剂量组,蚯蚓暴露于TBBPA浓度范围为0.1～10 mg/L,Cd为75～1 500mg/L,斑马鱼暴露于TBBPA浓度范围0.1～4.5 mg/L,Cd为4.64～30 mg/L,分别观察、计算暴露48、96 h蚯蚓、斑马鱼的死亡率、体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力,采用AI指数相加法、析因设计的方差分析法判断TBBPA、Cd对蚯蚓、斑马鱼的联合作用类型.结果 在本研究的实验剂量范围内,蚯蚓、斑马鱼的死亡率均随TBBPA、Cd单独、联合暴露浓度的升高而上升,而蚯蚓的SOD、CAT活力随染毒浓度的变化无规律,斑马鱼的SOD、CAT活力均随暴露浓度的升高而降低,存在着明显的剂量-效应关系;48、96 h时蚯蚓相加指数(AI)分别为0.15、0.13,斑马鱼AI分别为0.098、0.13.结论 TBBPA、Cd对蚯蚓死亡率表现为协同作用,SOD、CAT活力未有明显的作用趋势;对斑马鱼死亡率、SOD、CAT活力均呈现为协同作用.
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四溴双酚A对玉米种子发芽和根伸长及氧化损伤指标的影响
目的 探讨四溴双酚A(TBBPA)对玉米种子发芽、根伸长及氧化损伤指标的影响.方法 以实验室水培玉米作为生态毒理学模式生物,分别暴露于终浓度为0(对照)、0.002、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L TBBPA溶液,连续染毒7d.测定玉米种子发芽率、根长及其抑制率,并检测玉米叶中叶绿素、丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活力.结果 与对照组相比,各浓度TBBPA染毒组玉米种子的发芽率均降低,0.5、1.0 mg/LTBBPA染毒组玉米种子的根长也均降低,而抑制率升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着TBBPA染毒浓度的升高,玉米种子发芽率、根长均呈下降趋势,而抑制率呈上升趋势.与对照组相比,各浓度TBBPA染毒组玉米叶中叶绿素b和总叶绿素含量均下降,0.5、1.0 mg/L TBBPA染毒组玉米叶中叶绿素a含量也下降,而0.1～1.0 mg/LTBBPA染毒组玉米叶中MDA的含量增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着TBBPA染毒浓度的升高,玉米叶中MDA含量呈上升趋势.与对照组相比,0.05～1.0 mg/L TBBPA染毒组玉米叶及0.1～1.0 mg/L TBBPA染毒组玉米根中CAT的活力均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且均具有剂量-效应关系(P＜0.05).与对照组相比,仅1.0 mg/L TBBPA染毒组玉米叶和根中POD的活力均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且TBBPA浓度与玉米叶中POD的活力呈正相关(P＜0.05),而与根中POD的活力无明显相关性(P＞0.05).与对照组相比,0.1～1.0 mg/L TBBPA染毒组玉米叶及0.05～1.0 mg/L TBBPA染毒组玉米根中PPO的活力均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且TBBPA浓度与玉米叶中PPO的活力呈正相关(P＜0.05),而与根中PPO的活力无明显相关性(P＞0.05).结论 TBBPA可抑制玉米种子发芽和根生长,降低叶绿素合成,这与TBBPA胁迫下玉米抗氧化系统被激活有关.
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输配水材料浸泡水中3种双酚类化合物的固相萃取-液相色谱-质谱测定法
目的 建立输配水材料浸泡水中双酚F(bisphenol F,BPF)、双酚A(bisphenol A,BPA)和四溴双酚A(2,2',6,6'-tetrabromobisphenol A,TBBPA)三种双酚类化合物的测定方法.方法 将30件输配水材料样品在室温避光条件下超纯水浸泡(24±1)h后,取200 ml浸泡水于C18固相萃取柱进行净化浓缩,采用液相-色谱-质谱(LC-MS-MS)法测定双酚F、双酚A和四溴双酚A的浓度.结果 双酚F、双酚A和四溴双酚A分别在0.027～333、0.032～333、0.006～333μg/L的线性范围内,所得回归方程均呈较好的线性关系(r≥0.999),检出限分别为8、10、2 ng/L,定量下限分别为27、32、6 ng/L.该方法所得的平均回收率为77.4％～ 117.0％,RSD为3.9％～17.0％.结论 该方法灵敏度高,选择性强,适用于输配水材料浸泡水中双酚类化合物双酚F、双酚A和四溴双酚A的测定.
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输配水材料中双酚类化合物的液相色谱串联质谱测定法
目的 建立输配水材料中双酚F、双酚A和四溴双酚A 3种双酚类化合物的测定方法.方法 输配水材料经甲醇超声提取后,取上清液,利用液相色谱串联质谱(LC-MS-MS)法,在优化的仪器条件下对3种双酚类化合物进行测定.结果 3种双酚类化合物在15.0～500μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.996 0,该方法对四溴双酚A、双酚F、双酚A定昔检出限分别为3.5、18、62μg/kg,回收率在84.0%～119.3%之间,RSD<13%.在31个实际样品中,ABS(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯)塑料管中检出双酚F(1.67μg/g),7个样品中检出双酚A(0.114～120μg/g),所测样品中均未检出四溴双酚A.结论 该方法灵敏度高,选择性强,适用于输配水材料中双酚类化合物双酚F、双酚A和四溴双酚A的分析测定.
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不同暴露方式四溴双酚A的代谢及毒性特征
四溴双酚A(TBBPA)具有高效的阻燃效率和优越的热稳定性,被广泛用于各种电子电器产品、纺织品及建筑材料等,成为世界上使用量大的阻燃剂.该文在综述国内外相关研究的基础上,依据TBBPA的不同暴露方式总结了经口、经皮肤和经呼吸暴露TBBPA的生物体代谢特征和毒性特征.TBBPA主要是通过粪便排泄,其次为尿液;TBBPA对哺乳动物的急性毒性较小,达到g/kg体重级的剂量才能引起毒性效应;慢性毒性主要表现为内分泌干扰性、肝肾毒性、神经毒性和免疫毒性等.
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四溴双酚A对小鼠免疫功能的影响
目的:探讨四溴双酚A(TBBPA)对小鼠免疫功能的影响.方法:通过给小鼠灌胃服用TBBPA粉末(2.5 mg/d)21 d,期间测定脾脏重量和生长指数、体外抗体形成细胞和腹腔巨噬细胞吞噬功能等,检测TBBPA对小鼠外周免疫器官脾脏生长、抗体生成及吞噬细胞功能的影响.结果:服用TBBPA组小鼠脾脏的重量、生长指数低于对照组(P＜0.05);服用TBBPA组小鼠巨噬细胞吞噬百分率为(25.8±2.1)％,吞噬指数为0.4±0.3,均显著低于对照组(40.4±2.1)％、0.9±0.3(均P＜0.05);服用TBBPA组小鼠1×106个脾细胞所含PFC数为223.4±19.2,显著低于对照组405.8±14.5(P ＜0.01).结论:TBBPA可致小鼠抗体介导的特异性免疫和吞噬细胞参与的非特异性免疫功能下降.
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固相萃取－液相色谱／串联四级杆质谱法测定尿中双酚A类物质
目的：建立高效液相色谱／串联四级杆质谱法同时测定尿中4种双酚A类物质的方法。方法尿样用β－葡糖苷酸酶／硫酸酯酶水解后，经瓦里安Bond Elute Plexa固相萃取小柱浓缩净化，以乙腈－水为流动相进行梯度洗脱，采用液相色谱－质谱／质谱电喷雾负离子电离模式和多反应监测扫描模式，以双酚A－d16和四溴双酚A－d10为内标物进行定量分析。结果尿中双酚F、双酚A、四氯双酚A和四溴双酚A的线性范围均为0．50～100．00μg／L，线性相关系数分别为0．9986、0．9991、0．9996和0．9997，检出限分别为0．21、0．25、0．01和0．14μg／L，加标回收率为69．2％～99．9％；批内和批间相对标准偏差分别为5．5％～22．8％和2．4％～14．4％；样品在室温下至少可以保存7 d。对38份儿童尿样及20份医务工作者尿样进行检测，前者双酚F、双酚A、四氯双酚A和四溴双酚A检出率分别为94．7％、94．7％、0．0％和34．2％，后者分别为100．0％、100．0％、5．0％和75．0％。结论本方法简便，灵敏度高，选择性好，可作为检测尿中4种双酚A类物质的有效方法。
