首页 > 文献资料
-
中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经BDNF蛋白及BDNFmRNA表达的影响
目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白及BDNFmRNA表达的影响.方法:采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型,用不同剂量的糖痹康灌胃并与甲钴胺对照,16周后取大鼠一侧坐骨神经,用免疫组化法检测坐骨神经中BDNF蛋白的表达及采用RT-PCR方法检测坐骨神经组织中BDNF mRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组BDNF蛋白表达显著降低及BDNF mRNA表达显著降低;糖痹康组与模型组比较,能升高BDNF蛋白及BDNF mRNA表达.结论:中药复方糖痹康能够促进糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经BDNF mRNA的转录和蛋白的表达.
-
糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经 p38丝裂素活化蛋白激酶及血浆肿瘤坏死因子-α表达的影响
目的：观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经 p38丝裂素活化蛋白激酶（p38 MAPK）及血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响，探讨其神经保护及镇痛机制。方法 SD 雄性大鼠60只，随机选取10只为正常组，其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素诱发2型糖尿病大鼠模型。成模后随机分为模型组、甲钴胺组和糖痹康低、中、高剂量组，每组10只。各给药组给予相应药物干预。16周后取大鼠一侧坐骨神经，放免法检测大鼠血浆 TNF-α含量；Western blot 检测大鼠坐骨神经 p38、p-p38 MAPK 蛋白表达。结果与正常组比较，模型组大鼠坐骨神经 p38、p-p38蛋白表达及血浆 TNF-α含量升高（P＜0.05，P＜0.01）；与模型组比较，各给药组大鼠血浆 TNF-α含量和坐骨神经 p-p38蛋白表达显著降低（P＜0.05，P＜0.01），各给药组 p38蛋白表达降低，但只有糖痹康高剂量组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论糖痹康下调大鼠坐骨神经 p38、p-p38 MAPK 蛋白表达和血浆 TNF-α含量，可能是其糖尿病周围神经病变神经保护及镇痛作用靶点之一。
关键词： 糖痹康 糖尿病周围神经病变 p38 丝裂原活化蛋白激酶 肿瘤坏死因子-α 大鼠 -
糖痹康对高糖环境下大鼠雪旺细胞NF-κB表达的影响
目的 观察中药糖痹康对高糖环境下大鼠雪旺细胞NF-κB表达的影响.方法 采用原代培养的方法建立高糖环境下大鼠雪旺细胞的模型,用高、中、低三种剂量糖痹康含药血清进行干预,以弥可保作为对照,用Western blot检测不同药物干预后的大鼠雪旺细胞NF-κB p65蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测雪旺细胞中NF-κB mRNA的表达.结果 与正常对照组相比,模型组NF-κB p65蛋白相对表达量明显减弱,与模型组相比,各给药组NF-κB蛋白的表达均有所升高,并有统计学意义(P＜0.05);与正常组相比,模型组NF-κBmRNA相对表达量明显减弱,与模型组相比,各给药组NF-κB mRNA的表达均有所升高,并有统计学意义(P＜0.05).结论 糖尿病周围神经病变时NF-κB表达异常增加,中药糖痹康能够减少NF-κB活化,降低NF-κB转录水平,这可能是糖痹康对糖尿病周围神经病变(DPN)神经保护的有效作用靶点之一.
-
糖痹康治疗糖尿病周围神经病变的临床研究
[目的]采用自身前后对照方法，评价中药复方糖痹康治疗糖尿病周围神经病变（DPN）的临床有效性及安全性。[方法]在基础治疗（如血糖、血压、血脂等）的基础上，给予35例DPN患者口服糖痹康配方颗粒，治疗8周后，对患者的各项指标（如：中医证候、实验室检查及肌电图）进行客观评价。[结果]糖痹康治疗前后受试对象的双侧胫运动神经（MCV）、感觉神经（SCV）传导速度明显改善（P<0.05），且治疗前后安全性指标（血糖、糖化血红蛋白、血脂及血压）均在正常范围内，无显著性差异（P>0.05）同时未出现药物不良反应。[结论]中药复方糖痹康可显著改善DPN患者的临床症状、提高神经传导速度、显著降低国际公认糖尿病周围神经病变积分并且总有效率达到91.14%。
-
中药复方糖痹康对糖尿病大鼠神经保护机制的研究
目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠血浆内皮素(ET)和血清一氧化氮(NO)含量的影响,探讨其神经保护机制.方法:采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型,造模成功后随机分为模型组、甲钴胺组、糖痹康高、中、低剂量组,另设10只雄性SD大鼠为正常组,模型组和正常组给予蒸馏水,用不同剂量的糖痹康灌胃,并与甲钴胺对照,每4周检测体质量、空腹血糖,16周后取大鼠一侧坐骨神经,光镜观察各组大鼠坐骨神经病理变化及用放射免疫法检测糖痹康对糖尿病周围神经大鼠血浆ET及铜试纸显色法检测大鼠血浆大鼠血清NO的含量.结果:治疗16周后,糖尿病大鼠体质量、血糖明显改善.与模型组比较,甲钴胺组及中药各剂量组能明显改善糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经病理组织学损伤程度,与正常组比较,模型组大鼠血浆中ET的含量显著提高(P＜0.01),模型组大鼠血清中NO的含量显著降低(P＜0.01);与模型组比较,经药物干预后,各组大鼠血浆中ET的含量均降低(P＜0.01),糖痹康低剂量组大鼠血清中NO的含量升高(P＜0.05),甲钴胺组及糖痹康中、高剂量组大鼠血清中NO的含量均显著升高(P＜0.01),结论:糖痹康能降低糖尿病大鼠血糖对坐骨神经的形态具有保护作用及可上调糖尿病周围神经病变大鼠血浆ET的水平和下调糖尿病周围神经病变大鼠血清NO的水平.
-
糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经NF-κB-IκB信号通路的影响
目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经NF-κB及IκB表达的影响.方法:SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型.造模成功后随机分为模型组,甲钴胺组,糖痹康低、中、高剂量组,每组10只.各组采取相应干预.16周后取大鼠一侧坐骨神经,采用Western blot法检测大鼠大鼠坐骨神经NF-κB及IκB的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经组织IKB-a及NF-KB蛋白表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,糖痹康中剂量组IKB-a蛋白表达降低,但无统计学意义;弥可保、糖痹康低和高剂量组IKB-a及NF-KB蛋白表达显著降低(P＜0.01或P＜0.05),糖痹康中剂量组NF-KB蛋白表达显著降低(P＜0.01).结论:抑制NF-κB-IκB信号通路,可能是中药复方糖痹康防治DPN的作用机制之一.
-
糖痹康对高糖损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用
目的:观察糖痹康大鼠含药血清对高糖造成人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用.方法:以CCK -8法观察不同浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞活力的影响；根据实验[结果]选择葡萄糖浓度为5.55mmol/L组为正常组,葡萄糖浓度为25mmol/L组做为模型组.然后制备正常组,弥可保组,糖痹康组的大鼠含药血清,将含药血清作用于高糖损伤的人脐静脉内皮细胞,分为正常组、高糖模型组、高糖弥可保组、高糖糖痹康低、中、高剂量组,并通过测定培养液中丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(N0)含量与超氧化物歧化酶(SOD)活力,探讨糖痹康对血管内皮细胞损伤的保护作用.结果:与高糖模型组比较,糖痹康合药血清能减少细胞MDA、LDH释放量,提高SOD活力及NO含量.结论:糖痹康对高糖损伤的血管内皮细胞有一定的保护作用,间接的起到对周围神经的保护作用.
-
糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF和HIF-1α调控机制研究
目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF及HIF-1α表达的影响.方法:SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型.造模成功后随机分为模型组,甲钴胺组,糖痹康低、中、高剂量组,每组10只.各组采取相应干预.16周后取大鼠一侧坐骨神经,采用Western b1ot法检测大鼠大鼠坐骨神经VEGF和HIF-1α的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经组织HIF-1α及VEGF蛋白表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,糖痹康中剂量组HIF-1 α蛋白表达显著降低(P＜0.01),而与模型组比较,糖痹康低和高剂量组以及弥可保组虽有减低但无统计学意义;与模型组比较,弥可保组与糖痹康低、中、高剂量组均可显著降低大鼠坐骨神经中VEGF的蛋白表达.(P＜0.01).结论:糖痹康上调糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神VEGF及HIF-1α蛋白表达,可能是其DPN神经保护作用靶点之一.
-
中药复方糖痹康改善氧化应激的分子机制探讨
目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、铜锌超氧化物歧化酶(CuznSOD) mRNA表达的影响.方法:SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型.造模成功后随机分为模型组,弥可保组,糖痹康低、中、高剂量组,每组10只.各组采取相应干预.16周后取大鼠一侧坐骨神经,用铜试纸显色法检测大鼠血清的SOD含量及采用RT-PCR方法检测坐骨神经组织中MnSOD及CuznSODmRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠血清SOD的含量显著降低;与模型组相比,糖痹康剂量组大鼠血清中SOD的含量显著升高;与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经Cuzn-SODmRNA及Mn-SODmRNA表达显著降低;与模型组比较,弥可保,糖痹康低、中和高剂量组Mn-SODmRNA的表达显著升高,同时与模型组比较,糖痹康低、中和高剂量组Cuzn-SODmRNA的表达显著升高,糖痹康低,中和高剂量组Mn-SODmRNA的表达显著升高,弥可保组Mn-SODmR-NA的表达显著升高虽也升高,但无统计学意义.结论:临床有效中药糖痹康对糖尿病周围神经病变的神经保护作用有可能与通过提高血清SOD含量及Mn-SOD及Cuzn-SOD基因表达而起到抗氧化应激作用有关.
-
糖痹康对糖尿病模型大鼠坐骨神经胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体表达的影响
背景：中药复方糖痹康能够改善糖尿病大鼠神经传导速度，具有抗炎和抗氧化作用。胰岛素样生长因子Ⅰ是治疗糖尿病周围神经病变的一个关键靶点。目的：观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体表达的影响。方法：采用高脂加腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型大鼠，建模后分别灌胃糖痹康4.18，8.35，16.7 mg/(kg·d)，并设置阳性对照弥可保组、模型组和正常对照组，灌胃16周。结果与结论：与模型组相比，弥可保组血糖水平差异无显著性意义，糖痹康高剂量组血糖显著降低(P <0.01)。免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测显示，弥可保组、糖痹康高剂量组大鼠体质量、坐骨神经运动神经传导速度、坐骨神经组织胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体蛋白和mRNA的表达均增高(P <0.05或P <0.01)。结果说明，糖痹康通过促进胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体表达而起到防治糖尿病周围神经病变的作用。
-
糖痹康对高糖环境下大鼠坐骨神经雪旺细胞增殖影响
目的:观察中药复方糖痹康对高糖环境下大鼠坐骨神经雪旺细胞增殖的影响.方法:通过雪旺细胞株,建立高糖环境下大鼠雪旺细胞的细胞模型;用不同剂量的含药血清和正常血清培养基刺激24、48、72和96 h后,MTT法检测高糖环境下不同剂量的糖痹康含药血清对大鼠细胞增殖的影响.结果:与空白组比较,24、48、72、96 h后,50 mM GLU与75 mM GLU组细胞增殖程度均显著降低,但50 mM GLU与75 mM GLU组间并无差异;与50 mM高糖对照组比较,24、48 h后,弥可保及糖痹康1∶1、1∶2、1∶8组均可显著增高细胞增殖能力.结论:糖痹康组可明显改善高糖培养环境下雪旺细胞增殖活性,糖痹康低剂量组优于西药(弥可保)组,其在高糖培养的环境下,中医复方糖痹康可促进大鼠坐骨神经雪旺细胞的增殖,可能是其防治DPN的机制之一.
-
HPLC同时测定糖痹康颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量
目的 建立同时测定糖痹康颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量的方法.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱:Thermo syncronis C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B);梯度洗脱:0~35min,20%(B)~55%(B);35~40 min,100%(B);流速:1 mL/min;柱温为40℃;检测波长为275 nm;进样量为20μL.结果 黄芩苷检测浓度在5~500μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好线性关系Y=6×107X+62726(r=0.9996,n=7);平均回收率为100.06%,RSD=1.08%(n=9);汉黄芩苷检测浓度在1~85μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好线性关系Y=90214X-51875(r=0.9997,n=7);平均回收率为100.11%,RSD=0.41%(n=9);黄芩素检测浓度在0.4~25μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好线性关系Y=158201X-10020(r=0.9997,n=7);平均回收率100.00%,RSD=0.73%(n=9);汉黄芩素检测浓度在0.1~10μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好线性关系Y=69606X-29918(r=0.9991,n=7);平均回收率为100.07%,RSD=1.17%(n=9);结论 该方法操作简单,结果可靠,可为糖痹康颗粒的质量控制提供参考.
-
糖痹康对糖尿病大鼠背根神经节组织氧化应激、细胞凋亡的影响及机制
目的 观察糖痹康对糖尿病大鼠背根节神经组织氧化应激、细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 选取SD雄性大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、糖痹康低剂量组、糖痹康中剂量组、糖痹康高剂量组及弥可保组各10只.模型组、糖痹康低剂量组、糖痹康中剂量组、糖痹康高剂量组及弥可保组采用腹腔注射链脲佐菌素法制备糖尿病模型,正常对照组腹腔注射等量注射枸橼酸盐缓冲液.8周后,将各组大鼠麻醉,取出背根神经节,检测背根神经节组织活性氧簇(ROS)水平,采用TUNEL法测算神经节组织细胞凋亡率,采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase3)以及p38丝裂原活性蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路相关蛋白p38、p-p38的表达.结果 ①模型组ROS水平高于正常对照组,糖痹康低、中、高剂量组及弥可保组ROS水平均低于模型组(P均<0.05).②模型组细胞凋亡率高于正常对照组,糖痹康低、中、高剂量组及弥可保组细胞凋亡率均低于模型组(P均<0.05).③模型组Bcl-2蛋白表达低于正常对照组,Cleaved Caspase3蛋白表达高于正常对照组(P均<0.05);与模型组比较,糖痹康低、中、高剂量组及弥可保组Bcl-2蛋白表达均升高,Cleaved Caspase3蛋白表达均降低(P均<0.05).④模型组p38、p-p38蛋白表达均高于正常对照组,糖痹康低、中、高剂量组及弥可保组p38、p-p38蛋白表达均低于模型组(P均<0.05).结论糖痹康可降低糖尿病大鼠背根神经节组织ROS水平、抑制细胞凋亡,其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路有关.
-
中药糖痹康对高糖环境下大鼠雪旺细胞NGF表达的影响
目的:探讨中药糖痹康对高糖环境下大鼠雪旺细胞NGF表达的影响.方法:运用原代培养的方法,在高糖环境下建立大鼠SCs模型,以弥可保药物组作为对照,并使用Western blot检测糖痹康含药血清对高糖环境下大鼠坐骨神经雪旺细胞NGF蛋白的表达,Real-time PCR检测SCs中NGF mRNA的表达,ELISA检测各组雪旺细胞上清NGF的表达.结果:大鼠雪旺细胞在高糖的环境下培养,其增殖的能力受到显著抑制,同时雪旺细胞NGF的合成显著减少,与糖痹康含药血清培养后的细胞对比,经糖痹康组培养的雪旺细胞,其细胞NGF的表达、合成水平和增殖能力均显著提高.结论:中药糖痹康对高糖条件下大鼠雪旺细胞的增殖能力、NGF mRNA表达和NGF合成的抑制性变化具有显著改善作用.
-
糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠氧化应激的影响
目的:观察中药糖痹康对DPN大鼠血清SOD、NO和NGF的影响,从而探讨其对DPN大鼠的抗氧化效果.方法:健康SD大鼠80只随机选取10只为正常对照组,普通饲料喂养,其余高脂饲料喂养,8周后STZ造模:用0.1 mmol· L-1无菌枸橼酸钠缓冲液(PH 4.5,4℃),将STZ配成0.45％的溶液,按45 mg·kg-1的剂量标准一次性给大鼠左下腹腔内注射.72 h后用血糖仪测尾尖血血糖,选持续血糖水平≥16.7 mmol·L-1以上且血糖稳定3d者为造模成功,按体质量随机进入各治疗组,模型复制成功后,按体质量随机分为以下5组,每组10只:模型组、弥可保组(西药组)、糖痹康低剂量组、糖痹康中剂量组、糖痹康高剂量组,加上正常组,共6组.糖痹康低剂量组:按成人剂量5倍给药,即生药4.175 mg·(kg·d)-1;糖痹康中剂量组:按成人剂量10倍给药,即生药8.35 mg·(kg·d)-1;糖痹康高剂量组:按成人剂量20倍给药,即生药16.7 mg·(kg·d)-1,均换算成糖痹康为3 mL灌胃;弥可保组:按成人剂量10倍给药,即1.97 mg·(kg·d)-1,用蒸馏水配成混悬液3 mL灌胃;模型组及正常组给予等量蒸馏水灌胃.采用ELISA法测定实验大鼠血清SOD、NO、NGF酶活性,按SOD、NO、NGF ELISA试剂盒说明操作.结果:与模型组相比较,糖痹康各剂量组有显著升高,高剂量组效果优于对照组;糖痹康各剂量组可以明显提高血清NGF水平.结论:中药糖痹康可以升高血清SOD、NO和NGF水平,抑制体内过高的氧化应激水平,阻止和/或廷缓了DPN的发生和发展.
-
糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经传导速度的影响
目的 观察中药复方糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经传导速度的影响.方法 SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型.造模成功后随机分为模型组,甲钴胺组,糖痹康低、中、高剂量组,每组10只.各组采取相应干预.每4周检测大鼠坐骨神经传导速度;16周后放射免疫法检测大鼠血清FINS水平.结果 与正常组比较,模型组坐骨神经传导速率均显著降低,FINS含量均显著降低;与模型组比较,坐骨神经传导速率均显著升高,FINS的含量均显著升高.结论 中药复方糖痹康能改善糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经传导速度且存在剂量与用药时间依赖关系;上调DPN大鼠FINS的表达这些可能是其防治DPN的机制之一.
-
中药复方糖痹康对2型糖尿病大鼠周围神经病变的疗效观察
目的 本研究旨在探讨糖痹康对高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病周围神经病变(Diabetic Penipheraineuropathy,DPN)大鼠脂代谢和神经结构的影响.方法 将糖尿病大鼠模型分为正常组、模型组、弥可保组、糖痹康低、中、高剂量组.干预治疗15周后,测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酷(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、游离脂肪酸(NEFA);并用电镜观察坐骨神经的超微结构.结果 模型组大鼠血清中HDL-C含量较正常组明显降低(P＜0.05),LDL-C、TG、NEFA明显升高(P＜0.05);弥可保与糖痹康低、中、高剂量组大鼠血清中HDL-C含量较模型组明显升高,TC、LDL-C、NEFA含量明显降低(P＜0.05).电镜检测结果显示:弥可保和糖痹康组大鼠坐骨神经形态、髓鞘及轴索等均有不同程度的修复,糖痹康疗效比弥可保明显,且与剂量成正相关.结论 糖痹康能改善DPN大鼠脂代谢水平,修复其坐骨神经髓鞘,对DPN有较好的神经保护作用.
