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  • 中药治疗糖皮质激素性骨质疏松症的药理研究进展

    作者:杨燕;刘仁慧;王秀娟

    糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)具备免疫抑制及抗炎效果,被广泛应用于抗移植免疫排斥、自身免疫疾病、感染及肿瘤等治疗.但长期或大剂量使用GC,50%以上的患者会发生骨量流失,是引发继发性骨质疏松症(Osteoporosis,OP)即医源性OP主要的原因[1].中医学认为激素是外源性“纯阳”“邪热”之品[2],长期大量作用于人体后导致肾失封藏,肾之阴阳失衡,肾精耗损,肾精亏虚无以充实骨骼,骨失濡养而致OP,属中医“肾虚骨痿”“骨痹”范畴.糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)的中医病机为肾失封藏,肾精亏虚,骨空失养,治宜补肾填精壮骨;又因瘀血、脾虚、肝郁等亦与GIOP的发生相关,故治疗应以益肾为主,补肝健脾、活血化瘀为辅[3].

  • 补肾益髓中药复方对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织Osterix mRNA及蛋白表达的影响

    作者:王剑;郑洪新;刘研;张锦萍;刘瑞辉

    目的 观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠肾组织Osterix mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药复方的疗效机理.方法 肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾益髓中药复方组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组.造模及灌胃给药9周.应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,实时定量RT-PCR及Western Blot检测肾组织Osterix mRNA及蛋白表达.结果 与正常组比较,模型空白组股骨骨密度明显降低(P<0.01)、肾组织Osterix mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组股骨骨密度明显升高(P<0.01)、肾组织Osterix mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01).结论 肾组织Osterix mRNA及蛋白表达升高可能是GIOP的发病机制之一;补肾益髓中药复方可能通过下调肾组织Osterix mRNA及蛋白表达,有效防治GIOP.

  • 补肾中药对糖皮质激素性骨质疏松模型大鼠的干预作用

    作者:朱辉;郑洪新;林庶如;杨芳;王剑;张国哲

    目的 采用地塞米松肌注法建立糖皮质激素性骨质疏松( glucocorticoid-induced osteoporosis,GIO)大鼠模型,观察补肾中药的防治作用.方法 Wistar大鼠60只,雌雄各半,按体重分层随机法分为正常组、模型组、补肾组.均采用肌注地塞米松的方法造模,2.5 mg/kg·次-1,2次/周,连续9周.测定离体股骨骨密度(BMD)及血清骨代谢指标.结果 模型组模型大鼠BMD明显降低(0.109±0.007) g/cm2,血清骨吸收标记物TRAP含量明显升高(9.96±1.15)μg/ml;补肾组模型大鼠BMD(0.116±0.007) g/cm2,血清TRAP含量降低(5.76±0.85) μg/ml.结论 补肾中药对糖皮质激素诱导的GIO大鼠模型有一定拮抗作用.

  • 培哚普利对兔糖皮质激素性骨质疏松症干预作用的实验研究

    作者:周峰;荣春;王恺;王春生;张永涛

    目的:通过兔糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)模型,探讨培哚普利对GIOP的干预作用以及其具体机制。方法:10月龄雄性新西兰大白兔(3.0~3.5 kg)45只,采用随机数字表的方法将其随机分成3组:正常对照组(肌肉注射生理盐水,n=15,NC组)、模型组(肌肉注射地塞米松,n=15,GIOP组)和治疗组(肌肉注射地塞米松+口服培垛普利,n=15,GIOP+ACEI组);所有动物于干预后12周处死取材。通过检测骨组织形态计量学、生物力学以及骨代谢相关的血清学指标和mRNA表达来分析各组骨质和骨量的变化。结果:12周时骨形态计量学及生物力学结果显示GIOP组的骨量以及骨强度明显低于NC组(P<0.05);在给予培哚普利干预后,GIOP+ACEI组的骨量及骨强度较GIOP组明显增高(P<0.05)。与NC组比较,GIOP组矿化表面积、矿化沉积率、血清骨钙素均明显下降而破骨细胞数量、破骨细胞表面积、侵蚀表面积以及尿脱氧吡啶啉均明显增高(P<0.05),而给予培哚普利干预后这些指标的变化明显改善(P<0.05)。实时定量PCR结果显示给予地塞米松干预后SOST的mRNA表达以及RANKL/OPG的mRNA水平的比值均较NC组明显增高(P<0.05),而Runx2的mRNA水平明显下降(P<0.05);当给予培哚普利干预后,这些mRNA表达的变化被明显改善(P<0.05)。结论:培哚普利可以促进骨形成和抑制骨吸收,从而有效的干预糖皮质激素性骨质疏松症的发生,这为糖皮质激素性骨质疏松症的预防和治疗提供了新的思路。

  • 鹿茸健骨滴丸对骨质疏松症大鼠肾组织TRPV5表达的影响

    作者:李可强;郑洪新;朱辉;王剑;杨芳;张国哲

    目的:通过观察鹿茸健骨滴丸对糖皮质激素性骨质疏松症(GIO)大鼠股骨骨密度(BMD)及肾组织钙转运通路蛋白(TRPV5) mRNA和蛋白表达的影响,探讨GIO的病理机制及鹿茸健骨滴丸的疗效.方法:将82只Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、鹿茸健骨滴丸组(C组)及骨疏康组(D组).采用后肢肌注地塞米松(2.5 mg·kg-1,每周2次)造模,造模同时,C,D组分别按0.88,2.1 g·kg-1·d-1剂量ig给药,造模及给药9周后,应用XR-26型双能X射线骨密度仪测定BMD,采用实时定量PCR法及Western blot法测定肾组织TRPV5 mRNA和蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠BMD明显降低(P<0.01),肾组织TRPV5 mRNA与蛋白表达均明显下降(P<0.01);与模型组比较,鹿茸健骨滴丸组BMD明显升高(P<0.01),TRPV5 mRNA与蛋白表达亦明显上调(P<0.01).结论:地塞米松对肾钙转运过程产生抑制作用,是其诱发GIO的重要病理机制之一,鹿茸健骨滴丸通过上调肾组织TRPV5 mRNA与蛋白表达而促进肾钙重吸收,达到治疗GIO的作用.

  • 补肾、健脾、活血中药对地塞米松诱导骨质疏松大鼠骨组织TRPV5表达的影响

    作者:朱辉;郑洪新;杨芳;王剑;张国哲

    目的:观察地塞米松诱导的骨质疏松大鼠骨组织新型上皮钙通道( TRPV5)基因和蛋白表达的变化,探讨糖皮质激素性骨质疏松症( GIO)的发病机制,并比较补肾、健脾、活血中药的疗效及其调控作用.方法:Wistar大鼠132只,雌雄各半,随机分为正常组、模型组、补肾组(1.139 g·kg-1)、健脾组(0.945 g·kg-1)、活血组(0.504 g·kg-1)和骨疏康组(2.1 g·kg-1).地塞米松im造模(2.5 mg·kg-1),每周2次,造模及给药连续9周.测定离体股骨骨密度(BMD),生化法测定血清骨代谢指标,实时定量PCR与Western -blot法测定骨组织TRPV5 mRNA和蛋白表达.结果:模空组大鼠BMD明显降低(P<0.01),血清骨吸收标记物TRAP含量明显升高(P<0.01),骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达均上升(P<0.01);补肾中药能明显增加模型大鼠股骨BMD(P <0.01),降低大鼠血清TRAP含量(P<0.01),下调骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达水平(P<0.01或P<0.05).结论:补肾中药通过下调骨组织TRPV5 mRNA与蛋白表达而抑制破骨细胞骨吸收,从而起到抗骨质疏松的作用,其疗效优于健脾与活血中药.

  • 基于肾阴阳理论探讨自噬在激素性骨质疏松症中的作用

    作者:尚奇;任辉;沈耿杨;张志达;余翔;黄锦菁;招文华;梁德;江晓兵

    自噬作为应对细胞内和细胞外刺激的一种自我保护性过程,在调节骨稳态过程中具有重要作用.细胞自噬以其特异的清除和代谢方式与中医阴阳理论的对立制约、互根互用有着相似的内涵.糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)属于中医“骨痿”的范畴,骨痿的发生与肾密切相关.文章尝试从中医肾阴阳理论探讨细胞自噬在GIOP中的作用.肾藏精主骨生髓,肾精化生肾气,肾气包含肾阴肾阳,肾阴肾阳的失调与GIOP的发生有着密切的关系.

  • 补肾中药复方对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨和肾组织Dlx5mRNA及蛋白表达的影响

    作者:王剑;郑洪新;刘瑞辉;张锦萍

    目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠骨、肾组织同源异形盒基因5(Dlx5 mRNA)及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制、补肾中药复方的疗效机制及其与健脾、活血中药复方及骨疏康颗粒的比较.方法:肌肉注射地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型组、补肾组、健脾组、活血组、阳性对照组.造模及灌胃给药9周.测定股骨骨密度,RT-PCR及Western Blot检测骨、肾组织Dlx5 mRNA及蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组股骨骨密度明显降低(P<0.01)、骨组织Dlx5 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.01)、肾组织Dlx5 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,补肾组及阳性对照组股骨骨密度明显升高(P<0.01)、骨组织Dlx5 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.01)、肾组织Dlx5 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01).结论:骨组织Dlx5 mRNA及蛋白表达降低、肾组织Dlx5 mRNA及蛋白表达升高可能是GIOP的发病机制之一;补肾中药复方可能通过上调骨组织Dlx5 mRNA及蛋白表达、下调肾组织Dlx5 mRNA及蛋白表达,有效防治GIOP.

  • 补肾、健脾、活血中药对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织Osterix mRNA及蛋白表达的影响

    作者:王剑;郑洪新;宗志宏;李可强;杨芳;朱辉;张国哲

    目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)大鼠模型骨组织成骨细胞特异基因(osterix,Osx)mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制,并比较补肾、健脾、活血中药的疗效及其调控作用.方法:采用后肢肌注地塞米松(2.5mgag,每周2次,连续9周)的方法复制GIOP大鼠模型,按体质量分层随机分为正常组、模型空白组、补肾中药组、健脾中药组、活血中药组、骨疏康颗粒阳性对照组.灌胃给药9周.应用xR-26型双能x线骨密度仪测定股骨骨密度,以评价动物模型的成立及药物疗效.实时定量RT-PCR(real-time quantitative,RT-PCR)检测骨组织Osterix mRNA表达,Western Blot检测骨组织Osterix蛋白表达.结果:①股骨骨密度:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾中药组明显升高(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显升高(P<0.05),健脾中药组和活血中药组虽有升高趋势,但无统计学意义.②骨组织Osterix mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾中药组明显上调(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组也有明显上调(P<0.05),健脾中药组和活血中药组虽有所升高,但无统计学意义.结论:①肌注地塞米松可以成功复制GIOP大鼠模型.②骨组织Osterix mRNA及蛋白表达水平降低可能是GIOP的发病机制之一.③补肾中药具有明显防治效果,其作用机制与上调骨组织OsterixmRNA及蛋白表达密切相关.

  • 糖皮质激素性骨质疏松症的预防

    作者:兰海;王辉;刘博;王朋;宋丽红

    目的 研究鲑鱼降钙素注射液对糖皮质激素性骨质疏松症的预防作用.方法 采集来我院就诊的由于慢性疾病使用糖皮质激素导致的糖皮质激素性骨质疏松症患者65名,年龄在70~85岁之间.按照性别随机分为两组:治疗组和对照组.治疗组给予鲑鱼降钙素注射液治疗,对照组不给药.结果 实验组的骨密度大于对照组,经统计学检验,P<0.05,结果有统计学意义.表明鲑鱼降钙素注射液能够预防糖皮质激素性骨质疏松.结论 鲑鱼降钙素注射液可以预防糖皮质激素性骨质疏松症.

  • 糖皮质激素性骨质疏松症的发生机制

    作者:李雪琼;沈芸

    本文从对骨组织的作用、对钙吸收的影响、对垂体激素的调控和对肌肉的影响等4个方面论述糖皮质激素性骨质疏松症的发病机制,并进一步探讨其发病的分子机制.

  • 吸入糖皮质激素治疗支气管哮喘与骨质疏松的研究进展

    作者:黄春雷;吴斌

    糖皮质激素性骨质疏松症是糖皮质激素治疗支气管哮喘的严重并发症之一,尤其是支气管哮喘患者长期应用糖皮质激素越来越受到人们的关注.糖皮质激素通过多种机制干扰骨质的形成和吸收,从而导致糖皮质激素性骨质疏松症,对糖皮质激素治疗支气管哮喘与骨质疏松的研究具有重要的临床意义,故本文从糖皮质激素及不同给药途径引发骨质疏松机制、临床特点、诊断和防治几方面作一综述.

  • 补肾益髓中药对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织Runx2的mRNA及蛋白表达的影响

    作者:王剑;郑洪新;宗志宏;杨芳;朱辉;张国哲

    目的 观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠模型骨组织Runt相关基因2(Runx2)mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药的疗效及其调控作用.方法 采用后肢肌注地塞米松(2.5 mg/kg,每周2次,连续9w)的方法复制GIOP大鼠模型,按体重分层随机分为正常组、模型空白组、补肾益髓中药组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组.灌胃给药9w.应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,以评价动物模型的成立及药物疗效.实时定量RT-PCR(Real-Time Quantitative RT-PCR)检测骨组织Runx2 mRNA表达,Western blot检测骨组织Runx2蛋白表达.结果 (1)股骨骨密度:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药组明显升高(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显升高(P<0.05),补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05).(2)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药组明显上调(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组也有明显上调(P<0.05),补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有所升高,但无统计学意义(P>0.05).结论 (1)肌注地塞米松可以成功复制GIOP大鼠模型,(2)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达水平降低可能是GIOP的发病机制之一,(3)应用补肾益髓中药具有明显防治效果,疗效优于健脾中药和活血中药,其作用机理与上调骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达密切相关.

  • 凋亡在糖皮质激素性骨质疏松症中的研究进展

    作者:丁香莹;粱敏

    糖皮质激素(glucocorticoid,GC)是临床常用的药物之一,由于良好的抗炎、抗风湿、抗休克和免疫抑制作用而广泛用于风湿性疾病、呼吸系统疾病等的治疗,同时GC在骨重建过程中也发挥着重要的作用.然而长期应用GC会导致许多并发症,其中骨量丢失尤其是骨质疏松性骨质疏松(GIOP)是为严重的并发症.凋亡对保持组织的健康和正常生长具有十分重要的意义,但异常的凋亡就可能造成机体损伤.基于细胞凋亡的形态特征和分子改变过程,有很多种方法可进行细胞凋亡的检测.近年来的研究发现成骨细胞是GC主要的作用靶点,GC主要是通过抑制成骨细胞介导的骨形成,造成了骨量的丢失,其中成骨细胞凋亡可能是GC抑制骨形成的主要环节,现就凋亡在GIOP中的作用及作用机制进行综述,为提高临床对GIOP的认识提供帮助.

  • 益肾壮骨法治疗系统性红斑狼疮患者继发的激素性骨质疏松症48例的临床研究

    作者:佟颖;刁志惠;孙乐;杨华森;姚春丽;庞庆宝;王晨彤

    目的 观察益肾壮骨法治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)合并糖皮质激素性骨质疏松(Glucocorticoid osteoporosis,GIOP)患者的影响,客观评价其疗效.方法 将48例患者采用随机分组方法分为治疗组和对照组各24例.两组均予以西医常规治疗+一定剂量的糖皮质激素继续控制病情+调节骨骼代谢药物(碳酸钙D3、骨化三醇等),治疗组在西医治疗基础上加用我院自制剂生髓健骨胶囊(由山药、杜仲、熟地、淫羊藿、枸杞、蛤蚧、山茱萸、鹿角霜等组成).治疗时间以6个月作为1个疗程,在治疗过程中,停止应用导致骨质疏松症发生及治疗相关的各种药物、和理疗方法.治疗1个疗程后,治疗前、治疗后进行比较2组的临床疗效、骨密度值、中医证候积分的变化、骨代谢相关生化指标血钙、血磷和血清碱性磷酸酶水平的变化情况.结果 (1)治疗1个疗程后,比较得出治疗组相对于对照组的疗效显著,(P<0.01),差异有统计学意义.(2)两组治疗后中医证候评分和总分,较治疗前相比显著降低(均P<0.05);治疗后比较两组,得出治疗组的主症证候单项评分及总积分均较对照组下降更为明显(均P<0.05).(3)治疗组的腰椎(L2-4)、左、右髋骨3个部位的骨密度(bone mineral density BMD)值在治疗1个疗程后,无显著的变化(均P>0.05),而治疗后的对照组腰椎(L2-4)、左、右髋骨的骨密度值均较治疗前显著下降(P<0.05).治疗后2组比较,治疗组的骨密度值均明显高于对照组(P<0.05).(4)有关骨代谢生化指标方面,治疗组在治疗后呈略下降趋势(P>0.05),而对照组生化指标值则显著上升(P<0.05),治疗后的2组进行对比,发现对照组各生化指标值显著高于治疗组(P<0.05).(5)治疗过程中,患者无任何不良症状,也无脱落病例.结论 益肾壮骨法对于系统性红斑狼疮合并GIOP的患者缓解症状,改善病情有很好的效果.

  • 骨疏康胶囊治疗糖皮质激素性骨质疏松症的临床研究

    作者:杨亚珊;罗云霞;竺红

    目的 观察骨疏康胶囊治疗糖皮质激素性骨质疏松症的疗效.方法 选取宁夏医科大学总医院门诊及住院确诊的风湿性疾病并糖皮质激素性骨质疏松症患者80例,随机分为试验组和对照组,每组各40例.试验组患者口服骨疏康胶囊4粒BID,阿法骨化醇软胶囊0.5 μg QD,碳酸钙D3片1片BID,对照组患者口服阿法骨化醇软胶囊0.5 μg QD,碳酸钙D3片1片BID,两组均连续用药12个月,观察其骨密度及骨代谢指标的变化.结果 试验组腰椎(L1-4)、股骨颈、大转子、全髋的骨密度均较对照组升高,与治疗前相比明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05).骨代谢指标中,试验组血清钙治疗前后无明显变化(P>0.05),骨钙素、碱性磷酸酶降低,25-羟维生素D、I型前胶原N端前肽升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,血清钙与骨钙素无明显变化(P>0.05),碱性磷酸酶降低,25-羟维生素D、Ⅰ型前胶原N端前肽升高,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 骨疏康胶囊可改善糖皮质激素性骨质疏松症患者的骨密度和骨代谢,具有临床使用价值.

  • 糖皮质激素性骨质疏松症的中医证型分布特点

    作者:崔健超;杨志东;江晓兵;粱德;任辉;沈耿杨;林顺鑫;唐晶晶;张顺聪

    目的 探讨糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)患者的中医证型分布特点.方法 收集在2012年9月1日至2014年12月31日在我院住院的GIOP的患者病历,参照中医证型相关标准,以患者临床表现为依据,将每个患者归纳到不同的证型.结果收集了过去28个月在我院住院符合纳入标准的病例数共242例,中医证型分布分别为肾阳虚证127例、肾阴虚证61例、脾胃气虚证31例、肝郁气滞证16例、瘀血痹阻证7例,分别占总人数的52.48%、25.21%、12.81%、6.61%、2.89%.结论 糖皮质激素性骨质疏松症的中医证型分布以肾虚证为主,其中以肾阳虚证发生率高,这可能与糖皮质激素类药物的药理特点有关.

  • 鹿瓜多肽注射液治疗糖皮质激素性骨质疏松症的疗效观察

    作者:陆茂;叶俊儒;张云光;沈跃莉;唐蓉芳

    目的 观察鹿瓜多肽注射液对糖皮质激素性骨质疏松症的治疗作用.方法 60例糖皮质激素性骨质疏松症患者随机分为2组,治疗组32例患者采用鹿瓜多肽注射液治疗.对照组28例患者采用钙而奇D治疗,检测治疗前后股骨颈及腰椎(L1~L4)骨密度的变化情况.结果 治疗组和对照组患者腰椎(L1~L4)及股骨颈骨密度明显增加,治疗组较对照组增加显著.结论 鹿瓜多肽注射液对糖皮质激素性骨质疏松症有较好疗效.

  • 糖皮质激素性骨质疏松症的预防和治疗

    作者:徐胜前;徐建华

    目的 综述糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)的临床特征及预防和药物治疗.方法 回顾近10年来国内外文献,探讨GIOP的临床特征及药物预防和治疗.结果 泼尼松多于7.5 mg/d时常伴显著的骨丢失,在初运用糖皮质激素治疗的6个月里,骨量丢失严重(5%~15%).GIOP以松质骨的骨密度降低为主,其导致的椎体压缩性骨折明显增加.维生素D加钙对GIOP惠者腰椎骨密度减少有预防性作用.二膦酸盐能增加腰椎骨密度,几乎可用于所有GIOP的患者包括年轻人和已经用性激素替代治疗的患者.降钙素的预防性应用没有显示出改善腰椎骨密度的作用,而治疗性给药有改善作用.结论 维生素D加钙是预防GIOP的基本措施,二膦酸盐具有预防和治疗双重作用,可作为一线用药.降钙素可作为GIOP治疗的二线药物,用于不能耐受二膦酸盐或性激素替代治疗的患者.

  • 基于治未病理论探讨从肝脾肾防治糖皮质激素性骨质疏松症

    作者:宋光明;张莉

    随着糖皮质激素在临床的广泛应用,糖皮质激素性骨质疏松症的发病率日益增高,严重影响患者的生活质量.如何发挥中医特色,应用中医治未病和脏腑理论防治糖皮质激素性骨质疏松症值得我们去探讨和研究.本文通过分析糖皮质激素性骨质疏松症病因病机,和肝脾肾关系;基于治未病理论探讨如何从肝脾肾防治糖皮质激素性骨质疏松症,为临床提供有效的方法.

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